VEGF及nm23在子宫内膜异位症中的表达及意义
2018-08-27周伟新凌学民王建蔚
周伟新 凌学民 王建蔚
子宫内膜异位症是妇科临床上的常见病和多发病,虽然子宫内膜异位症是良性病变,但在某种程度上存在恶性行为,VEGF是血管形成的关键促进因子,可直接作用在血管内皮细胞,通过对内皮细胞的刺激形成新生血管,为异位内膜的存活和发展提供营养支持［1］。nm23是一种重要的肿瘤转移抑制基因,有可能对肿瘤血管的形成起到抑制性作用。本研究以30例子宫内膜异位症患者和30例子宫内膜正常者为研究对象,对VEGF及nm23在子宫内膜异位症中的表达进行探讨和评价,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本次研究选取2014年8月～2017年8月在本院接受治疗的30例子宫内膜异位症患者作为观察组,另选取同期不孕症或流血查因等30例正常内膜者作为对照组。对照组年龄23～48岁,平均年龄(35.26±4.33)岁。观察组年龄24～49岁,平均年龄(35.38±4.54)岁；根据美国生育协会AFS修正的子宫内膜异位症分期标准进行分期,Ⅰ～Ⅱ期患者10例,Ⅲ～Ⅳ期患者20例；增生期18例,分泌期12例。纳入标准［2］：①观察组患者均经手术确诊为子宫内膜异位症,对照组均经病理证实子宫内膜正常,且无器质性疾病；②半年内均未服用过激素类药物；③知情、自愿参与。
1.2 研究方法 刮取观察组25例患者的在位内膜、30例患者的异位内膜及对照组的正常内膜组织标本。所有标本均在手术时获取,使用10%甲醛溶液进行常规固定,常规脱水,使用石蜡包埋,4 μm连续切片,染色,在光镜下对标本的组织学形态进行观察,筛选组织标本。采用免疫组织化学法进行检测,VEGF为兔抗人多克隆抗体,nm23为鼠抗人单克隆抗体,SP试剂盒和DNA显色液均由湖州英创生物科技有限公司提供。SP法步骤：脱蜡至水后抗原修复,冷却后磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗3次,3 min/次。除去PBS,加氧化物酶阻断剂,阻断30 min,用PBS冲洗。将PBS除去,加Triton透化15 min,除去Triton后,加入非免疫血清封闭液,封闭30 min。除去血清,加1抗,室温下孵育2 h,用PBS洗3次。除去PBS后,加入2抗,室温下孵育10 min,PBS洗3次。除去PBS后,切片滴加DNA染色。
1.3 观察指标及判定标准 比较异位内膜、在位内膜、正常内膜VEGF及nm23表达情况。以内膜细胞中出现棕黄色或褐色颗粒为VEGF、nm23阳性染色,综合细胞染色强度和染色细胞所占面积的得分进行评估：①细胞染色强度标准［3］：0分表示不着色,1分表示黄色,2分表示棕黄色,3分表示黄褐色。②染色细胞所占面积标准［4］：0分为无阳性细胞染色,1分为面积≤25%,2分表示面积为26%～50%,3分表示面积＞50%。
1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验；计数资料相关性分析采用Spearman相关性分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 子宫异位内膜、在位内膜及正常内膜VEGF阳性表达率比较 子宫异位内膜阳性表达率为86.67%,高于在位内膜的64.00%、正常内膜的36.67%,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。
2.2 子宫异位内膜、在位内膜及正常内膜nm23阳性表达率比较 子宫异位内膜nm23阳性表达率为33.33%,明显低于在位内膜的72.00%、正常内膜的93.33%,差异有统计学意义 (P＜0.05)。见表 2。
2.3 子宫内膜异位症中VEGF和nm23表达的相关性分析在子宫内膜异位症中VEGF和nm23无明显相关性(r=0.251,P＞0.05)。见表 3。
表1 子宫异位内膜、在位内膜及正常内膜VEGF阳性表达率比较(n,%)
表2 子宫异位内膜、在位内膜及正常内膜nm23阳性表达率比较(n,%)
表3 子宫内膜异位症中VEGF和nm23表达的相关性分析(n)
3 讨论
子宫内膜异位症常见于育龄期女性,虽然是一种良性疾病,但异位的内膜有侵袭、种植、转移和复发等恶性生物学行为,病理见图1。随着分子生物学的进一步和发展和血管生成理论的完成,血管生成在子宫内膜异位症发生发展中的作用得到了更多证明,新生血管可以为异位内膜在盆腔局部和病灶的种植提供营养。因此,对VEGF和nm23在子宫内膜异位症发生发展中起到的作用和相关机制进行研究意重大。
本次研究结果显示,从子宫异位内膜、在位内膜及正常内膜的VEGF表达情况来看,子宫异位内膜阳性表达率为86.67%,高于在位内膜的64.00%、正常内膜的36.67%,差异有统计学意义(P＜0.05)。子宫异位内膜nm23阳性表达率为33.33%,明显低于在位内膜的72.00%、正常内膜的93.33%,差异有统计学意义(P＜0.05)；在子宫内膜异位症中VEGF和nm23无明显相关性(r=0.251,P＞0.05),本结果与相关报道相符［5］。子宫内膜异位症患者腹腔液中的VEGF水平提高,可增加腹壁微血管生成量,导致盆腔局部对异位内膜的种植接受能力提高,在孕卵植入和发育中有重要作用［6-8］。此外,VEGF有可能促进子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜的生成,见图2。nm23在疾病的发病和进展中起到重要作用,nm23是一种重要的肿瘤转移抑制基因,其表达水平降低可能与异位内膜存活和转移、浸润等变化有关,但具体的影响机制尚不明确,仍需要深入研究［10］。
图2 HE染色,X10：子宫肌层见异位宫内膜形态及间质成分
综上所述,在子宫内膜异位症的发生和发展过程中,VEGF和nm23起到重要作用,对两者进行深入研究,可用于了解子宫内膜异位症的发生机制,为临床治疗提供指导性建议。
