不同分型幽门螺杆菌感染对消化性溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平的影响

巩会杰，张逸强，李东方

消化性溃疡是指发生于胃、十二指肠的慢性溃疡，为临床常见病、多发病，患者以中上腹疼痛及反胃、嗳气、唾液分泌增多等其他胃肠道反应为主要临床表现。其致病菌中，幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, HP）占80%以上，是主要致病菌[1]。HP感染可损害胃黏膜屏障，进而致使消化性溃疡产生。近年来，有关研究表明，不同分型HP感染与消化性溃疡类别及病情程度可能存在相关性[2]。另有研究发现， IL-10、IL-17等血清炎性因子在不同分型HP感染中水平差异显著，而TNF-α可能参与消化性溃疡的发生[3]。基于此，本研究以158例消化性溃疡患者为研究对象，旨在进一步探讨不同分型HP感染的消化性溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α的水平表达及临床意义。现将结果报告如下。

1　对象与方法

1.1 对象 选取2016年1月—2017年6月驻马店市中心医院消化内科收治的158例消化性溃疡患者为研究对象。纳入标准：①符合消化性溃疡临床诊断标准[4]；②经血常规、生化等检查排除其他炎症性疾病；③既往无HP根除治疗史；④就诊前2个月未经任何治疗。排除标准：①严重肝肾功能不全者；②恶性肿瘤患者；③免疫系统疾病者；④胃食管反流患者；⑤复合性溃疡患者；⑥妊娠、哺乳期妇女。158例患者中，男97例，女61例；年龄31～73岁，平均（47.28±7.62）岁。胃溃疡69例，溃疡灶72个，溃疡直径0.50～1.90 cm，平均（1.22±0.64）cm；十二指肠溃疡患者89例，溃疡灶91个，溃疡直径0.40～2.00 cm，平均（1.16±0.59）cm。经14C尿素呼气试验测定为HP阳性109例，HP阴性49例（HP阴性组）；后经HP分型检测实验测定HP阳性者中HP I型58例（HP I组），HP II型51例（HP II组）。3组间患者临床一般资料比较，差异无统计学意义（P均＞0.05），详见表1。本研究经患者知情同意，获医院医学伦理委员会批准。

表1 3组间患者一般资料比较Table 1 Comparison of general data among 3 groups

1.2 方法

1.2.1 HP感染检测及判定方法 患者均行14C尿素呼气试验：患者空腹3 h后，口服14C尿素胶囊1粒（1 uci37kBq，上海欣科医药有限公司），静坐30 min；受试者往YH04 HP检测仪呼气卡（安徽养和医疗器械设备有限公司）内呼气，时长2～5 min；当呼气卡上提示窗表明卡片颜色从蓝色变成白色时，完成采样。仪器自动检测并打印试验结果。结果采用放射性计数dpm/mmol表示，以试验结果≥100 dpm/mmol为HP阳性，＜100 dpm/mmol为 HP阴性[5]。

1.2.2 HP分型检测实验 HP可以分泌毒素损坏人体细胞，产细胞毒素的HP是I型，不能产生毒素的是II型。采用HP抗体分型检测试剂盒（深圳伯劳特生物制品有限公司），取患者静脉血1.5～2.0 ml，按说明书操作。免疫印迹技术结果若显示，尿素酶抗体，caga和/或vaca抗体均阳性则为HP I型；若仅显示尿素酶抗体阳性，caga和vaca抗体阴性，则为HP II型；若caga、vaca和尿素酶抗体均阴性，则为HP阴性。

1.2.3 血清IL-10、IL-17、TNF-α水平检测方法 抽取所有患者5 ml清晨空腹静脉血，分离血清后存留备测。通过ELISA测定血清IL-10、IL-17及TNF-α水平，试剂均源自广州赛哲生物科技股份有限公司，操作遵循试剂说明严格执行。

1.3 统计学处理 采取SPSS 22.0统计软件处理数据，计数资料用百分比（%）表示，行χ2检验；计量资料用±s表示，血清IL-10、IL-17、TNF-α水平在各组中的比较行成组t检验或单因素方差分析，两两比较行LSD-t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2　结　果

2.1 3组血清IL-10、IL-17及TNF-α水平 HP I型组、HP II型组血清IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP阴性组（P均＜0.05）；HP I型组血清IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP II型组，差异均有统计学意义（P均＜0.05）。详见表2。

表2 3组患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平比较（pg/ml）Table 2 Comparison of IL-10, IL-17 and TNF-α levels among 3 groups(pg /ml)

2.2 各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清IL-10表达 HP I型组中，十二指肠溃疡患者血清IL-10水平高于胃溃疡患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。HP II型组、HP阴性组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清IL-10水平比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。详见表3。

表3 各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清IL-10的表达水平（pg/ml）Table 3 Expression level of serum IL-10 in gastric ulcer patients and duodenal ulcer patients in each group(pg/ml)

2.3 各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清IL-17表达 HP I型组、HP II型组中，十二指肠溃疡患者血清IL-17水平高于胃溃疡患者，差异有统计学意义（P均＜0.05）。HP阴性组中十二指肠溃疡与胃溃疡患者血清IL-17水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。详见表4。

表4 各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清IL-17的表达水平比较（pg/ml）Table 4 Expression level of serum IL-17 in gastric ulcer patients and duodenal ulcer patients in each group(pg/ml)

2.4 各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清TNF-α表达 HP I型组中，十二指肠溃疡患者血清TNF-α水平高于胃溃疡患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。HP II型组、HP阴性组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清TNF-α水平比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。详见表5。

表5 各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清TNF-α的表达水平（pg/ml）Table 5 Expression level of serum TNF-α in gastric ulcer patients and duodenal ulcer patients in each group(pg/ml)

3　讨　论

HP感染作为消化性溃疡的主要致病因素，其定植、粘附及其毒力因子均可损害胃肠黏膜，使得生长抑素、胃泌素分泌增加，进而导致黏膜上皮炎性改变和坏死，最终诱发消化性溃疡[6]。当前，通过何种指标对HP感染分型进行诊断并对消化性溃疡进行有效防治成为临床诊治及研究的重点。

相关研究表明，抗炎因子及促炎因子释放失衡时可造成胃黏膜受损，其参与消化性溃疡的发生及进展[7]。IL-10是一种多功能细胞因子，可抑制免疫细胞活性，发挥抗炎作用，并可通过对T细胞的抑制维持机体免疫反应状态。患者外周血辅助性T细胞（T helper cell, TH）亚群TH1和TH2分泌因子负反馈通常情况下能够制约TH1和TH2细胞平衡，而HP感染将促使免疫应答在TH1中抑制、TH2中增强，故而导致患者血清IL-10表达增加[8-10]。IL-17是由活化T细胞产生的致炎因子，可诱导内皮细胞、上皮细胞分泌IL-6、IL-8等多种细胞因子，进而致使炎症发生。已有研究发现，IL-17、TNF-α在不同分型HP感染消化性溃疡患者中变化显著[11]。而TNF-α是重要促炎因子，能够诱导分泌IL-8等炎性因子，并可促使中性粒细胞移动，造成中性粒细胞粘附，白细胞于血管壁内穿出，进而导致胃黏膜内皮细胞受损，引起胃黏膜损伤[12-14]。相关研究显示，血清TNF-α水平在感染HP I型消化性溃疡患者中达（42.66±11.41）pg/ml，高于感染HP II型消化性溃疡患者的（28.67±8.27）pg/ml、HP阴性消化性溃疡患者的（11.24±4.31）pg/ml[15]。HP感染可通过增强TNF-α分泌，作用于胃窦细胞，进而促使胃酸分泌增加，诱发十二指肠炎症[16]。程晓娜等[17]研究发现，TNF-α、IL-10在HP I型、HP II型消化性溃疡患者中的表达高于HP阴性患者，其中TNF-α在感染HP I型的十二指肠溃疡患者中的表达高于胃溃疡患者。提示TNF-α表达与溃疡部位相关，TNF-α、IL-10联合检测利于消化性溃疡患者的HP分型诊断。另有研究表明，各型组溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α的表达差异显著，尤以HP I型组表达增高显著[18]。本研究数据显示，HP I型组、HP II型组IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP阴性组，HP I型组IL-10、IL-17及TNF-α水平又高于HP II型组，这表明HP I型菌株毒性更强，更容易造成胃黏膜损伤； HP I型组十二指肠溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平高于胃溃疡患者，差异均有统计学意义； HP II型组十二指肠溃疡患者血清IL-17水平高于胃溃疡患者，差异有统计学意义，而IL-10、TNF-α水平差异则无统计学意义。提示血清IL-10、IL-17及TNF-α水平相结合可反映HP感染分型及溃疡部位。

综上所述，不同分型HP感染消化性溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平存在较大差异，可对临床鉴别诊断提供参考，进而为临床预防和治疗提供依据。但本研究样本量较小，影响结果的普遍性，故还有待行进一步大样本实验的检验。