不同药剂对南方根结线虫的室内毒力测定

李秋捷，陆秀红，黄金玲，张禹，刘志明*，曾东强*

(1.广西大学 农学院，广西 南宁 530003； 2.广西农业科学院 植物保护研究所，广西 南宁 530007)

根结线虫病是重要农作物病害之一，据孔祥义[1]的文献记载，南方根结线虫(Meloidogyneincognita)是引起农作物根结线虫病的主要种群。目前对根结线虫病的防治主要以化学药剂为主[2-3]。以高效、低毒、对环境友好为特点的新型非熏蒸类杀线虫剂正不断出现，并且逐渐取代上一代高毒性的杀线虫剂药剂。本试验主要通过测定氟吡菌酰胺等4种杀线剂对南方根结线虫的毒力，为根结线虫的相关的防治研究以及田间防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

41.7%氟吡菌酰胺悬浮剂(拜耳作物科学有限公司)，75%噻唑膦乳油(河北三农农用化工有限公司)，200 g·L-1丁硫克百威乳油(苏州富美实植物保护剂有限公司)，1.8%阿维菌素乳油(中国农科院植保所廊坊农药中试厂)。

试验对象为南方根结线虫2龄幼虫。从广西壮族自治区农业科学院温室中的辣椒根部分离出南方根结线虫的卵块，经单卵块接种在辣椒上纯化培养后，采集病根，挑取卵囊进行孵化，获得大量南方根结线虫2龄幼虫。

1.2 方法

1.2.1 药剂的密度测量

试验需要测定的LC50为质量浓度，使用药剂均以毫升为计量单位，需要测定密度进行体积-质量换算。将50 mL烧杯放置在千分天平上，去皮，然后将上述药剂各加1 mL至烧杯中，记录质量，计算出各药剂的密度。

1.2.2 药液的配制

将41.7%氟吡菌酰胺悬浮剂用水稀释成5、2.5、1.25、0.625和0.312 5 mg·L-1，75%噻唑膦乳油稀用水释成100、50、25、12.5、6.25 mg·L-1，将200 g·L-1丁硫克百威乳油用水稀释成1 200、600、300、150、75 mg·L-1，将阿维菌素乳油用水稀释成0.08、0.04、0.02、0.01和0.005 mg·L-1。

1.2.3 线虫悬浮液的制备

从根结线虫病发病较为严重的辣椒的根部挑取根结线虫卵囊置于培养皿内，每皿放置卵囊100个。培养皿置于恒温箱中以25 ℃进行孵化。每24 h在体视显微镜下使用一次性滴管收集根结线虫至20 mL西林瓶中，制备线虫悬浮液，根结线虫悬浮液的浓度约为400头·mL-1。

1.2.4 药剂毒力的测定

取24孔细胞培养板(6×4)，每孔滴入线虫悬浮液0.5 mL。每列为1个浓度处理，重复4次，各孔滴入药液0.5 mL，使各药剂在孔板中的浓度为41.7%氟吡菌酰胺悬浮剂2.5、1.25、0.625、0.312 5、0.156 3 mg·L-1，75%噻唑膦乳油50、25、12.5、6.25、3.125 mg·L-1，200 g·L-1丁硫克百威乳油600、300、150、75、32.5 mg·L-1，1.8%阿维菌素乳油0.040、0.020、0.010、0.005、0.002 5 μg·L-1。

1.3 根结线虫的死亡判断与统计分析

1.3.1 死亡判断

可从线虫形态来对根结线虫的死亡做出快速判断，死亡的线虫身体僵直或有呈角度的弯折，未死亡的根结线虫虫体有呈弧度的弯折(图1～2)。若从根结线虫的形态无法明确判断线虫的死亡与否，可采用针刺法进行判断。

图1 未死亡的根结线虫

1.3.2 数据统计

使用Excel对数据进行记录与整理，使用IBM SPSS Statistics 23对数据进行分析。处理24、48 h后，使用倒置显微镜观察孔板内线虫的死亡情况，记录根结线虫总数以及死亡数，计算校正死亡率。

图2 死亡的根结线虫

2 结果与分析

2.1 药剂密度

由表1可知，本次试验中1.8%阿维菌素乳油对南方根结线虫的毒力最高，并且明显高于75%噻唑膦及200 g·L-1丁硫克百威。

表1 4种药剂的密度

2.2 毒力

由表2可知，24、48 h处理的1.8%阿维菌素乳油对南方根结线虫的LC50分别为0.009 785和0.008 481 μg·L-1；41.7%氟吡菌酰胺悬浮对南方根结线虫的毒力低于1.8%阿维菌素乳油，但明显高于75%噻唑膦乳油以及200 g·L-1丁硫克百威乳油；200 g·L-1丁硫克百威乳油对南方根结线虫的毒力明显低于上述药剂。

表2 4种杀线虫剂对根结线虫的毒力测定运算结果

75%噻唑膦乳油与200 g·L-1丁硫克百威乳油对南方根结线虫24、48 h毒力相差较大。75%噻唑膦乳油24、48 h的毒力分别为35.036、20.302 mg·L-1，丁硫克百威乳油的24、48 h毒力分别为567.777、171.374 mg·L-1。上述2种药剂的48 h毒力明显高于24 h毒力。

3 讨论

1.8%阿维菌素乳油对南方根结线虫表现出较高毒力，24h和48h处理对南方根结线虫的LC50分别为0.009785和0.008481μg·L-1，该结果与已有试验结果有较大差异。朱卫刚等[4]测定的1.8%阿维菌素乳油对南方根结线虫的LC50为1.48mg·L-1，张俊龙等[5]测定的1.8%阿维菌素乳油对南方根结线虫的LC50为14.926mg·L-1，这可能是南方根结线虫不同地域抗药性水平有差异所致，需要更进一步的试验证实。邹雅新等[6]测定的1.8%阿维菌素乳油对南方根结线虫处理24和48h的LC50分别为0.00851和0.00734mg·L-1，与本次试验的测定结果相近。另外，相对于75%噻唑膦乳油和200g·L-1丁硫克百威乳油而言，41.7%氟吡菌酰胺悬浮剂对南方根结线虫也表现出了较高的毒力。