寻常型银屑病患者外周血Th9及IL-9的水平变化及意义

高淑平

（阳春市人民医院，广东阳春 529600）

寻常型银屑病（Psoriasis vulgaris，PV）是银屑病最常见的一种类型，属临床常见易复发的慢性炎症性皮肤病之一，目前发病机制尚不完全清楚[1]。近年多数研究者认为PV由T淋巴细胞功能紊乱和辅助性T细胞（Th）细胞过度活化所致的自身免疫性疾病，如Th1/Th2比例失调是导致银屑病的重要原因之一[2]。Th9细胞是近期发现的一类新型效应性CD4+亚群效应性T细胞，参与了人体多种免疫性疾病的发生过程[3]。白细胞介素（IL）-9主要是由T淋巴细胞分泌，能促进体内的T细胞和肥大细胞增殖，是机体自身免疫调节的重要因子[4]。研究发现，银屑病患者Th9细胞百分比和IL-9含量较正常人群显著升高，且二者与银屑病皮损面积和严重程度指数（PASI）评分呈显著正相关[5]。为了进一步探讨Th9及IL-9在银屑病中的作用，本研究测定了PV患者外周血Th9及IL-9水平，并分析不同病情程度和分期下外周血Th9及IL-9水平的变化，进一步验证二者在银屑病发病机制中的作用，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2016年5月—2017年11月间在本院就诊的PV患者104例（PV组）作为研究对象。PV诊断根据《中国临床皮肤病学》[6]标准：①红色丘疹分布在头皮、躯干、四肢伸侧皮肤上；②皮疹形状不规则，边界清楚；③皮疹基底浸润明显，刮除红膜可见小出血点；④以红色炎性斑片为主，上覆多层银白色鳞屑，下有一层光亮薄膜；⑤合并瘙痒。寻常型银屑病病情分级诊断参照PASI评分[7]，重：PASI评分＞12 分；中：PASI评分 6～12 分；轻：PASI评分＜6分。纳入标准：①符合寻常型银屑病诊断者；②年龄18～65岁，性别不限；③近3个月内未给予糖皮质激素类药物等相关治疗者；④首次发病者；⑤取得患者知情，且签署知情协议。排除标准：①伴其他类型皮肤病者；②妊娠或哺乳期妇女；③精神病或恶性肿瘤患者；④伴心、脑、肝、肾及造血系统等严重障碍者；⑤关节型、脓疱型、红皮病型银屑病者。其中男61例，女43例；年龄23～58岁，平均（40.66±7.40）岁；病程 9个月～3年，平均（2.03±0.31）年；病情分级[7]：重度：44 例；中度：39 例；轻度：21 例；PASI评分[7]：（26.77±4.01）分；病情分期[8]：活动期61例，稳定期43例。选取同期在本院体检健康志愿者50例为对照组，其中男31例，女19例；年龄 30～51岁，平均（41.05±7.22）岁；PV 组与对照组基本临床资料（性别、年龄），同时PV组内轻、中、重以及稳定期、活动期患者的性别、年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经本院医学伦理委员会知情同意。

1.2 2组外周血Th9及IL-9水平 外周血采集：晨起空腹抽取2组受试者的外周静脉血约3 mL，置于肝素抗凝管中，加入红细胞裂解液，4 000转/min室温离心 5 min，磷酸盐缓冲液（PBS）洗，弃上清，于-80℃保持待测。Th9应用流式细胞仪测定，IL-9采取双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定。

1.3 统计学处理 采取SPSS19.0统计软件分析本组数据，计量数据以±s表示，2组间比较采用的是t检验，多组间比较采用单因素方差分析；相关性分析采取Pearson直线相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组外周血Th9及IL-9水平比较 与对照组比较，PV组患者外周血Th9及IL-9水平明显升高，比较差异有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

表1 2组外周血Th9及IL-9的水平比较 （±s）

表1 2组外周血Th9及IL-9的水平比较 （±s）

组别 n Th9（%） IL-9（pg/mL）对照组 50 0.25±0.03 16.82±1.97 PV 组 104 0.92±1.03 52.75±5.81 t 6.700 56.672 P＜0.01 ＜0.01

2.2 不同分级PV患者外周血Th9及IL-9水平比较 中度分级PV患者外周血Th9及IL-9水平明显高于轻度分级患者（P＜0.01）；重度分级PV患者外周血Th9及IL-9水平明显高于轻度和中度分级患者，比较差异有统计学意义（P＜0.01）。见表2。

表2 不同分级PV患者外周血Th9及IL-9水平比较（±s）

表2 不同分级PV患者外周血Th9及IL-9水平比较（±s）

注：与轻度分级比较，aP＜0.01；与中度分级比较，bP＜0.01。

PV 分级 n Th9（%） IL-9（pg/mL）轻度 21 0.41±0.04 22.15±2.72中度 39 0.70±0.07a 46.98±5.33a重度 44 1.65±0.19ab 89.12±9.41ab

2.3 不同分期PV患者外周血Th9及IL-9水平比较 活动期PV患者外周血Th9及IL-9水平明显高于稳定期患者，比较差异有统计学意义（P＜0.01）。见表3。

表3 不同分期PV患者外周血Th9及IL-9水平比较（±s）

表3 不同分期PV患者外周血Th9及IL-9水平比较（±s）

PV 分期 n Th9（%） IL-9（pg/mL）稳定期 43 0.45±0.05 32.77±3.64活动期 61 1.39±0.16 72.73±7.78 t 45.854 35.022 P＜0.01 ＜0.01

2.4 PV患者外周血Th9及IL-9水平与PASI评分的相关性分析 Pearson相关分析显示，PV患者外周血Th9及IL-9水平与PASI评分均呈显著正相关。见表4。

表4 PV患者外周血Th9及IL-9水平与PASI评分的相关性分析

3 讨论

PV可发生于任何年龄，男女发病差异无统计学意义，据报道其发病率约为2%，目前其发病机制尚不明确，临床缺乏根治疗法，多数药物仅能对症治疗，但停药后病情易反复，对患者的身心健康和生活质量造成了严重影响[9]。PV是公认的一种免疫细胞介导的慢性炎症性皮肤病，多种免疫细胞参与PV的发生、发展，包括T淋巴细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞等，其中CD4+T淋巴细胞在PV发生和发展阶段的作用备受广泛认可[10]。初始CD4+T淋巴细胞接受抗原刺激的信号，在不同的条件下可分化成各种T淋巴细胞亚群，如Th1型、Th2型、Th17型、Th22型、Th9型以及Treg型，这些亚型细胞具有独特免疫作用，对人体的免疫状态发挥了共同调节作用[11]。研究发现，银屑病的发生及皮损的持续存在与T淋巴细胞的过度活化及释放的细胞因子异常联系密切[12]。

Th9细胞作为CD4+T淋巴细胞亚型，其通过分泌不同细胞因子参与PV的发生发展近年备受关注。Th9细胞在转化生长因子β、IL-4的作用下分泌IL-9、IL-10和IL-21，其中IL-9是其功能性细胞因子[13]。Schlapbach等[14]发现PV患者皮损中Th9细胞显著升高，提示了Th9细胞可能参与该病的发生、发展过程。IL-9通过直接或间接作用于多种细胞的功能，诱导Th17细胞分化，介导机体的多种炎症性疾病[9]。Singh等[15]发现IL-9及IL-9受体在银屑病样表现的K5.hTGF-b1转基因动物皮损中表达显著升高，注射抗IL-9抗体可使动物皮损中浸润的炎性细胞显著降低。胡小平等[16]采用RT-PCR检测PV患者和健康者各424例的IL-9的基因拷贝数变异发现，PV患者的IL-9基因拷贝数较健康人基因拷贝数显明显增高，而IL-9基因拷贝数增加可能会增加对PV的易感性。因此，IL-9可能通过Th17细胞等因子介导在PV的形成、发展中发挥作用。

本研究结果显示：与对照组比较，PV组患者外周血Th9及IL-9水平明显升高。骆伟雄等[5]选取PV患者50例为研究对象，通过与50例健康者比较发现PV患者Th9细胞百分比和IL-9含量均显著升高。本研究结果与上述报道基本一致。此外，本研究也证实，中度分级PV患者外周血Th9及IL-9水平明显高于轻度分级患者，重度分级PV患者外周血Th9及IL-9水平明显高于轻度和中度分级患者，活期PV患者外周血Th9及IL-9水平明显高于稳定期患者。提示了PV患者外周血Th9及IL-9水平变化可能是评价其病情程度的有效指标。

PSAI评分是目前临床评定PV皮损程度的有效指标之一，通过对患者的皮损面积、红斑、鳞屑、瘙痒以及浸润程度等参数进行客观评价，再经特定计算方式得出评分标准用于评价PV病情程度，分数越高提示病变范围越大和皮损越严重[17]。本研究通过Pearson相关分析显示，PV患者外周血Th9及IL-9水平与PASI评分均呈显著正相关。上述结果与其他学者的研究结果基本相似，提示了PV患者外周血Th9及IL-9水平的过度增加可能与该病病情严重程度密切相关[5]。

综上所述，PV患者外周血Th9及IL-9水平明显升高，其水平与病情严重程度相关。探讨PV患者T辅助细胞亚群功能失衡与炎症学说参与其发病机制的观点，有利于进一步阐明PV的发病机制和为该病的临床治疗提供新靶点。

[1] 李小英.308 nm单频准分子光治疗斑块状银屑病疗效观察[J].广西医学,2017,39（3）：408-409.

[2] 宋红霞,薛晓东.消银汤联合窄谱中波紫外线治疗寻常型银屑病血热证疗效及其对外周血IL-17,IL-23,IL-6水平的影响[J].中国实验方剂学杂志,2016,22（5）：193-196.

[3] 刘欢,宋守君,薛海波.Th9细胞与自身免疫性疾病关系的研究进展[J].现代免疫学,2016,36（3）：253-256.

[4] 杨培培,冯纬纭,叶辉信,等.变应性鼻炎患者特异性免疫球蛋白E、IL-17、IL-2、IL-9和白三烯的表达及其与疾病活动度的相关性[J].广西医学,2015,37（8）：1 072-1 075.

[5] 骆伟雄,王才强.Th22、Th9细胞参与银屑病的免疫病理机制的研究[J].中国临床医生,2013,41（8）：65-66.

[6] 赵辨.中国临床皮肤病学[M].南京：江苏科学技术出版社,2009：1008-1009.

[7] Marks R,Barton SP,Shuttleworth D,et al.Assessment of disease progress in psoriasis[J].Arch Dermatol,1989,125：235-240.

[8] 张学军.皮肤性病学.7版.北京：人民卫生出版社,2008：129-130.

[9] 王英,王丽丽,韩朔,等.CD4+T淋巴细胞亚群与银屑病关系的研究进展[J].细胞与分子免疫学杂志,2016,32（6）：834-836.

[10]Chhabra S,Narang T,Joshi N,et al.Circulating T-helper 17 cells and associated cytokines in psoriasis[J].Clin Exp Dermatol,2016,41：806-810.

[11]Hirahara K,Nakayama T.CD4+T-cell subsets in inflammatory diseases：beyond the Th1/Th2 paradigm[J].Int Immunol,2016,28：163-171.

[12]曾亚军,李玲玲,段行武,等.CD4+T与银屑病相关的T辅助细胞研究进展 [J].中国中西医结合皮肤性病学杂志,2017,16（1）：84-87.

[13]Wong MT,Ye JJ,Alonso MN,et al.Regulation of human Th9 differentiation by type I interferons and IL-21[J].Immunol Cell Biol,2010,88：624-631.

[14]Schlapbach C,Gehad A,Yang C,et al.Human TH9 cells are skintropic and have autocrine and paracrine proinflammatory capacity[J].Sci Transl Med,2014,6：219ra8.

[15]Singh TP,Schön MP,Wallbrecht K,et al.Involvement of IL-9 in Th17-associated inflammation and angiogenesis of psoriasis[J].PLoS One,2013,8：e51 752.

[16]胡小平,张杰,邵勇,等.IL-9和IL-10基因拷贝数变异与特应性皮炎发病相关性[J].中国皮肤性病学杂志,2014,30（1）：14-16.

[17]万国忠.在寻常型银屑病中HBD-2、MMP-9及TNF-α的表达与PASI评分的正相关关系[J].基因组学与应用生物学,2017,36（12）：5 000-5 006.