病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞变化意义

罗素红

湖北省英山县人民医院心血管内科，湖北英山 438700

病毒性心肌炎是由亲心肌病毒引发的原发性心肌炎症，多数患者经及时治疗后可治愈，但也有部分患者可进展至慢性病毒性心肌炎甚至扩张型心肌病[1]。研究认为，病毒性心肌炎的发病机制包括病毒持续感染、免疫应答、遗传背景、氧化应激等[2]。辅助性T细胞是介导免疫应答的主要效应细胞，已有研究发现，Th1/Th2失衡参与了心肌损伤的发生发展过程[3]。有学者发现，作为一种不同于Th1、Th2的新型Th细胞，Th17与类风湿性关节炎、炎性肠病的发生密切相关[4]。此次研究即观察Th17细胞变化对病毒性心肌炎病程进展的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

在征得医院伦理委员会批准后，于2015年3月至2017年9月，选取符合1999年全国心肌炎心肌病会议制定的诊断标准[5]的173例病毒性心肌炎患者，纳入病毒性心肌炎组，并选取同期50例扩张型心肌病患者、50名健康体检者，分别纳入扩心病组、健康对照组；受试者均自愿参与此次研究并签署知情同意书。3组均排除合并感染性疾病者以及其他自身免疫性疾病者。3组受试者性别、年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检测方案

抽取受试者入组次日外周静脉血6 mL，取标本3 mL，使用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞，以Partec CyFlow Cube流式细胞仪（德国Partec公司）对其外周血Th17、Treg细胞进行检测，检测值以Th17/CD4+T、Treg/CD4+T表示；取剩余3 mL标本，使用酶联免疫吸附法（ELISA法），对其血清白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-17、IL-21以及抗心肌抗体（AHA）进行检测，试剂盒均购自美国R&D公司，其中，AHA检测结果以阳性率计，在健康对照组血清为阴性对照下，酶标仪450 nm处光密度值与阴性对照标本光密度值≥21即判定为阳性[6]。

1.3 分析方法

按照病毒性心肌炎组患者病程，将其分别纳入急性期组、迁延及慢性期组、恢复期组，分组标准[7]：急性期组：病程＜6个月，临床症状及检查结果明显阳性；迁延及慢性期组：病程＞1年，临床症状及检查结果迁延不愈或反复变化；恢复期组：病程≥6个月，临床症状及检查结果明显好转但暂未达到治愈标准。比较病毒性心肌炎组、扩心病组、健康对照组以及不同病程病毒性心肌炎患者检测指标差异，采用SPSS 19.0软件分析，运用Pearson法，计算外周血Th17细胞与Treg细胞表达水平的相关性。

2 结果

2.1 3组受试者血清及外周血指标检测结果

病毒性心肌炎组血清IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21浓度均高于扩心病组、健康对照组，其外周血Th17/CD4+T、Treg/CD4+T、Th17/Treg亦高于其余2组，差异有统计学意义（P＜0.05），扩心病组、健康对照组血清及外周血指标检测结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

病毒性心肌炎组AHA阳性率为92.49%（160/173），高于扩心病组的54.00%（27/50），健康对照组AHA均为阴性，组间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 3组患者血清及外周血指标检测结果比较（x±s）

2.2 不同病程病毒性心肌炎患者血清及外周血指标检测结果

迁延及慢性期组血清IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21浓度均高于急性期，其外周血Th17/CD4+T、Treg/CD4+T、Th17/Treg亦高于后者，差异有统计学意义（P＜0.05），急性期组上述血清及外周血指标均高于恢复期组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

迁延及慢性期组AHA阳性率为98.92%（92/93），高于急性期组的90.24%（37/41），急性期组AHA阳性率亦高于恢复期组的79.49%（31/39），差异有统计学意义（P＜ 0.05）。

表2 不同病程病毒性心肌炎患者血清及外周血指标检测结果比较（x±s）

2.3 相关性分析

病毒性心肌炎患者Th17/CD4+T与Treg/CD4+T呈正相关（r=0.571，P＜0.05）。

3 讨论

近10年来，病毒性心肌炎发病率较以往上升了10倍以上，约有15%的患者进展至扩张型心肌病[8]。多数学者认为，病毒感染后病毒在心肌细胞内大量复制所致损伤，以及病毒感染引发的自身免疫反应介导的损伤，是引发心肌损害的主要原因[9]。而在自身免疫反应中，已有许多研究发现Th17及其相应细胞因子IL-17与病毒性心肌炎的发生发展有所关联[10]。

动物实验发现，Th17与自身免疫性心肌炎的发生发展具有相关性，其机制可能与Th17释放IL-17促炎因子与其受体结合，进而激活相关信号分子并促使趋化因子及其他炎症因子释放有关，在正常状态下，上述过程可扩大炎症反应并发挥清除病毒效果，但过量IL-17的产生反而会产生免疫病理损伤[11-12]。为了解Th17对病毒性心肌炎发生发展的影响，此次研究进行了对照分析，结果显示，病毒性心肌炎患者Th17细胞、IL-17均显著高于其余2组，说明Th17主要通过促进炎症反应进展引发心肌损伤，且合并病毒感染时，机体炎症反应更为明显，Th17细胞水平亦更高。

Treg细胞包括天然型调节T细胞与诱导型调节T细胞，前者主要在胸腺分化，并通过识别主要组织相容性复合体Ⅱ提供自身肽与自身抗原反应[13-14]，而诱导型调节T细胞对自身与外来抗原均可产生应答，故有着无反应性和免疫抑制性两大功能特征。为抑制Th17细胞对心肌的损伤作用，机体也存在Treg细胞的免疫应答[15]，故本研究结果可见，病毒性心肌炎患者Treg细胞水平亦高于其他两组，且相关性分析亦印证了Th17细胞与Treg细胞水平的正相关性。

通过组间对比，可以发现，病毒性心肌炎患者存在Th17细胞、Treg细胞失衡状态，且不同病程阶段，细胞失衡状态存在一定差别。急性期病毒性心肌炎Th17细胞、Treg细胞及各类炎症因子水平均最高，说明此时病毒在心肌损伤的发生发展中起到最为重要的作用[16-17]，行免疫抑制治疗可能取得理想效果[18]。对于病情得到控制且进入恢复期的患者，其Th17细胞、Treg细胞与健康者无异，说明Th17细胞、Treg细胞平衡的恢复伴随着患者临床症状的改善，再一次印证了Th17细胞、Treg细胞与心肌损伤的密切关联。

总之，病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞水平明显升高，Th17的促炎作用所致自身免疫反应是引发心肌损伤、导致病毒性心肌炎发生与发展的重要机制。

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