菜豆不定根的诱导
2018-08-08段永平赵美荣
段永平 赵美荣
(内蒙古赤峰学院生命科学学院 024000)
植物生长调节剂的一个重要生理作用是诱导植物插条产生不定根[1],植物生长素对插条不定根诱导实验是许多学校选择开出的学生实验,在这个实验过程中,常用的方法采用萘乙酸处理易生根的植物插条为材料[2]观察对不定根诱导的影响,在处理材料过程中,均采用小烧杯水培的方式。但是,采用这种方法主要存在的问题是: 如果处理时间较长,会使浸入处理液中的材料发生腐烂的现象,导致实验失败。经过几年的实验摸索,利用菜豆(Phaseolusvulgaris)芽下胚轴作为实验材料,使用培养皿和滤纸夹层进行培养,较好地解决了材料处理过程中腐烂的问题,取得了较好的实验效果,具体做法如下。
1 材料的准备
菜豆芽的准备采用王金祥的方法[3],挑取饱满的菜豆种子,清水清洗6遍,用0.1%的NaClO消毒30min,再用清水冲洗6次,然后浸种8h,将水倒掉,上覆湿纱布,在25℃~28℃条件下培养,待下胚轴长度达到4~5cm时,即可作为实验材料使用。
2 装置准备
在12cm的玻璃培养皿铺3层直径11cm的滤纸,再用滤纸裁成10cm×7cm的长方形10张,其中,将3张长方形滤纸叠在一起使用,10cm长边一侧接触培养皿底部,另一侧担在培养皿的边缘,留另外2张滤纸叠在一起,将来覆盖在实验材料上面备用。
3 材料处理
取培养好的菜豆芽,在豆芽根上0.5cm处用刀片切除菜芽根;培养皿中加入处理材料的萘乙酸溶液(按设定的浓度进行配制),将去掉菜豆芽的根的实验材料5~10株平铺在长方形的滤纸上,摆放位置上端以子叶长出滤纸0.5~1cm为宜,避免菜豆芽的茎尖直接接触滤纸为宜;然后,盖上备用的滤纸,最好上、下层滤纸对齐,待萘乙酸溶液完全浸湿滤纸后,保持培养皿萘乙酸溶液0.5cm左右,然后放入培养箱进行培养。这样处理实验材料,滤纸通过毛细管现象从培养皿下部获得萘乙酸溶液,大豆芽下胚轴部分直接接触萘乙酸溶液达到处理材料的目的。同时,由于处理材料处在两夹层滤纸中间,材料下胚轴可通过滤纸缝隙获得O2,保证材料进行有氧呼吸,这样就避免水培方法处理实验材料致使O2供应不足,引起材料进行无氧呼吸、材料腐烂的问题。待达到处理时间,即可进行观察、统计设计的实验结果(图1)。
图1 菜豆不定根诱导结果
在相同的实验中,也可使用市场购买大豆(Glycinemax)芽等作为实验材料,也能获得比较好的实验效果。
*前文受翰思科学仪器公司关注*