金线草抗炎作用研究

★ 李晓春 王莉芳 樊宝娟 徐长根（陕西省食品药品监督检验研究院 西安 71 00 65）

金线草，为蓼科植物金线草Antenoron fi liforme（Thunb.）Roberty et Vantier的全草，别名重阳柳、毛蓼、人字草、一串红等。多年生草本，生于山地林缘、路旁阴湿处。分布于山东、河南、山西、陕西等地。夏秋采收，鲜用或晒干。味辛，性温。具祛风除湿，理气止痛之功效。内服外用皆可。常用于风湿骨痛、咳血、便血、跌打损伤等的治疗［1］。本研究以二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、角叉菜胶致大鼠足肿胀和纸片致小鼠肉芽增生等经典的炎症模型，考察金线草的抗炎作用，以期为金线草的进一步开发和应用提供实验依据。

1 材料

1.1 动物 昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22g；SD大鼠，雌雄兼用，体重180～220g，由西安交通大学医学部实验动物中心提供，实验动物质量合格证号：SCXK（陕）2012-003。饲养环境：温度22℃～26℃，相对湿度40%～70%，实验动物使用许可证号：SYXK（陕）2013-001。

1.2 试药 药材由陕西省食品药品监督检验研究院樊宝娟副主任药师鉴定为金线草Antenoron fi liforme的干燥全草。阿司匹林肠溶片（批号：BJ32774，拜耳医药保健有限公司）；吲哚美辛肠溶片（批号：G160402，山西云鹏制药有限公司）；醋酸地塞米松片（批号：150408，浙江仙琚制药股份有限公司）；伊文思蓝（批号：QR12404，MP公司）；角叉菜胶（Sigma公司）；二甲苯（分析纯，批号：20120208，国药集团化学试剂有限公司）；醋酸（分析纯，批号：20120831，国药集团化学试剂有限公司）。

1.3 仪器 YLS-25A电动耳肿打耳器（济南益延科技发展有限公司）；YLS-7C足趾容积测量仪（济南益延科技发展有限公司）；UV-2550双光束紫外分光光度计（日本岛津公司）。

2 方法

2.1 金线草水提物的制备 取金线草全草，粉碎成粗粉，装入纱布口袋，加10倍量水，浸泡1h，煎煮2次，每次2h，过滤，将滤液浓缩至高剂量含生药量为0.8g/mL，中剂量含生药量为0.4g/mL，低剂量含生药量为0.2g/mL。

2.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响［2-4］取健康昆明种小鼠，50只，雌雄各半，按体重随机分为金线草水提物组低、中、高剂量组及阳性对照组（阿司匹林0.5g/kg体重）、模型对照组（纯净水），灌胃给药20mL/kg体重，每天给药1次，连续7天。末次给药1h后小鼠左耳廓两面均匀涂抹致炎剂二甲苯20μL/只，右耳不做任何处理为正常耳。1h后小鼠脱颈椎处死，沿耳廓基线剪下双耳用7mm直径打孔器分别在双耳同一部位打下圆形耳片并称重，计算耳肿胀度和耳肿胀抑制率。耳肿胀度=左耳片质量（mg）-右耳片质量（mg）。耳肿胀抑制率（%）=（模型对照组耳肿胀度-给药组耳肿胀度）/模型对照组耳肿胀度×100%。

2.3 对醋酸致毛细血管通透性增高的影响［2］取健康昆明种小鼠，50只，雌雄各半，按2.2方法分组及给药。末次给药1h后，尾静脉注射0.5%伊文思蓝0.1mL/10g体重，然后腹腔注射0.6%醋酸溶液0.1mL/10g体重，30min后将小鼠脱颈椎处死，打开腹腔并用5mL生理盐水进行冲洗，冲洗液3000 r/min离心5min，上清液于590nm处测其吸光度值（A），计算抑制率。抑制率=（模型组平均吸光度-给药组平均吸光度）/模型组平均吸光度×100%。

2.4 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响［2-4］取健康SD大鼠，50只，雌雄各半，按体重随机分为金线草水提物低、中、高剂量组及阳性对照组（地塞米松10mg/kg体重）、模型对照组（纯净水），灌胃给药20mL/kg体重，每天给药1次，连续7天。末次给药1h后，于右后足跖皮下注射1%角叉菜胶生理盐水溶液0.1mL。用大鼠足趾容积测量仪对致炎前和致炎后1，2，3，4h的足趾容积进行测定，并计算足趾肿胀度及肿胀抑制率。足趾肿胀度=致炎后足趾容积（mL）-致炎前足趾容积（mL）。肿胀抑制率=（模型对照组足趾肿胀度－给药组足趾肿胀度）/模型对照组足趾肿胀度×100%。

2.5 对纸片致小鼠肉芽增生的影响［2，4］取健康昆明种小鼠，50只，雌雄各半，按2.2方法分组及给药，阳性药为吲哚美辛（20mg/kg）。小鼠乙醚麻醉后，无菌条件下，将一个经灭菌并称重的滤纸片植入左侧鼠蹊部，随即缝合。于次日各组小鼠灌胃给予相应药物，每天1次，连续7天。末次给药后1h，脱颈椎处死小鼠，打开原切口剥离并取出纸片肉芽肿组织，60℃下烘干，称重，减去原纸片重量即为肉芽肿净重，计算肉芽肿抑制率。肉芽肿抑制率＝（模型对照组肉芽肿净重－给药组肉芽肿净重）/模型对照组肉芽肿净重×100%。

2.6 统计学分析 采用SPSS19.0软件进行统计分析，实验数据以均数±标准差（）表示，多组资料的比较采用完全随机设计的单因素方差分析法，多组间两两比较采t检验，以P<0.05认为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 金线草水提物对小鼠耳肿胀的影响 阳性对照组和金线草水提物高剂量组小鼠耳肿胀度与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05或P<0.01），中、低剂量组小鼠耳肿胀度小于模型组，但无显著性差异（P>0.05）。结果见表1。

表1 金线草水提物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（，n=10）

表1 金线草水提物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（，n=10）

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

组别 剂量/g·kg-1 耳肿胀度/mg 耳肿胀抑制率/%模型对照组 - 11.29±1.22 -阳性对照组 0.5 9.89±0.94** 12.40低剂量组 4 10.58±0.90 6.29中剂量组 8 10.51±0.67 6.91高剂量组 16 10.12±0.59* 10.36

3.2 金线草水提物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响 阳性对照组和金线草水提物中、高剂量组均可抑制醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性增加，与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05或P<0.01）。结果见表2。

表2 金线草水提物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响（，n=10）

表2 金线草水提物对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响（，n=10）

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

组别 剂量/g·kg-1 A值 抑制率/%模型对照组 - 0.52±0.087 -阳性对照组 0.5 0.26±0.058** 50.0低剂量组 4 0.47±0.073 9.62中剂量组 8 0.43±0.062* 17.3高剂量组 16 0.43±0.062* 17.3

3.3 金线草水提物对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响 致炎前，各组大鼠的足趾体积均无显著性差异（P>0.05）。阳性对照组在致炎后1h、2h、3h、4h对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀有抑制作用，与模型对照组比较有显著性差异（P<0.01）；

金线草水提物中剂量组在致炎后2h对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀有抑制作用，与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05）；金线草水提物高剂量组在致炎后1h、2h能减轻大鼠足趾肿胀，与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05），但在致炎后3h、4h足趾肿胀度与模型对照组比较无显著性差异（P>0.05）。结果见表3。

表3 金线草水提物对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响（，n=10）

表3 金线草水提物对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响（，n=10）

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

组别 剂量/g·kg-1肿胀度（抑制率）/mL（%）致炎前足趾体积 1h 2h 3h 4h模型对照组 - 0.86±0.04 1.11±0.13 1.23±0.14 1.28±0.11 1.03±0.15阳性对照组 0.01 0.87±0.06 0.58±0.11** 0.57±0.07** 0.61±0.07** 0.65±0.09**（47.75） （53.66） （52.34） （36.89）低剂量组 4 0.87±0.06 1.02±0.17 1.03±0.17 1.12±0.25 0.91±0.13（8.11） （16.26） （12.5） （11.65）中剂量组 8 0.86±0.05 0.92±0.22 0.96±0.27* 1.07±0.32 0.90±0.19（17.12） （21.95） （16.41） （12.62）高剂量组 16 0.87±0.05 0.88±0.19* 0.97±0.27* 1.01±0.39 0.91±0.20（20.72） （21.14） （21.09） （11.65）

3.4 金线草水提物对小鼠肉芽增生的影响 阳性对照组肉芽肿净重与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05），金线草水提物低、中、高剂量组可以减轻肉芽肿净重，但与模型对照组比较无显著性差异（P>0.05）。结果见表4。

表4 金线草水提物对纸片致小鼠肉芽增生的影响（，n=10）

表4 金线草水提物对纸片致小鼠肉芽增生的影响（，n=10）

注：与模型对照组比较，*P<0.05

组别 剂量/g·kg-1肉芽肿净重/mg 肉芽肿抑制率/%模型对照组 - 1.58±0.13 -阳性对照组 0.02 1.39±0.22* 12.03低剂量组 4 1.51±0.07 4.43中剂量组 8 1.44±0.12 8.86高剂量组 16 1.43±0.13 9.49

4 讨论

炎症是机体对有害刺激和损伤所产生的一种防御性应答，是一种常见的病理过程。常用的抗炎实验方法根据致炎性质不同分为二大类：一类是非特异性炎症模型，使用的致炎因子有异性蛋白（如鸡蛋清）、颗粒性异物（角叉菜胶、棉球、纸片等）以及某些化学物质（二甲苯等）。另一类是免疫性炎症模型，包括细胞介导的超敏反应性炎症和免疫复合物介导的炎症模型。其中，非特异性炎症模型包括以血管通透性、白细胞游走为主要改变的各种急性炎症模型和以肉芽组织增生为指标的各种慢性炎症模型［4］。本研究所采用的炎症动物模型均属于非特异性炎症反应范畴，如二甲苯致小鼠耳肿胀模型、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型、角叉菜胶致大鼠足肿胀模型都属于急性炎症模型，以局部组织肿胀、毛细血管通透性增加、白细胞和巨噬细胞浸润为特点；纸片致小鼠肉芽增生属于慢性炎症模型，由于纸片的刺激作用而引起结缔组织增生，生成肉芽组织，模拟某些炎症后期的病理改变。

本研究在前期研究基础上系统评价了金线草的抗炎功效。结果显示，金线草水提物（16g生药/kg体重）可显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀，耳肿胀抑制率达到10.36%；金线草水提物（8、16g生药/kg体重）可降低醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性，减少急性、早期炎症的渗出，抑制率达到17.3%；金线草水提物（16g生药/kg体重）可减轻角叉菜胶致炎后1、2h的大鼠足趾肿胀，2h的抑制率达到21.14%；金线草水提物可减轻肉芽组织增生，但缺乏统计学意义。

以上结果提示，金线草水提物对于急性炎症有一定的抑制作用，但是对于慢性炎症无抑制作用。考虑到角叉菜胶引起足趾肿胀的特点是致炎局部前列腺素合成增加，并与血管活性物质和激肽类一起诱发水肿［3］，这将成为作者研究金线草抗炎作用机制的重点方向，同时对于金线草抗炎作用的物质基础，也将在后续的研究中进行探讨。

［1］江苏新医学院.中药大辞典[M].第1版.上海:上海人民出版社,1977.

［2］陈奇. 中药药理研究方法学[M]. 第1版. 北京:人民卫生出版社,1994:271-273, 305-307.

［3］张均田. 现代药理实验方法[M]. 第1版. 北京:北京医科大学/中国协和医科大学联合出版社, 1998:1382-1384.

［4］徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M]. 第2版. 北京:人民卫生出版社, 1991:713-719, 722-723.