高效液相色谱法检测注射用头孢呋辛钠含量

苟建亚

摘 要：本文采用高效液相色谱法测定了注射用头孢呋辛钠中头孢呋辛的含量，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为醋酸盐缓冲液-乙腈（85：15），检测波长为273nm，头孢呋辛在0.04～0.14mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。头孢呋辛的平均回收率为99.3%。本方法是一种简便、准确、安全的测定注射用头孢呋辛钠含量的方法。

关键词：头孢呋辛钠；含量；测定

头孢呋辛钠为一种半合成第二代头孢菌素类抗生素[1]，药物别称为：西力欣、头孢羟苄四唑甲酸酯、达力新Zinacef、呋肟头孢菌素、头孢呋肟酯、头孢呋肟、头孢氨呋肟钠等。因其对革兰氏阴性菌的？内酰胺酶相当稳定，有穿透血脑屏障等特点，临床上广泛应用于敏感菌引起的呼吸道、泌尿系统、皮肤、软组织、骨关节及女性生殖器等组织器官的感染，对败血症、脑膜炎也有效[2-4]。头孢呋辛钠的测定方法主要有微生物法、旋光法、紫外分光光度法、近红外光谱法和高效液相色谱法等[5]。本文采用高效液相色谱法对注射用头孢呋辛钠进行了含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器

分析天平 METTLER TOLEDO XP205；pH计 METTLER TOLEDO FE20；电热恒温水浴锅 天津泰斯特 DK-98-IIA；液相色谱仪Agilent 1260；检测器 Agilent 1260；色谱柱 依利特hypersil ODS C18 （4.6*250*5u ）。

1.2 试药

色谱乙腈（TEDIA）、醋酸钠AR（天津市光复科技发展有限公司）、冰醋酸AR（天津市科密欧化学试剂有限公司）。

2 含量测定

2.1 色谱条件：色谱柱为依利特hypersil ODS C18色谱柱（4.6*250*5u）；流动相为醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸5.5ml加水稀释成1000ml，用冰醋酸調节pH值至3.4）-乙腈（85：15）；检测波长为273nm；流速0.7mL·min-1；柱温：25℃。

2.2 对照品溶液的制备

取头孢呋辛对照品约11mg，精密称定，置100mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液（每1mL溶液中含约0.1mg），取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

2.3 供试品溶液的制备

取注射用头孢呋辛钠约11mg，精密称定，置100mL容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液（每1mL溶液中含约0.1mg），取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

2.4 系统适用性试验

取头孢呋辛对照品约27mg，置50mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度（每1mL溶液中含约0.5mg），摇匀，至60℃水浴放置30分钟，放冷，使头孢呋辛部分转变为去氨甲酰头孢呋辛，作为系统适用性溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，头孢呋辛峰和去氨甲酰头孢呋辛峰的分离度应大于3.0，头孢呋辛峰与相对保留时间约为1.1处杂质峰间的分离度应符合要求[6]，即大于1.5。取对照品溶液连续进样5次，记录色谱图，头孢呋辛峰面积积分值的RSD应不大于2.0%。

2.5 专属性

供试品溶液出峰时间与对照品溶液出峰时间一致，专属性强。

2.6 精密度试验

取对照品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。重复测定6次，对照品峰面积积分值的RSD为0.33%。结果表明，本实验精密度良好。

2.7 重现性试验

分别称取同批注射用头孢呋辛钠6份，测定含量并计算含量的RSD为0.77%。结果表明，此含量测定方法的重现性良好。

2.8 检测限与定量限

将对照品溶液用水逐级稀释，每次取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。信噪比为10：1时的进样量为定量限，为10ng，信噪比为3：1时的进样量为检测限，为3ng。

2.9 线性与范围

制备浓度为0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14mg·mL-1的对照品溶液，分别取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。以进样浓度（mg）为横坐标，峰面积积分值A为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，y=164124x+33.65，r=0.9999。试验表明，头孢呋辛对照品在0.04～0.14mg·mL-1范围内线性关系良好。

2.10 稳定性试验

取供试品溶液，存放于4℃样品室中，分别在0，2，4，6h取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液头孢呋辛峰面积的RSD为0.57%。结果表明在4℃条件下头孢呋辛至少在6h内稳定。

2.11 回收率试验

采用加样回收试验，称取3份供试品约22mg，精密称定，按照供试品溶液制备方法制备，分别准确移取3份3ml供试品溶液至9个10ml容量瓶中，再称取对照品约22mg，精密称定，按照对照品溶液制备方法制备，分别移取1ml、2ml、3ml对照品溶液至已加入供试品溶液的容量瓶中，制备成3个供试品高、中、低浓度共9份样品，测定含量，计算回收率。9次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.59%，回收率良好。

2.12 样品含量测定

依照外标法测定三批注射用头孢呋辛钠的含量，以头孢呋辛计分别为标示量的100.1%、100.2%、99.9%。

3 讨论

本方法采用高效液相色谱法测定注射用头孢呋辛钠的含量，操作简便、准确度高，能够很好的控制药品质量，保证了临床用药的安全。

参考文献

[1]高硕，杨错，王红.头孢呋辛钠药动学的研究进展[J].中国药房，2012（1）.

[2]邓宝军，林诗贵，李蜀巍，等.头孢呋辛的临床抗感染研究进展[J].中国临床药理学杂志，2000（5）.

[3]白林，王晓蕾，王璐，等.头孢呋辛钠与5种常用输液的配伍稳定性研究[J].中国药师，2008（3）.

[4]注射用头孢呋辛钠说明书.

[5]谢守霞，董淳.旋光法测定注射用头孢呋辛钠的含量[J].华西药学杂志，2003（3）.

[6]袁琦，郭新社，杨浩.HPLC法测定注射用头孢呋辛钠的含量[J].河南大学学报，2012（4）.

[7]中国药典：二部[S].国家药典委员会.中国医药科技出版社，2015.