核干细胞因子在食管腺癌组织中的表达及其与临床特征的关系

管淑敏，孙丽丽

濮阳市人民医院病理科，河南 濮阳457000

食管腺癌具有较高的发病率，且近年来其发病率呈现逐年增高的趋势，严重威胁着患者的生命健康[1]，因此，如何有效地诊断与治疗食管腺癌具有重要意义。相关研究显示，核干细胞因子在细胞的增殖过程中起到了关键性作用，且呈现较高水平的表达[2-3]。本研究对食管腺癌患者体内核干细胞因子的表达情况进行分析，并对核干细胞因子表达与食管腺癌患者临床特征的关系进行探讨，旨在为食管腺癌的诊断与治疗提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2006年1月至2016年12月濮阳市人民医院收治的食管腺癌患者80例。纳入标准：①均经病理学检查确诊为食管腺癌；②生存期≥3年。排除标准：①不符合临床食管腺癌的诊断标准；②伴有严重的心肝肾功能不全者；③临床资料不全者。80例食管腺癌患者中，男46例，女34例；年龄39～77岁，平均（57.85±4.61）岁；≥60岁50例，＜60例30例；肿瘤直径：≥5.0 cm 45例，＜5.0 cm 35例；组织分化程度：低分化30例，中分化28例，高分化22例；TNM分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期25例，Ⅲ期28例，Ⅳ期12例；淋巴结转移情况：有转移30例，无转移50例；浸润深度：黏膜及黏膜下层20例，深肌层18例，纤维膜20例，浅肌层12例，周围软组织10例。

1.2 标本采集

选取食管腺癌患者的病灶组织及其对应的癌旁5.0 cm内的正常组织作为此次研究的标本，且所有选取的标本均经过40.0 g/L多聚甲醛溶液固定处理，随后常规脱水和石蜡包埋处理，切片厚度为4.0～6.0 μm，最后进行HE染色与免疫组织化学染色处理[4]。

1.3 检查方法

采用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法（strept avidin-biotin complex，SABC）对核干细胞因子进行测定，试剂盒为武汉博士德生物工程有限公司提供的即用型SABC免疫组化染色试剂盒，抗体为鼠抗羊IgGNS抗体。其中，以牛血清蛋白作为标准品，核干细胞因子的稀释比例为1∶100。严格按照SABC进行操作，且需要进行二氨基联苯胺（diaminobenzidine，DAB）显色处理，紧接着蒸馏水冲洗和苏木素复染处理，给予70%、85%、95%梯度浓度的乙醇进行脱水。最后，二甲苯透明和中性树胶进行封片处理[5-6]。

1.4 判断标准

组织切片中细胞核内染色为黄褐色则判断为阳性染色。其中，阳性细胞所占比例≥20.00%为阳性；阳性细胞所占比例＜20.00%为阴性。另外，应用磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline，PBS）替代一抗作为阴性对照。

1.5 统计学分析

采用SPSS 18.0软件对数据进行分析。计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同组织中核干细胞因子表达情况的比较

核干细胞因子在食管腺癌组织、癌旁正常组织中的阳性表达率分别为75.0%（60/80）、31.2%（25/80），差异有统计学意义（χ2=30.74，P＜0.01）。（图1）

图1 核干细胞因子在不同组织中的表达情况（HE染色，×200）

2.2 核干细胞因子表达与食管腺癌患者临床特征的关系

核干细胞因子的阳性表达与食管腺癌患者的组织分化程度、浸润深度以及淋巴结转移情况有关（P＜0.05）；核干细胞因子的阳性表达与食管腺癌患者的性别、年龄、肿瘤直径及TNM分期无关（P＞0.05）。（表1）

3 讨论

食管腺癌是消化内科常见的一种疾病，在临床具有较高的发病率和病死率，严重影响患者的生命健康[7]。相关研究显示，食管腺癌的发生、发展受到癌基因与抑癌基因的影响，癌基因与抑癌基因相互作用，可以引发肿瘤的发生[8-9]。核干细胞因子基因在多种肿瘤中高表达，尤其在胃癌、肝癌及结肠癌中表达水平更高，因此，核干细胞因子可以作为临床上诊断肿瘤的重要标志物。人类的核干细胞因子基因位于3p21.1，与小鼠具有81%的编码同源，核干细胞因子蛋白有538个氨基酸，由碱性区域、双螺旋区和一级GTP组成。相关研究显示，核干细胞因子可以通过与p53、c-MYC等相关的途径影响细胞周期的进展，进而直接或间接地影响肿瘤细胞的增殖与分化[10-11]。大量临床试验结果显示，干细胞与肿瘤细胞之间存在较多的相似性，其中协调控制的自我更新与保证分化是有效维持干细胞内环境稳定的重要因素，一旦平衡失调，便会导致肿瘤发生[12-14]。另外，研究还显示，核干细胞因子在急性白血病患者中呈现出较高水平的表达[15]。同时，相关临床研究显示，核干细胞因子在卵巢癌患者体内也呈现高表达，并且临床常将其作为诊断卵巢癌的重要标志物之一[16]。既往的临床研究显示，核干细胞因子可能参与食管癌的发生、发展[17]。因此，为了全面地了解食管腺癌的发生与发展情况，本研究进一步分析了核干细胞因子在食管腺癌中的表达及其与患者临床特征的关系。

表1 核干细胞因子表达与食管腺癌患者临床特征的关系

本研究结果显示，食管腺癌组织中核干细胞因子的阳性表达率为75.0%，明显高于癌旁正常组织的31.2%（P＜0.01），核干细胞因子在食管腺癌组织中呈现高表达，表明核干细胞因子可能参与了食管腺癌的发生过程。本研究还发现，核干细胞因子的阳性表达与食管腺癌患者的组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移情况有关，但与食管腺癌患者的性别、年龄、TNM分期及肿瘤直径无关。核干细胞因子的表达与食管腺癌的发生、发展有着紧密联系，可以将其作为诊断食管腺癌病情严重程度的标志物。同时，可以将核干细胞因子作为靶向治疗的重要目标基因，为临床中治疗食管腺癌提供新的方向[18]。

综上所述，核干细胞因子在食管腺癌组织中呈现高表达，且其阳性表达与食管腺癌患者的组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移情况有关，临床中可以将其作为诊断食管腺癌的一种重要标志物。

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