检测肺炎支原体的3种方法学比较

梅方超 尚小玲 戴海英 汪宏良

435000 湖北黄石，肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室（尚小玲，汪宏良）

肺炎支原体（mycoplasma pneumonia，MP）是儿童及青少年社区获得性肺炎的重要致病菌之一［1］，由于MP感染的临床症状并不典型，无法与其他肺炎相区别，因此，MP的诊断主要依靠实验室检测［2］。目前实验室检测MP的方法主要包括间接免疫荧光法（indirect immunofluorescent assay，IFA）、胶体金法和培养法，本研究将3种检测方法的结果进行比较，以寻求检测MP的最佳方法。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年10月—2017年10月在湖北省黄石市中心医院确诊为支原体肺炎的126例患者作为MP感染组，另选择同期在本院进行体检的126例健康体检者作为对照组。MP感染诊断标准：① 临床特征：发热，持续剧烈咳嗽，X线所示较体征显著；② 白细胞多数正常或稍高；③ 青霉素或头孢类抗菌药物治疗无效；④ MP免疫球蛋白M（MP-IgM）阳性。

1.2 方法 采集所有受试者全血3 mL各2管和咽拭子分泌物1份，以800×g离心10 min取血清，在1 h内分别用IFA法和胶体金法检测MP-IgM，用培养法进行MP接种。取剩余血清于-80 ℃冰箱冻存以便复查。

1.3 仪器与试剂

1.3.1 IFA法 采用西班牙VIRCELL公司提供的9项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒，检测血清中的MP-IgM抗体。

1.3.2 胶体金法 采用珠海丽珠试剂股份有限公司提供的MP-IgM检测试剂盒，检测血清中的MP-IgM抗体。

1.3.3 培养法 采用安图生物科技有限公司提供的MP培养药敏试剂盒，检测咽拭子分泌物中的MP。

1.4 统计学方法 采用SPSS 25.0软件包对数据进行统计学分析，组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3种方法检测MP的敏感度比较 MP感染组中，IFA法检出阳性标本119例，胶体金法检出阳性标本104例，培养法检出阳性标本53例。IFA法检测MP的敏感度明显高于胶体金法和培养法，3种检测方法之间比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表 1。

表1 3种不同方法检测MP的敏感度比较

2.2 3种方法检测MP的特异度比较 对照组中，IFA法检出阳性标本8例，胶体金法检出阳性标本20例，培养法检出阳性标本0例。IFA法检测MP的特异度明显高于胶体金法（P＜0.05），但略低于培养法（P＞0.05）。见表 2。

表2 3种不同方法检测MP的特异度比较

3 结论

MP是人类支原体肺炎的病原体。支原体肺炎的病理改变以间质性炎症为主，有时并发支气管肺炎，称为原发性非典型性肺炎［3-4］。支原体肺炎主要经飞沫传播，潜伏期2～3周，发病率以青少年最高，一年四季均可发病，但多发于秋冬季节［5-6］；临床症状较轻，主要表现为头痛、咽痛、发热、咳嗽等一般的呼吸道症状，部分患者无明显症状，但也有个别患者死亡的报道，可通过中西医结合的方式进行治疗［7］。

由于MP感染的临床症状并不典型，无法与其他肺炎相区别，因此支原体肺炎的诊断主要依靠实验室检测，常用的方法包括IFA法、培养法和胶体金法［8］。MP培养法虽然特异度高，但支原体生长缓慢，培养时间较长，通常需要数天至数周，同时对操作者技术要求较高，敏感度较低，培养阳性率低。胶体金法虽然可以用于检测MP分型抗体，但其受干扰的环节较多［9］。IFA法具备敏感度和特异度高、检测范围广、试剂与方法稳定、自动化快速检测以及可检测MP分型抗体等优点。除检测IgM抗体外，还可以将IgG、IgA和IgE作为参照指标进行检测［10-11］。

本研究结果表明，IFA法检测MP的敏感度明显高于胶体金法和培养法，3种检测方法之间比较差异均有统计学意义；IFA法检测MP的特异度明显高于胶体金法，但略低于培养法。虽然培养法检测MP的特异度最高，但敏感度较低。由此可见，IFA法检测MP的敏感度和特异度均较高，是3种检测方法中筛查MP的最佳方法。

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8 赵郁洁，张明智.被动凝集法检测肺炎支原体抗体临床应用研究［J］.世界最新医学信息文摘，2016，16（11）：4-5.

9 郑玉平，张杰，周逸琴.被动凝集法检测肺炎支原体抗体的结果分析［J］.临床和实验医学杂志，2012，11（21）：1720-1721.

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11 冯广满，蒋旺珍，吴见欢，等.肺炎患儿检测肺炎支原体抗体和血清总 IgE 的临床价值［J］.实用检验医师杂志，2014，6（2）：84-86.