复方冰甲乳膏急性毒性试验研究*

2018-06-12张天鉴

中国药业 2018年11期

邱洪，王慧，张天鉴

（中国人民解放军第44医院，贵州贵阳 550009）

复方冰甲乳膏来源于临床经验方，该方通过验方配比及工艺筛选出，由冰片、硫磺、硼砂、甲硝唑、制霉菌素等按最佳比例组成[1－2]，疗效明显，具有清热燥湿、收敛生肌之功效，主要用于真菌感染引起的手足癣等。为了保证临床用药的安全性，以及为进一步的作用机制研究提供客观依据，本研究中对此方进行了急性毒性试验研究，现报道如下。

1 材料与方法

1．1 仪器与试药

ALC－210．3型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）；Olympus BH －2型显微镜（日本）；SC－970型全自动血细胞分析仪（瑞士贝肯公司）；日立7170A型全自动生化分析仪（美国柯达公司）；HPIAS－1000型高清晰度彩色图文病理分析系统、光镜。复方冰甲乳膏（贵阳中医学院中药制剂研究中心，批号为20150126）；血细胞分析试剂（迈瑞南京生物技术有限公司）；生化实验试剂盒（北京利德曼生化股份有限公司）。

1．2 动物

取健康的10～16周龄日本大耳白色家兔，清洁级，体质量（2．5 ± 0．5）kg，20 只，雌雄各半，健康合格，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号为SCXK（黔）2012－001。所有动物均在恒温、恒湿的动物室饲养，且按性别分笼饲养，自由饮水、进食1周后，选择状态良好、行为活动无异常的动物进行实验。

1．3 方法[3－12]

动物分组：取健康合格家兔，用硫化钡脱毛剂给家兔两侧背部脱毛，每侧脱毛区域大小为8 cm×8 cm。脱毛后第2天，选取脱毛未损伤皮肤的家兔随机分为试验组和空白对照组，每组10只家兔，雌雄各半。

给药方法：本试验拟订临床成人日用复方冰甲乳膏剂量为3 g，成人平均体质量按60 kg计，则临床拟订成人日用量为0．05 g／kg。复方冰甲乳膏含药量为51．51%（含45．00%中药和6．51%西药）。试验组家兔皮肤涂抹给予复方冰甲乳膏2 g／kg(按每1 kg体质量含药量为1．030 2 g／kg计)。给药方法为用棉签均匀涂抹家兔两侧背部脱毛区域。空白对照组同法皮肤涂抹给予家兔等剂量的赋形剂。给药1次，连续观察14 d。

观察指标：记录动物有无毒性反应及实验前后体质量变化等。第15天将所有家兔心脏取血（取血前12 h禁食），先用10%水合氯醛以800 mg／kg腹腔注射麻醉家兔，然后快速打开胸腔暴露心脏，持10 mL注射器经左心室插入抽取5～8 mL血液标本），测定并分析血常规、血生化指标，包括红细胞（RBC）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（Hb）、单核细胞百分比（M）、淋巴细胞百分比（L）、中性粒细胞百分比（N）；天门冬酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、总胆红素（TBIL）、空腹血糖（FBG）、血清肌酸激酶 (CK)、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、碱性磷酸酶（AKP）、三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、K＋、Na＋、Cl－。

1．4 统计学处理

2 结果

皮肤涂抹给药后，动物发育健康，肌肉丰满，被毛浓密而有光泽、无脱毛，眼睛明亮而灵活，口鼻、肛门无异常分泌物，肛周洁净，摄食正常，四肢健壮，自发活动正常，体质量逐渐增加。期间未见动物死亡及毒副反应。14 d后处死全部存活家兔，经解剖和尸检未发现内脏器官异常。两组动物体质量增加无明显差异（P＞0．05），详见表1。心脏取血，比较两组家兔血常规、血生化指标，无显著性差异（P ＞0．05），详见表 2和表 3。

表1 两组家兔体质量比较（，kg，n＝10）

组别空白对照组剂量（g ／kg）性别试验组2 2 2 2雌雄雌雄给药前2．38 ± 0．19 2．49 ± 0．16 2．46 ± 0．25 2．47 ± 0．19给药后7 d 2．41 ± 0．21 2．57 ± 0．08 2．50 ± 0．24 2．58 ± 0．12给药后14 d 2．51 ± 0．14 2．64 ± 0．07 2．61 ± 0．23 2．64 ± 0．13

表2 两组家兔血常规指标比较(，n＝10)

项目WBC(109／L)RBC(1012／L)Hb(g／L)PLT(109／L)N(%)L(%)M(%)空白对照组2．85 ± 0．50 5．83 ± 0．41 143．1 ± 7．30 466．7 ± 80．1 35．6 ± 7．00 51．89 ± 9．82 13．99 ± 5．72试验组2．10 ± 0．60 6．16 ± 0．43 153．2 ± 10．9 456．0 ± 74．72 37．8 ± 9．03 58．50 ± 5．82 9．23 ± 7．52

表3 两组家兔血生化指标比较(，n＝10)

项目ALT(IU／L)TP(g／L)AST(IU／L)ALB(g／L)GLO(g／L)TBIL(μmol／L)BUN(mmol／L)Cr(μmol／L)AKP(U／L)K＋(mmol／L)Na＋(mmol／L)Cl－1(mmol／L)TC(mmol／L)TG(mmol／L)FBG(mmol／L)CK(U／L)空白对照组87．30 ± 58．13 45．89 ± 3．18 349．52 ± 89．59 27．18 ± 3．21 21．10 ± 2．45 0．45 ± 0．25 7．89 ± 0．74 19．98 ± 2．17 340．5 ± 76．24 7．22 ± 0．38 137．23 ± 2．98 98．68 ± 1．66 0．82 ± 0．18 0．66 ± 4．68 12．88 ± 1．80 3 429．3 ± 1 956．3试验组85．52 ± 15．32 47．90 ± 1．75 160．25 ± 61．35 28．1 ± 2．82 22．52 ± 2．46 0．81 ± 0．33 7．71 ± 0．47 20．13 ± 1．50 274．48 ± 79．11 6．65 ± 0．83 136．15 ± 1．56 96．40 ± 1．59 0．91 ± 0．15 0．45 ± 8．27 13．96 ± 1．52 1190．72 ± 462．4

3 讨论

足癣是常见的传染性皮肤病，容易复发。国内足癣复发率为50% ～80%[13]，尤其部队官兵多为集体生活，加上长期在野外训练，更易引发真菌感染，造成手足癣的相互传染。

复方冰甲乳膏为中西药结合的复方制剂，主要用于真菌感染引起的手足癣等，前期临床试验已表明其临床疗效与益康倍松乳膏相当[14]。前期皮肤刺激性试验[15]及其急性毒性试验研究均显示，复方冰甲乳膏具有良好的安全性。本试验结果表明，复方冰甲乳膏对家兔一般状况无明显影响。用药后动物均存活，家兔外观、行为、呼吸状态、体位及姿势、对刺激的反应、大体剖检均未见明显异常，复方冰甲乳膏对家兔的体质量无明显影响。在短期内对家兔血液成分及肝功能、肾功能、电解质、血糖、血脂、心肌酶无明显影响，即无明显急性毒性。

综上所述，复方冰甲乳膏家兔皮肤给药急性毒性试验中，家兔每日最大给药量为2 g／kg，相当于临床拟订成人日用量的120倍，未见明显毒性反应。因此，复方冰甲乳膏是一种安全性较高的外用制剂，值得临床推广。

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