血浆热休克蛋白90α评估非小细胞肺癌化疗疗效的意义

刘若男 江倩 柯张延 郭嘉 吴海波 高敏 张妍蓓

安徽医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科（合肥 230022）

近年来，肿瘤的高发病率备受人们关注［1］。在所有恶性肿瘤中，肺癌发病率及病死率均居较高地位，其中85%以上为非小细胞肺癌［2-3］。因肺癌早期常无明显临床症状，当患者因出现症状而就诊时，多处晚期，仅能采取以化疗为主的综合治疗［4］。因此，肺癌的早期诊断极为重要。目前肺癌的诊断方法多样，如影像学、病理学、血清肿瘤标记物检测等［5］。其中，肿瘤标记物因其简便、快捷、无创而受到广大研究者的青睐［6］。热休克蛋白90α（HSP90α）在维持分子伴侣结构、调控细胞周期及凋亡、协调激素信号传递等方面发挥重要作用［7-8］。相关研究表明，在肺癌进展中，HSP90α处于动态演变过程，可作为一种新型肿瘤标记物［9］。目前HSP90α已被证实在NSCLC等多种肿瘤细胞中含量增高且其对肺癌诊断的灵敏度及特异度均较高［6，10］。因国内外对于HSP90α在肺癌化疗疗效评价方面的研究仍较少，故开展本研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2016年1月1日至2017年11月30日安徽医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科收治的NSCLC患者47例。其中男33例，女14例，中位年龄64岁。病理分型：肺鳞癌13例，腺癌31例，腺鳞癌3例。有胸腔积液组25例，无积液组22例。入选标准：（1）所有入选患者均接受常规实验室及影像学检查，且均经病理组织活检确诊；（2）为原发性肺癌，且未接受其他治疗；（3）对化疗药物均无过敏；（4）所有患者病例资料均记录完整，PS评分＜2分，可耐受化疗。排除标准：（1）有严重心脑肾等脏器疾病，不耐受化疗者；（2）有严重感染者；（3）依从性差，不能配合治疗者；（4）妊娠期及哺乳期妇女。

1.2 试剂与方法 应用酶联免疫法检测血浆HSP90α浓度，其定量检测试剂盒、酶免分析仪均由烟台普罗吉生物科技发展有限公司提供。所有入选患者分别于首次确诊及第4次化疗结束后，于清晨空腹时使用EDTA抗凝管采集静脉血2 mL，于4℃3 000 r/min离心10 min，分离血浆，并于-80℃冻存，所有标本统一解冻后，应用酶联免疫法检测，具体检测方法严格按说明书进行。HSP90α的正常参考值范围为0～82.06 ng/mL，＞82.06 ng/mL即为阳性。

1.3 治疗及疗效评价 收集的NSCLC患者均采用以卡铂为基础的联合化疗（鳞癌为紫杉醇联合卡铂，腺癌为培美曲塞联合卡铂），21 d为1个周期，经4个周期化疗结束后，根据WHO实体瘤近期疗效评定标准评估，完全缓解（CR）0例，部分缓解（PR）2例，稳定（SD）29例，进展（PD）16例。CR+PR+SD为化疗有效组，（PD）为化疗无效组，即经过4个周期化疗结束后可分为化疗有效组31例和化疗无效组16例。

1.4 统计学方法 数据处理用SPSS 16.0统计软件，计量资料以表示，化疗前后的均数比较采用配对t检验，不同病理类型间的均数比较采用方差（F）分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 化疗前后各肿瘤标记物水平监测 血浆HSP90α、CYFRA211、D⁃D及血红蛋白（Hb）水平在化疗后明显低于化疗前，其中血浆HSP90α及Hb浓度在化疗前后差异有统计学意义；血浆CEA、NSE及白蛋白（ALB）水平在化疗后较化疗前升高，差异无统计学意义。见表1。

表1 化疗前后各肿瘤标记物水平Tab.1 The levels of tumor markers before and after chemotherapy ±s

表1 化疗前后各肿瘤标记物水平Tab.1 The levels of tumor markers before and after chemotherapy ±s

化疗前化疗后t值P值HSP90α（ng/mL）115.12±85.09 72.55±66.99 2.729 0.009 CEA（ng/mL）28.86±82.68 30.50±108.47-0.315 0.754 CYFRA211（ng/mL）7.36±7.18 5.69±6.14 1.744 0.088 NSE（ng/mL）17.14±7.70 23.50±51.95-0.881 0.383 D⁃D（ng/mL）2.30±4.83 1.31±1.52 1.392 0.170 Hb（g/L）127±15 116±15 5.584 0.000 ALB（g/L）39.37±4.16 40.16±11.58-0.449 0.655

2.2 化疗有效组与无效组在化疗前后各肿瘤标记物水平监测 化疗有效组中，各肿瘤标记物水平化疗后均较化疗前有所下降，其中血浆HSP90α、CYFRA211及Hb在化疗前后差异有统计学意义；化疗无效组中，血浆HSP90α、CEA、NSE及ALB化疗后水平较化疗前有所升高，差异无统计学意义，见表2。

表2 化疗有效组与无效组化疗前后各肿瘤标记物水平Tab.2 The levels of tumor markers were compared between the effective and ineffective groups of chemotherapy ±s

表2 化疗有效组与无效组化疗前后各肿瘤标记物水平Tab.2 The levels of tumor markers were compared between the effective and ineffective groups of chemotherapy ±s

HSP90α（ng/mL）CEA（ng/mL）CYFRA211（ng/mL）NSE（ng/mL）D⁃D（μg/mL）Hb（g/L）ALB（g/L）组别有效组化疗前化疗后t值P值无效组化疗前化疗后t值P值例数31 132.79±87.36 59.35±39.98 4.457 0.000 17.27±32.00 14.09±26.23 1.243 0.223 6.21±4.72 4.05±3.37 3.439 0.002 16.61±8.24 15.87±6.22 0.482 0.633 2.89±5.81 1.42±1.82 1.374 0.180 124±15 114±14 3.899 0.001 39.25±4.24 38.35±4.85 0.890 0.380 16 80.88±71.02 98.12±97.51-0.618 0.546 51.33±134.54 62.29±181.86-0.761 0.459 9.60±10.26 8.87±8.74 0.282 0.782 18.18±6.67 38.29±88.57-0.957 0.354 1.17±1.46 1.09±0.66 0.256 0.802 131±15 119±17 4.473 0.000 39.60±4.13 43.68±18.55-0.843 0.413

2.3 有无胸腔积液对化疗前后各肿瘤标记物水平的影响 有胸腔积液组中，血浆HSP90α、CY⁃FRA211、NSE、D⁃D、Hb及ALB化疗后水平较化疗前有所下降，其中血浆HSP90α、CYFRA211、Hb在化疗前后差异有统计学意义；无积液组中，血浆HSP90α、CEA、Hb化疗后水平较化疗前有所下降，其中Hb水平在化疗前后差异有统计学意义。见表3。

2.4 不同病理分型化疗前后血浆HSP90α水平化疗后肺鳞癌组、腺癌组、腺鳞癌组血浆HSP90α水平均较化疗前有所下降，差异无统计学意义，见表4。

表3 有胸腔积液组与无胸腔积液组化疗前后各肿瘤标记物水平Tab.3 The levels of tumor markers were presented before and after chemotherapy in patients who had hydrothorax or not ±s

表3 有胸腔积液组与无胸腔积液组化疗前后各肿瘤标记物水平Tab.3 The levels of tumor markers were presented before and after chemotherapy in patients who had hydrothorax or not ±s

组别有积液化疗前化疗后t值P值无积液化疗前化疗后t值P值例数25 HSP90α（ng/mL）CEA（ng/mL）CYFRA211（ng/mL）NSE（ng/mL）D⁃D（μg/mL）Hb（g/L）ALB（g/L）134.17±104.35 58.03±32.74 3.547 0.002 37.80±109.62 43.87±146.55-0.72 0.479 7.85±8.87 4.50±5.40 3.001 0.006 15.80±4.52 15.00±4.06 0.832 0.414 3.52±6.37 1.37±1.48 1.695 0.103 126±17 111±16 4.572 0.000 39.45±4.39 38.96±4.63 0.499 0.622 22 93.47±49.92 89.05±89.83 0.218 0.829 18.71±32.24 15.30±27.82 0.611 0.548 6.80±4.72 7.04±6.75-0.157 0.877 18.67±10.10 33.16±75.56-0.941 0.357 0.92±0.99 1.23±1.60-0.812 0.426 128±13 121±13 3.552 0.002 39.27±3.99 41.53±16.29-0.618 0.543

表4 不同病理分型化疗前后血浆HSP90α水平Tab.4 The levels of plasma HSP90α were showed among different pathological types before and after chemotherapy

3 讨论

肺癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤，其发病率及病死率均较高［3］，故肺癌的早期诊断尤为重要。在众多检测方法中，血清肿瘤标记物因其无创、简便而备受关注。其中，HSP90α成为近年来的研究热点之一。HSP90α在致癌信号的传导、血管的新生、抗细胞凋亡及肿瘤转移等方面发挥重要作用［7］。张闻龙等［9］亦在研究中表明HSP90α可作为一种新型肿瘤标记物。

本研究将NSCLC患者化疗前后的血浆HSP90α浓度进行比较，结果发现，化疗后HSP90α水平较化疗前明显下降，该结果与SHI等［11］的研究结果一致，表明化疗对HSP90α在肺癌细胞中的表达具有较为重要的影响，在化疗过程中监测HSP90α浓度对于评价化疗疗效有着极其重要的作用。另外，本研究亦对入组患者化疗结束后的疗效进行评价，结果显示：在化疗有效组中，血浆HSP90α及肺癌三项水平均较化疗前有所下降，其中HSP90α及CYFRA211在化疗前后差异有统计学意义；由此可见，单独检测血浆HSP90α水平对于NSCLC化疗后的疗效评价优于肺癌三项（因其简化了检测程序并降低了检测成本），此为患者化疗后随访提供更优选择。

肺癌患者常伴有胸腔积液，在本研究中，有胸腔积液组患者化疗后HSP90α水平较化疗前明显下降，而无积液组患者无明显差异，由此可见化疗对于有积液组患者疗效更佳。SHI等［12］研究表明：肺癌患者血浆HSP90α水平在不同病理分型间无明显差异，与本研究结果一致。但本研究因样本量少，病理分型间可能存在偏倚，在后期研究中将增大样本量使得实验数据更加完善。

晚期肺癌患者多伴有凝血功能异常，研究表明，纤溶系统及凝血机制的改变导致机体内血液黏稠度上升，使得机体呈现出高凝状态，此为肺癌患者机体内最常见的改变之一［12］。相关研究表明，肺癌患者的预后好坏与血浆D⁃D水平呈负相关。本研究中，血浆D⁃D水平在化疗前后差异显著，表明化学治疗可改善肺癌患者的凝血状态，该检查对于肺癌化疗疗效的评价亦有重要意义。

本研究对入选患者的Hb进行了分析，结果发现，无论是化疗有效组还是无效组，Hb水平在化疗前后差异显著。如上所述，肺癌患者就诊时多已处晚期，长期恶病质使得患者处于贫血状态，研究表明，肿瘤组织缺氧是诱导化疗耐药的重要原因，而Hb作为机体内携氧的主要分子，具有重要的参考价值［13］。

本研究对入组患者化疗前后的血浆HSP90α水平、肺癌三项、Hb、ALB及D⁃D分别进行了探讨，结果显示血浆HSP90α可用于评估化疗疗效并指导后续治疗。但因本研究样本量有限，对于病理分型间的探讨可能存在偏倚。另外，本研究仅检测了肺癌患者首诊及第4次化疗结束后的各肿瘤标记物水平，在后期研究中将增大样本量，并对每次化疗结束后各肿瘤标记物进行检测，以便得出其中的相关关系。除此之外，还将对血浆HSP90α水平与肺癌患者靶向治疗及客观生存率间的关系分别进行探讨。