HBV感染者DNA载量分层与血小板相关参数关系

邵璇璇，贾建安，吴黎黎， 黄其峰， 管世鹤

乙型肝炎患者受到感染病毒后，部分患者可转为慢性肝炎，如未经合理有效的治疗则会进一步可发展为肝硬化，再转为肝癌最后导致死亡，因此是我国当前流行和危害程度较为严重的疾病之一。近年的研究[1-2]显示，乙型肝炎患者常伴随着血小板(blood platelet，PLT)数量下降的现象，其主要原因可能是乙型肝炎病毒通过对骨髓巨核细胞的抑制造成其成熟不良而引起的。因此，对PLT、血小板比容(thrombocytocrit,PCT)、平均血小板体积(mean platelet volume,MPV)、血小板分布宽度(platelet distribution width,PDW)以及大血小板比率(platelet larger cell ratio,P-LCR)等PLT相关参数的检测和分析成为了慢性乙型肝炎患者治疗决策和预后判断重要参考。尽管目前关于乙型肝炎与PLT参数的相关研究较多[3-4]，但对于不同乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus DNA，HBV DNA)载量以及不同性别和年龄与PLT参数变化关系的报道相对较少。该研究通过对169例无症状乙肝携带者的HBV DNA载量、性别和年龄与PLT相关参数进行相关性分析，明确PLT参数变化在临床治疗中的意义。

1 材料与方法

1.1病例资料选择2016年4月～2016年8月解放军第105医院门诊及住院的无症状乙肝携带者169例，其中男94例，女75例，排除其他类型肝炎及血液系统疾病。根据不同HBV DNA载量以及不同年龄分别进行了分类，检测其PLT各参数指标和HBV DNA，并按照HBV DNA载量分为3组：<103IU/ml，103～105IU/ml，>105IU/ml。同时选取了250例健康体检者作为对照，按照年龄和是否乙肝携带分为对照低龄组(健康，≤45 岁)、对照高龄组(健康，>45岁)、阳性低龄组(乙肝携带，≤45 岁)和阳性高龄组(乙肝携带，>45岁)4组。

1.2主要仪器与试剂HBsAg采用苏州新波生物技术有限公司的时间分辨荧光定量仪进行检测，HBV DNA检测试剂购自厦门安普利公司，仪器为厦门安普利GeneLight9800 PCR仪，PLT参数采用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪及其配套试剂检测。

1.3检测方法实时荧光定量PCR检测HBV DNA下限为500 copy/ml。按照仪器和试剂说明书操作并每日做质控对照，采用全自动血细胞分析仪检测PLT参数。

2 结果

2.1HBVDNA载量、性别、年龄等对PLT参数的影响对HBV感染者DNA载量、性别以及年龄对PLT参数的影响进行了多因素方差分析，见表1(仅列出差异具有统计学意义的PLT参数)，不同HBV DNA载量、不同年龄对PLT和PCT有显著影响(P<0.05)，但性别对PLT和PCT参数的影响无统计学意义。

表1 HBV感染者相关因素对PLT参数影响

2.2年龄对HBV感染者PLT相关参数影响的差异分析对健康对照和HBV-DNA阳性人群按性别和年龄分组后，分析了不同年龄的PLT相关参数的差异。结果表明： HBV阳性感染者的PLT相关参数与相同年龄的健康对照组相比，PLT、PCT以及P-LCR参数在高龄组中均存在显著差异(表2、3)，其它参数在不同的年龄组中差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3不同HBVDNA载量对PLT相关参数影响的差异分析根据HBV DNA载量，将HBV阳性感染患者分为3组，进一步对不同HBV DNA载量与PLT相关参数的差异进行了分析。从结果可以看出，随着HBV DNA载量的升高，其PLT和PCT参数随之降低，差异达到显著水平(P<0.05)，PDW在DNA高载量组中显著性降低，而MPV和P-LCR参数变化并不显著(表4)。

2.4HBVDNA载量与PLT相关参数的线性相关性分析按照不同年龄组，分别对HBV阳性患者中HBV DNA载量与PLT相关参数的线性相关性进行了分析。结果表明在低龄组HBV感染者中，PLT相关参数的变化与HBV DNA载量均无显著相关关系(表5)；在高龄组患者中，HBV DNA载量与PLT和PCT参数变化呈显著负相关关系，而MPV、PDW和P-LCR则无显著相关关系，与以上分析结果较为一致。

表2 男性健康对照组与HBV感染者的PLT参数比较

与对照低龄组比较：*P<0.05;与对照高龄组比较：#P<0.05

表3 女性健康对照组与HBV感染者的PLT参数比较

与对照低龄组比较：*P<0.05;与对照高龄组比较：#P<0.05;与阳性低龄组比较：ΔP<0.05

表4 HBV DNA 载量分层与PLT相关参数差异分析

与<103组比较：*P<0.05;与103～105组比较：#P<0.05

表5 HBV DNA载量与PLT相关参数的相关分析(r值)

*P<0.05

3 讨论

PLT是由骨髓造血干细胞中的巨核细胞发育而成，PLT相关参数(PLT、PCT、MPV、PDW和P-LCR)是反映血小板生成与衰亡、诊断血小板相关疾病的的重要参数和依据[2,5]。随着全自动血细胞分析仪等检测技术的快速发展，使临床上对PLT相关参数的检测更加方便快捷，为评估各种疾病的PLT生成与功能、巨核细胞增生的动态变化提供了可靠的方法[6]。

PLT数量的降低是HBV感染患者中常见的并发症，关于HBV 感染引起PLT 减少的原因较为复杂。近年来的一些研究[7]表明，骨髓细胞的生长会受到HBV DNA的抑制，并且拷贝数与抑制效应有一定的剂量依赖关系。因此，对PLT相关参数的测定有助于判断HBsAg阳性者的病情程度和愈后情况[8]。本研究通过将年龄和性别因素纳入分析，对不同HBV DNA载量与PLT相关参数进行差异分析，结果显示不同HBV DNA载量和不同年龄对PLT和PCT均有有显著影响，而性别对PLT参数的影响并不显著。进一步的分析显示，在高龄组的HBV感染人群中，PLT和PCT参数较对照组显著降低，差异达到显著水平。同时，随着HBV DNA载量的升高，PLT和PCT参数的降低同样达到显著差异水平。

HBV DNA是判断HBV复制和传染性的金标准。本文研究表明，HBV DNA载量与PLT参数之间存在着一定的关系。HBV DNA载量越大，对巨核细胞的抑制作用可能就越强，进而可能导致PLT的显著减少，这与有关的报道也较为一致。如施士宇[9]通过临床统计发现肝炎病毒对骨髓巨核细胞具有明显抑制作用进而导致PLT减少；张欣 等[10]通过对临床250例肝病患者进行统计分析，发现肝病的发生程度与PLT相关参数异常正相关。PLT和PCT降低与HBV DNA载量的升高在45岁以上的高龄人群中有密切的关系，其可能原因是HBV DNA 载量对骨髓巨核细胞分化发育具有抑制或破坏作用，而在低于45岁的HBV感染者人群中并无相关关系，这可能与不同年龄人群中骨髓代偿功能差异引起的。PLT和PCT只在高龄组患者中与HBV DNA载量呈显著负相关，说明骨髓抑制并非HBV感染人群PLT降低的唯一原因。因此，HBV DNA与PLT参数之间的关系仍有待进一步研究与探讨。

因此，对乙肝患者临床治疗不仅要分析HBV DNA载量的变化，同时还应检测患者的PLT相关参数，有利于临床了解患者的病情及预后，为患者制定最佳治疗方案。

[1] Park J H,Choi E A,Cho E W,et al. Detection of cellular receptors specific for the hepatitis B virus preS surface protein on cell lines of extrahepatic origin [J]. Biochem Biophys Res Commun,2000,277(1):246-54.

[2] 田艳霞. 浅析血小板计数临床应用及影响因素[J].世界最新医学信息文摘,2015,15(65):185.

[3] 马 岳. HBV、HCV感染影响红细胞、血小板指数的差异[J].检验医学,2006,21(6):673-5.

[4] 丁胜楠,杨伟民,牛俊奇. 肝癌合并肝硬化患者血小板参数的变化及影响因素[J]. 临床肝胆病杂志,2014,30(6):556-9.

[5] 石雁梅,兰英华,单 蕾,等. 乙型肝炎病毒感染对造血干细胞活性的影响[J].中华传染病杂志,2008,26(4):197-201.

[6] 邓懋清. 血小板功能检测及其临床应用[J]. 中国医药指南,2008,6(17):148-50.

[7] Steinberg H S,Bouffard P,Trépo C,et al.Invitroinhibition of hemopoietic cell line growth by hepatitis B virus[J]. J Virol,1990,64(6):2577-81.

[8] 朱 莉,王海英. HBsAg阳性患者血小板参数测定的意义[J].青海医药杂志,2009,39(10):54-5.

[9] 施士宇.慢性乙型病毒性肝炎合并骨髓抑制3例[J]. 世界华人消化杂志，2008,16(9):1024-5.

[10] 张 欣,闫惠平. 病毒性肝炎患者250例血小板4项参数临床分析[J].中华医学实践杂志,2005,4(4):351-2.