柳州地区结核分枝杆菌感染及药敏耐药情况分析

韦丽淑，陈贤华，罗文婷（柳州市柳铁中心医院检验科，广西柳州545007）

结核分枝杆菌是结核病的病原体。近年来，结核病发病率呈持续上升的趋势。结核病疫情不断蔓延是全球严重的公共卫生问题之一。我国属于全球22个结核病高负担国家之一[1]。目前，我国结核病耐药率为18.6%，耐多药率为10.7%，且发生率不断上升[2]。据世界卫生组织最新耐药监测结果显示，在初治患者中，耐多药肺结核发生率大约为1.1%，在复发患者中高达7.0%[3]。耐多药结核病已成为严重威胁人们生命健康和生活质量的社会公共卫生问题。为了进一步了解柳州市及其管辖的六县（2014年开始本院承接柳州市及柳江、柳城、三江、融安、融水、鹿寨六县结核菌培养工作）结核分枝杆菌感染情况及耐药趋势，作者对本院结核分枝杆菌感染耐药情况进行了总结分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 选取2014年1月至2016年12月本院门诊和住院患者标本，包括痰、胸腹水、灌洗液、脓液、脑脊液等。2014年1 724份，其中阳性250份；2015年2 267份，其中阳性375份；2016年2 405份，其中阳性327份。

1.2 方法 采用河南赛诺特生物技术有限公司生产的药敏试剂进行检测。

1.2.1 操作方法 （1）培养基的制备，菌落初步鉴定，药敏操作及结果判断：按《结核病诊断细菌学检验规程》[4]执行。（2）药物敏感性测定：采用改良罗氏培养基，比例耐药法。（3）含药培养基的成分：链球菌4µg/mL，异烟肼 0.2µg/mL，利福平40µg/mL，乙胺丁醇2µg/mL，卷曲霉素40µg/mL，氧氟沙星2µg/mL，丙硫异烟胺40µg/mL，卡那霉素30µg/mL，对氨基水杨酸1µg/mL。

1.2.2 结果判断 含药培养基生长的菌落数大于或等于不含药培养基的1%判定为耐药：小于不含药培养基的1%，判定为敏感。

1.2.3 耐药种类的判定标准 单耐药：对一种抗结核药物耐药；多耐药：对一种以上抗结核药物耐药，但不包括同时对异烟肼和利福平耐药；耐多药：至少同时对异烟肼和利福平耐药；广泛耐多药：除对异烟肼和利福平耐药外，同时还对乙胺丁醇和链霉素耐药。

1.2.4 观察项目 观察并比较2014—2016年结核分枝杆菌感染情况、各种药物对结核分枝杆菌的耐药情况及结核菌株的耐多药情况。

1.3 统计学处理 应用SPSS16.0统计软件进行数据分析，计数资料以率或构成比表示，采用χ2检验统计组间的差异（若理论频数小于5，则采用连续校正χ2检验），P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 结核分枝杆菌感染情况 2014—2016年结核分枝杆菌培养阳性率分别为14.25%、16.54%、13.60%，3 年间比较，差异有统计学意义（χ2=8.263，P=0.016）；2014—2016年结核分枝杆菌耐药率分别为24.80%、18.93%、16.21%，结核分枝杆菌耐药率持续下降，3年间比较，差异有统计学意义（χ2=6.797，P=0.033）。2014年与2015、2016年结核分枝杆菌培养阳性率比较，差异均无统计学意义（χ2=3.087、0.683，P=0.079、0.408），见表1。

表1 2014—2016年结核分枝杆菌感染情况[%（n/n）]

2.2 各种药物对结核分枝杆菌的耐药情况 2014—2016年氧氟沙星和异烟肼耐药率比较，差异均有统计学意义（χ2=6.198、41.648，P=0.045、0.000）。2014—2016年各种药物合计耐药率比较，差异有统计学意义（χ2=166.067，P=0.000），利福平、链霉素耐药率最高，丙硫异烟胺耐药率最低。2014—2016年卡那霉素、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺耐药率比较，差异均无统计学意义（χ2=3.125、2.822、4.047、1.993、1.406、1.855、3.597，P=0.213、0.244、0.132、0.369、0.495、0.396、0.166）。见表 2。

2.3 结核菌株的耐多药情况 2014—2016年间菌株单耐药、多耐药、耐多药的耐药率呈下降趋势，广泛耐多药的耐药率基本不变。见表3。

表2 各种药物对结核分枝杆菌的耐药情况

表3 结核菌株的耐多药情况

3 讨 论

由表1可见，2014—2016年结核分枝杆菌培养阳性率分别为14.25%、16.54%、13.60%，耐药率分别为24.80%、18.93%、16.21%，低于全国第五次结核病流行病学抽样调查检测的4种一线药物总耐药率（36.8%）[5]，且持续呈下降趋势，差异有统计学意义（P＜0.05），说明柳州市对结核病的控制效果比较理想。

由表2可见，2014—2016年培养阳性的标本都存在不同程度的耐药，一线抗结核药（异烟肼、链霉素、利福平）耐药率高于其他二线抗结核药，其2014年的耐药率分别为 17.20%、12.40%、12.00%，2015年分别为7.73%、8.27%、9.07%，2016年分别为 9.48%、7.95%、7.95%。这可能与这3种药物作为传统的一线药物频繁使用产生耐药菌株有关。另外，菌株基因突变也是产生耐药的原因之一。据报道，异烟肼耐药与过氧化氢酶、过氧化物酶的编码基因KatG有关[6]；还有研究证实了结核分枝杆菌耐利福平与RNA聚合酶的8亚基的编码基因rPOB的突变有关[7]。对于普遍增高的一线化疗药物，在不影响疗效基础上，可以适当地使用一些二类化疗药物，也可以达到理想的治疗效果。李彩霞[8]的报道指出，左氧氟沙星比氧氟沙星在治疗耐多药肺结核方面具有更好的疗效，能降低患者不良反应发生率和结核分枝杆菌感染率。

由表3可见，2014—2016年耐药菌株中除广泛耐多药率基本不变外，单耐药、多耐药、耐多药的耐药率呈下降趋势。各种耐药率下降的原因之一是患者能够规范服药方法，接受系统治疗，联合使用药物；医生则及时了解结核的耐药情况，制订合理的治疗方案，做到化疗药物的统一监管和实施，全程督导治疗方案[9]。Xpert技术的应用也大大提高了结核分枝杆菌和异烟肼耐药性的检出率[10]，线性探针的使用则能快速地检测利福平和异烟肼的耐药情况[11]，PCR⁃反向点杂交法技术可在数小时内，检测结核分枝杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇等4种主要一线抗结核药物的耐药性，具有较高的特异度和敏感度，能够快速诊断并筛查出耐药结核患者，从而为患者尽快提供有效的诊疗方案[11]。这些技术的应用能够很好地指导临床用药。

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