寻常型银屑病患者外周血血清IL-33、IL-38的表达及意义

宋延枫 ，王秀敏 ，廉信 ，宋琼

（1.桓台县人民医院，山东 桓台 256400；2.滨州医学院附属医院，山东 滨州 256603）

银屑病是一种常见的慢性、复发性、难治性、炎症性皮肤病，鳞屑性红斑为其典型皮损。尚缺乏有效的治疗手段，严重影响患者身心健康。其发病机制复杂，包含遗传因素、环境因素、感染（包括细菌、病毒等）、代谢及内分泌因素、精神因素、免疫因素等，目前该病更倾向于有遗传基础的自身免疫性疾病。研究显示银屑病是由角质形成细胞和浸润免疫细胞之间相互作用产生的。现在被认为是一种TH1和TH17细胞混合介导的自身免疫性疾病，干扰素（IFN）-γ+、白细胞介素（IL）-17+细胞也参与了银屑病的发病。IL-33、IL-38同为IL-1家族成员，研究显示IL-33参与Th1/Th17介导的关节炎疾病的发病。在体外，IL-38可抑制TH1型细胞因子、IL-17及IL-22等的合成。本实验拟检测IL-33、IL-38在寻常型银屑病患者体内的表达，探讨二者在银屑病发病中可能的作用机制。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017年1月～5月桓台县人民医院皮肤科门诊经临床或病理确诊的寻常型银屑病患者63例；男32例，女31例，平均（39.5±21.7）岁；病程1周～26年；所选病例按照《皮肤性病学》进行分期：进行期22例，静止期20例，退行期21例。所有受检患者近2个月未使用糖皮质激素、维A酸类药物及免疫抑制剂，不伴其他系统性疾病，不合并其他自身免疫性疾病。健康对照组32例，均来自志愿者或健康体检者。其中男16例，女16例；平均年龄（40.1±20.9）岁。本试验经医院伦理委员会批准，受检者了解详情并签署知情同意书。

1.2 主要试剂与仪器 人IL-33、IL-38 ELISA试剂盒购自美国Abcam公司，Dynatech MR 5 000型酶标仪购自郑州安图生物工程有限公司。

1.3 方法 ①标本采集：无菌操作下抽取所有受检者外周静脉血各3 mL装入试管，室温下充分凝血，以4 000转/min离心5 min，分离血清，存储于-80℃冰箱。②血清IL-33、IL-38检测：采用竞争性免疫抑制ELISA法，检测外周静脉血血清中IL-33、IL-38水平，严格按照试剂盒说明书进行操作，最后将加样板置于波长450 nm的酶标仪读取各孔吸光光度值（A450nm），并建立标准曲线，进一步计算样品浓度。

1.4 数据统计处理 采用SPSS16.0统计学软件分析，各项数据以均数±标准差（±s）表示，寻常型银屑病各组间及与健康对照组比较采用独立样本t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清IL-33表达水平 寻常型银屑病进行期血清IL-33表达水平显著高于静止期、退行期、健康对照组，差异均有统计学意义，均P＜0.05；静止期、退行期与健康对照组比较，差异无统计学意义，P＞0.05，见表 1。

寻常型银屑病患者组组间比较：进行期外周血IL-33表达显著高于静止期、退行期差异有统计学意义，P＜0.05，静止期与退行期间差异无统计学意义，P＞0.05。

2.2 各组血清IL-38表达水平 寻常型银屑病患者血清中IL-38表达水平均显著低于健康对照组。进行期、静止期、退行期外周血血清IL-38表达水平相比对照组均显著降低，差异有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

寻常型银屑病患者组组间比较：进行期外周血IL-33表达显著低于静止期、退行期，差异有统计学意义（均P＜0.05）；静止期与退行期间差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 寻常型银屑病患者与健康对照组外周血IL-33、IL-38 表达水平 （pg/mL，±s）

表1 寻常型银屑病患者与健康对照组外周血IL-33、IL-38 表达水平 （pg/mL，±s）

注：寻常型银屑病组各期与健康对照组相比，aP＜0.05;bP＞0.05。

组别 n IL-33（pg/mL） IL-38（pg/mL）寻常型银屑病组 63进行期 22 69.08±11.54a 40.70±9.17a静止期 20 58.18±16.38b 84.54±17.59a退行期 21 54.65±14.81b 78.88±14.32a健康对照组 32 60.85±14.11 139.81±23.35

3 讨论

IL-1家族新成员IL-33是一种具有细胞因子和核转录因子双重功能的蛋白。IL-33参与了许多急、慢性炎症过程以及很多自身免疫性疾病的发病[1]。IL-33受体为ST2，ST2跨膜形式主要存在于TH2细胞、肥大细胞（MCs）和角质形成细胞（KCs）。IL-17与肿瘤坏死因子（TNF）-α联合作用于人角质形成细胞与银屑病发病相关[2]。IL-33可诱导角质形成细胞合成某些趋化因子，如CXCL1和CXCL8[3]。病原体相关分子模式（Pathogen-associated molecular patterns，PAMP）的分子和细胞因子如 TNF-α，IL-1β和IFN-γ可刺激IL-33的合成[4]。IFN-γ能诱导培养的角质形成细胞合成IL-33，IFN-γ与TNF-α联合可催化IL-33成熟[3]。此外，IL-33招募中性粒细胞迁移和浸润，并能使IL-17和TNF-α合成增加[5]。IL-17可抑制人脐静脉内皮细胞合成IL-33，而不能抑制IL-6和IL-8等炎性细胞因子的合成[6]。IL-17在自身免疫性疾病的炎症组织中表达强烈上调，并且其可以通过与TNF-α等其他细胞因子协同作用来放大炎症[7]。之前的研究显示，IL-17与TNF-α联合作用可促进NHEKs细胞中IL-33成熟。银屑病是一种与Th1/TH17介导的免疫疾病，银屑病患者体内IL-17A，IFN-γ和TNF-α表达升高，且血清IL-17A水平与银屑病PASI评分呈正相关，IL-17A以剂量-浓度依赖方式诱导IL-33mRNA及其蛋白表达。因此，笔者可以推测IL-17A等银屑病相关细胞因子通过调节IL-33的表达进而参与银屑病的发病。Meephansan 等[8]证实，IL-33 及其受体 ST2L，主要表达于银屑病皮损的表皮，并与局部炎性细胞浸润有关。Balato等[9]研究指出，IL-33通过活化肥大细胞和角质形成细胞在银屑病中发挥促炎作用，且IL-33主要在银屑病皮损中表达升高，血清的表达水平与正常对照组差异无统计学意义。研究证实不同类型的银屑病患者的血清中IL-33含量均较健康对照组升高，并与血清中TNF-α水平呈正相关，用抗TNF-α治疗后IL-33的水平也下降[10]。笔者的研究发现，进行期寻常型银屑病患者血清中IL-33表达较静止期、退行期及健康对照组有所升高，差异有统计学意义，而静止期、退行期与健康对照组组间比较，差异无统计学意义，这提示血清IL-33水平与寻常型银屑病疾病活动性有关，可能参与了银屑病发病。

IL-38为IL-1家族另一成员，其与IL-36Ra分享43%的同源性，与IL-1Ra具有41%的同源性。研究证实IL-38主要与IL-36R相结合，同IL-36Ra的生物学作用类似[11]。Marrakchi等[12]研究指出携带Leu27Pro突变的泛发性脓疱型银屑病患者皮损中角质形成细胞在受到促炎症细胞因子IL-1β及IL-36刺激后，IL-8合成显著增加，这可能是由于IL-36RN突变造成IL-36Ra拮抗作用降低。在IL-36刺激下，角质形成细胞会产生一种可阻止IL-8合成的抗IL-36R抗体。IL-36Ra的突变可引发脓疱型银屑病，其可能通过促进TH17应答诱导银屑病皮损的产生。此外有研究证实TH17细胞数目增加及血清IL-17水平升高与关节型银屑病的发病密切相关。Guo等[13]发现，关节型银屑病会在IL-38基因多态性的基础上影响Th17细胞因子。Th17细胞可分泌 IL-6、IL-17、IL-21、IL-22 及 TNF-α。在体外，IL-38可抑制TH1型细胞因子、IL-17及IL-22等的合成[11]。这表明IL-38可能在一些炎症疾病的病理机制中发挥重要作用。研究发现，IL-38主要是通过阻断IL-1R抑制Th17细胞，进而调控IL-17和IL-22的产生，来影响相关疾病的发生[14]。然而，IL-38的抑制作用与IL-1受体拮抗剂等传统抑制剂不同，当其浓度降低时，其抑制作用反而更强[15]。IL-38与寻常型银屑病的研究目前鲜有报道，本试验研究发现寻常型银屑病患者血清IL-38水平较健康对照组低，且进行期低于静止期和退行期，鉴于IL-38对某些与银屑病发病密切相关的促炎性细胞因子具有抑制作用，推测IL-38可能在银屑病的发病中发挥保护性的作用。

本试验研究结果与既往理论研究有部分矛盾，IL-33、IL-38在寻常型银屑病的发病承担怎样角色及具体的免疫机制还需大量的研究进一步证实。

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