肺炎支原体培养法与肺炎支原体抗体检测的比较

常玉芝

肺炎支原体（mycoplasma pneumonia，MP）是常见的社区获得性肺炎的致病原，占肺炎发病率的15%～20%，占非细菌性肺炎的50%［1］。MP是呼吸道感染的常见病原体，可引起肺炎、支气管炎、咽炎等。MP感染秋冬季较多见，通过呼吸道传播，可引发地方性或流行性扩散，通常每隔4～5年会有一次爆发性感染［2］。除呼吸道症状外，MP感染还可引起肺外多系统（如消化系统、皮肤、循环系统、肌肉骨骼、泌尿系统、中枢神经系统、血液系统等）损害［3］，近年来有研究发现，MP感染与冠心病尤其是急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）密切相关［4］。研究表明：肺炎支原体肺炎（MPP）是由MP直接侵犯呼吸道组织和MP激发机体过强的免疫反应两大主要机制引起，MP感染导致机体细胞免疫和体液免疫功能紊乱，引起肺部和全身过强的免疫反应［5］；同时，MP与人体部分组织存在共同抗原，感染后引起自身免疫反应，导致组织损伤，故MP感染可引起多系统损害［6］。

临床有很多常用的MPP实验室诊断方法，其中微生物快速培养（microbial rapid detection，MRD）与MP-IgM抗体检测是近年临床诊断MP感染的常用方法。为比较上述两种方法对诊断MPP的临床效果，本研究对148例MPP患儿采用两种方法检测后的结果进行比较分析，现总结如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2017年3月—12月本院收治的148例MP感染患儿作为研究对象，其中男性85例，女性63例；年龄8个月～13岁，平均（4.7±1.5）岁；病程 5 d～2个月，平均（25.5±11.8） d；临床表现主要为呼吸系统疾病，以咳嗽、咳痰、气喘和发热症状为主。所有患儿均经临床确诊为小儿MP感染，符合《儿科常见病诊断与治疗》中关于MPP的诊断标准［7］。

1.2 方法 根据检测方法的不同将患儿分为两组，其中74例采用MRD法，74例采用MP-IgM抗体检测法，对比两种方法检测病原体的阳性率情况。

1.2.1 MRD法 采用郑州安图生物工程股份有限公司生产的MP培养药敏试剂盒，严格按照标准操作规程（standard operational procedure，SOP）进行操作。将无菌咽拭子在患儿口腔咽喉部捻转数次，采集口腔分泌物标本，打开培养基瓶盖，将咽拭子置于瓶内，充分搅拌数次后，将棉拭子对准瓶壁挤压，尽可能挤出液体后盖好瓶塞，置于恒温箱中培养24 h。培养基颜色由红色变为黄色表示呈阳性，培养基颜色未出现明显变化则表示呈阴性。

1.2.2 MP-IgM抗体检测法 仪器由北京贝尔生物工程有限公司生产，采用金标法对全血进行检测，质控线和测试线2条红线均出现表示检验结果为阳性，仅1条质控线出现红线则表示检验结果为阴性。

1.3 统计学分析 采用SPSS 19.0软件对数据进行统计学分析，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

MRD法诊断MPP的阳性率较MP-IgM法明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两种方法诊断MPP的阳性率比较

3 讨论

MP是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物，主要经呼吸道感染，具有传染性和流行周期。MP感染是一种比较常见的小儿疾病，潜伏期一般为2～3周，一年四季均可发生，但多发于秋冬季节。发病率以儿童和青少年最高，成年人很少感染，但是在老年人群中MP的危害已经越来越大。MP感染常见的症状以支气管炎、肺炎为主，另外也与哮喘加重有关［8］，发病初期主要以头痛、恶心、乏力、呕吐、发烧为主。MP感染可引起以肺间质病变为主的急性肺部感染，有时可并发原发性非典型性肺炎。其临床表现多样，且病情轻重程度不同，具有病程长、易反复等特点，容易发生肺外并发症［9］，关键在于早就医、早诊断、早治疗。由于小儿MP感染的临床表现缺乏特异性，给患儿的诊断带来了一定影响，故实验室检查是目前诊断MPP的必要手段。MP感染过程中产生的抗体亚型主要为IgM、IgA和IgG，特异性的抗体亚型和疾病进程之间有良好的对应关系［10］。IgM出现最早，在病程起始1周～1个月内迅速升高，随后逐渐下降直至消失，被认为是急性期感染的标志。IgG通常在病程起始1个月后产生，继而持续上升［11］；在既往感染者中该抗体亚型的阳性率高达80%，很多患者的IgG抗体终身阳性。IgA的出现晚于IgM，显著升高的时间也晚于IgM，但持续时间长于IgM［12］。

近年来，随着我国分子生物学技术的不断进步，临床对小儿MP感染的诊断率不断提高，目前实验室诊断MP的主要方法有培养法、MRD法、免疫学检测法、聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测法等，其中MP培养被认为是目前检测MPP的金标准，但传统的支原体培养方式要求较高，热敏感性差，耗费时间长，极大地限制了其在临床上的推广应用，因而并不作为常用的检查项目。研究显示，MP核酸片段检测项目对MP检测的特异性高达90%以上［13］，但其对实验室条件及操作人员要求较高，基层医院较难达到要求。MRD法和MP的抗体检测具有较高的敏感性和特异性，且检测方法相对简单。MP的抗体检测在儿童MP感染后相当长的时间内均可有效检出，一般MP感染患者约在20 d后出现IgG抗体，而IgM抗体可在感染后1周左右出现，3～4周达高峰，因此IgM抗体的检测对MP的早期诊断有重要意义。

与MP-IgM抗体检测法比较，MRD法诊断MPP的阳性率较高（91.89%），差异有统计学意义，并且可同时得到药敏结果，不失为检测MP感染的很好手段。但MRD法用时较长，通常需要48 h以上，而MP-IgM抗体检测法方便快速，患儿仅需采集指血20 μL即可。因而两种检测方法各自具有优缺点，临床可考虑联合应用。

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11 张蓓，余晓刚，沈立崧.小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用［J］.上海医学检验杂志，2001，16（1）：35-36.

12 张健，徐瑞亮，刘栋，等.两种肺炎支原体抗体检测方法的临床应用研究［J］.实用检验医师杂志，2013，5（3）：151-155，178.

13 王爱民.肺炎支原体核酸分子杂交检测技术的应用评价［J］.中国误诊学杂志，2008，8（6）：1315-1316.