清热祛湿健脾方联合恩替卡韦分散片对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者免疫状态的影响

鲁艳平 胡敬宝 郑娟丽 杨从意 陈慧基

乙型肝炎在我国病发率逐渐呈大幅上升趋势, 主要因病毒肝炎群的双螺旋环状封闭DNA病毒引发的, 作为人们死亡最常见的一种原因, 该病以病程较长、治愈率低且易复发性为特征, 治疗不当或不及时易致肝硬化, 病发人群较广,对患者生活及身心健康造成较严重威胁。西医学上乙型肝炎其发病机制主因乙型肝炎病毒在体内进行持续复制, 抗原不断表达与释放, 引发肝内炎症因子频繁活动。但存在药用后并发症及耐药性缺陷, 限制其应用范围［1,2］。寻找治疗效果好、低不良作用的治疗方法是关键。在传统中医中无乙型肝炎的相关记载, 经辨证归属“黄疸”、“胁痛”等范畴。乙型肝炎病基本病机初期聚结在经络, 久病伤络入血, 病邪滞留,气血失调, 脏腑受损相互间产生影响。肝体失养, 失疏泄,肝气瘀结, 脾失健运, 气化乏源, 湿毒痰瘀阻, 则应以消肿散结、化瘀解毒、健脾理气为治疗基本原则［3］。中医疗法主以中医基本理论为原则进行治疗, 疗效较为确切, 毒副作用较少。目前对乙型肝炎机制进行研究表明其发病可能与T 淋巴免疫性细胞具有相关性。因此, 相关研究者对此病进行深入研究［4］。本文清热祛湿健脾方为中医传统经典方剂, 本文通过对患者治疗后的对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者免疫情况进行分析, 探究清热祛湿健脾方联合恩替卡韦分散片对患者肝功能、病毒复制及免疫性因子水平的变化进行测定。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院2016年1月～2017年10月筛选出HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者90例, 经临床诊断及病理显示均符合相关诊断标准。随机分为治疗组和对照组, 各45例。治疗组中男29例, 女16例；年龄25～59岁, 平均年龄(38.5±6.9) 岁；对照组中男26例, 女19例, 年龄23～56岁,平均年龄(36.1±7.0)岁。所有患者均符合该病诊断标准并经院伦理委员会审批通过。两组患者一般资料比较, 差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 对照组患者采用西医常规治疗方法积极对症治疗, 采用口服恩替卡韦分散片(正大天晴药业集团股份有限公司, 国药准字 H20100019, 规格：0.5 mg)0.5 mg/d。治疗组患者在对照组基础上联用中药方剂清热祛湿健脾方剂进行治疗。方子组成包括：党参、丹参各30 g, 黄芪、茵陈、板蓝根各20 g, 茯苓、白术、连翘、白芍各15 g, 蒲公英12 g, 陈皮、红花、甘草、赤芍各10 g, 苍术8 g, 1剂/d, 进行水煎煮到180 ml并分早、晚2次服用。所有患者治疗周期为24周。

在治疗前后空腹抽取患者的外周静脉血2 ml并立即加入肝素抗凝处理, 采用流式细胞仪对T 淋巴细胞亚群CD4+CD25+Treg表达频率检测。采用双抗夹心ELISA法检测其血清TGF-β、IL-10水平。测定免疫细胞水平观察并比较其变化, 记录其起效时间以及复发情况。采用Realtime PCR法检测血清HBV-DNA, 使用Roche-Cobas Ampliprep48系统, 由上海罗氏诊断有限公司提供试剂。采用Olympus AU 2700自动生化分析仪检测血清ALT、AST、γ-GT。筛选者在检时需要清晨空腹抽取外周静脉血进行检测。

1.3 观察指标 两组患者均经检测乙型肝炎标志物血清中IL-10、TGF-β、T细胞亚群相关指标水平及肝功指标血清ALT、AST、γ-GT相关指标。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差()表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后免疫细胞水平变化比较 两组治疗后免疫细胞CD4+CD25+T/CD4+T水平明显低于治疗前, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。治疗组患者治疗后免疫细胞CD4+CD25+T/CD4+T水平低于对照组, 差异具有统计学意义(t=2.748, P＜0.05)。见表 1。

2.2 两组患者治疗前后TGF-β、IL-10水平比较 两组治疗后IL-10、TGF-β水平均低于治疗前, 差异具有统计学意义(P＜0.05)；两组治疗后IL-10、TGF-β水平比较, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

2.3 两组患者治疗前后肝功指标变化比较 治疗前, 两组患者ALT、AST、γ-GT比较, 差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后, 观察组患者ALT、AST、γ-GT优于对照组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表 1 两组患者治疗前后免疫细胞水平变化比较( , %)

表 1 两组患者治疗前后免疫细胞水平变化比较( , %)

注：与对照组比较, aP＜0.05

组别 例数 治疗前CD4+CD25+T/CD4+T 治疗后CD4+CD25+T/CD4+T对照组 45 7.92±2.01 5.01±1.79治疗组 45 7.95±2.13 4.04±1.55a

表2 两组患者治疗前后TGF-β、IL-10水平比较( , pg/ml)

表2 两组患者治疗前后TGF-β、IL-10水平比较( , pg/ml)

注：与对照组比较, aP＜0.05

组别 例数 IL-10 TGF-β治疗前 治疗后 治疗前 治疗后对照组 45 87.5±10.1 57.3±10.3 158.9±57.3 103.2±55.6治疗组 45 86.5±9.7 78.2±12.1a 153.4±50.8 138.2±52.5a

表3 两组患者治疗前后肝功指标变化比较( , U/L)

表3 两组患者治疗前后肝功指标变化比较( , U/L)

注：与对照组比较, aP＜0.05

组别 例数 ALT AST γ-GT治疗前 治疗后 治疗前 治疗后 治疗前 治疗后对照组 45 114.6±15.1 97.3±16.3 89.2±16.6 83.2±15.6 77.4±14.2 67.2±13.6治疗组 45 113.2±13.5 51.2±14.1a 94.2±15.6 68.2±13.4a 78.0±10.0 38.2±10.4a

3 讨论

有报道称乙型肝炎病是一种细胞介导的免疫性病［5,6］。其病因主要为遗传因素、免疫功能、炎症感染、代谢紊乱及分泌障碍等, 其病因较复杂, 目前有关研究显示其与发病及免疫功能异常可能有关, 如T淋巴免疫性细胞因子及炎性递质均与发病过程相关, 外周血 T 淋巴细胞中含CD4 +、CD25 +,随乙型肝炎严重度差异, 细胞水平变化, 因此与 T 淋巴细胞作用部位作为研究的关键靶点部位为目前研究热点［7-10］。恩替卡韦分散片适应证为本品适用于病毒复制活跃, 血清ALT持续升高或肝脏组织学显示有活动性病变的慢性成人乙型肝炎的治疗, 但存在一系列并发症。根据中医理论, 其中医药在其领域显示出巨大的优势。因此, 本文经清热祛湿健脾方联合恩替卡韦分散片应用治疗, 对其效果进行研究。

本研究结果显示, 中药方剂在临床治疗乙型肝炎病血清细胞免疫水平升高, 对慢性乙型肝炎病毒患者血液中T细胞亚群血中的CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞比例在乙型肝炎携带患者中大幅下降；经检测细胞因子水平后与对照组相比,慢性乙型肝炎病毒患者IL-10水平降低, 进一步表明患者T细胞亚群、IL-10水平变化与乙型肝炎病存在联系, 可减轻对身体的损害, 明显改善患者主要临床症状。治疗后治疗组肝功指标得到明显改善, 对较对照组有效抑制病毒, 表明本中药方清热祛湿健脾方联合恩替卡韦分散片调节患者的T淋巴细胞亚群的异常水平途径提高机体免疫功能。在临床上为制定评价效果指标提供一定实验依据, 有效把握患者治疗时机, 降低患者死亡率, 在临床治疗中具有一定临床指导价值。

综上所述, 清热祛湿健脾方可明显提高HBeAg阳性慢性乙型肝炎免疫能力, 有效改善免疫细胞水平, 改善肝功能、抑制病毒, 在临床治疗中可应用。