高效液相色谱法测定小儿泻痢停片中醋酸泼尼松的含量

齐心 赵崇羚

摘 要：目的：探究小儿服用类型泻痢停片当醋酸泼尼松物物质含量。方法：以高效液相类型色谱分析法为主要分析方式，选择Hypersil色谱柱，在配置流动相的阶段选择比例为58比42的甲醇和水的混合溶液，并将流动相的实际流速控制为每分钟一毫升，设定检测波的长度数值为240纳米，将氢化可物质作为内标物。结果：在探究实验中，醋酸泼尼松以及内标物的实际保留时间长度分别为11.7分钟和7.8分钟，在80毫克每毫升到240毫克每毫升的浓度区间内，醋酸泼尼松物质与内标物的具体峰面积比例和相应的浓度比例表现出了线性关系，醋酸泼尼松物质的具体平均回收率数值达到百分之99.93。结论：在对小儿服用类泻痢停片当中醋酸泼尼松物质含量进行分析的时候，采用高效液相类型色谱分析方式在分析精准性、操作便捷性以及分析灵敏度方面表现良好，可采用这一技术对药剂质量进行控制。

关键词：液相色谱；泻痢停片；含量；测定；醋酸泼尼松；医学

小儿服用类泻痢停片常被归类一种抗菌类型的药物制剂，这种药物在应对痢疾杆菌导致的急慢性类型痢疾、各种肠道病菌导致小儿胃肠炎症等疾病。这种药物当中有效治疗药物为磺胺甲恶唑以及醋酸泼尼松等物质。在当前部分地区的药品生产标准当中仅仅对小儿服用类泻痢停片中的磺胺甲恶唑物质的含量检测方法进行了记述，但是却未对药物当中醋酸泼尼松物质的含量测定方式进行规定。但就小儿服用类泻痢停片而言，由于其对应的群体为小儿，所以要求药品中醋酸泼尼松物质的含量标准为每片1.5毫克，为了在保证小儿服用类泻痢停片在发挥作用的同时避免药物对小儿的身体健康造成影响，因此也就要建立药物中醋酸泼尼松物质含量的测定方法，使小儿服用类泻痢停片的质量能得到控制。

1 仪器设备以及处方

1.1 仪器设备以及试药

液相色谱仪系统（日本岛津）。色谱甲醇，水为重蒸水；醋酸泼尼松、磺胺甲恶唑、甲氧苄氨嘧啶、氢化可的松对照品（中国药品生物制品检定所）。

1.2 小儿服用类型泻痢停片药物处方

磺胺甲恶唑100g，甲氧苄氨嘧啶20g，醋酸泼尼松1.5g，颠茄浸膏2g，制成1000片。

2 方法以及结果

2.1 检测中波长数值选择

在这一环节中，以精密称量的方式称取适量的醋酸泼尼松物质，用这些物质制成含量为每毫升120微克的甲醇溶液，并将甲醇当做空白，在波长数值为200纳米到400纳米区间内进行扫描，发现醋酸泼尼松物质240纳米波长数值上吸收率最大，最终决定将240纳米设定为检测阶段所用的波长数值。

2.2 色谱条件以及适应实验

以高效液相类型色谱分析法为主要分析方式，选择Hypersil色谱柱，在配置流动相的阶段选择比例为58比42的甲醇和水的混合溶液，并将流动相的实际流速控制为每分钟一毫升，设定检测波的长度数值为240纳米，将氢化可物质作为内标物。监护柱体的温度调整到25摄氏度到26摄氏度之间，以20微升为单位定量进样。

2.3 对照物质溶液制备

采用精确称量的方式称取醋酸泼尼松对照物40毫克，将这些物质放置到100毫升规格的量瓶当中，在摇匀后留做后续使用。制备的内标物物质的时候，精密量取氢化可的松物质30毫克，将这些物质放到规格为100毫升的量瓶当中，向其中加入甲醇溶液使其溶解，并使用甲醇溶液将其稀释到刻度线留做后续使用。

2.4 标准曲线的绘制

分别精密量取醋酸泼尼松对照品溶液5毫升，6毫升，7.5毫升，10毫升，12.5毫升，14毫升，15毫升，放置到25毫升的容量瓶当中。各加内标溶液10毫升，分别用甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样，记录峰面积，以质量浓度（X）为横坐标，醋酸泼尼松峰面积与内标物峰面积之比（Y）为纵坐标。

2.5 加样回收率试验

精密称取同一批号已知含量的小儿泻痢停片粉末适量（约相当于醋酸泼尼松，20毫克），置100毫升量瓶中，精密加入醋酸泼尼松对照品20毫克，加甲醇使溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过。各加内标溶液10毫升，加甲醇稀释至刻度。

2.6 样品的测定

取小儿泻痢停片60片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于醋酸泼尼松40毫克），置100毫升量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液10毫升置25毫升量瓶中，加内标溶液10毫升，加甲醇稀释至刻度。

2.7 结果

在探究实验中，醋酸泼尼松以及内标物的实际保留时间长度分别为11.7分钟和7.8分钟，在80毫克每毫升到240毫克每毫升的浓度区间内，醋酸泼尼松物质与内标物的具体峰面积比例和相应的浓度比例表现出了线性关系，醋酸泼尼松物质的具体平均回收率数值达到百分之99.93。

3 讨论

以紫外扫描光谱结果图可以发现，醋酸泼尼松物质在240纳米波长数值条件下有最大吸收峰显现，所以降240纳米设备定为检测中的使用波长。

但从醋酸泼尼松物质的特点来看，醋酸泼尼松为白色或几乎白色的结晶性粉末；无臭，味苦。不溶于水，微溶于乙醇、醋酸乙酯，略溶于丙酮，易溶于氯仿。主要用于各种急性严重细菌感染，严重过敏性疾病，胶原性疾病。如果药物中某些物质含量超标或者服用方式不科学，则会产生不良副作用交叉过敏反应。对一种磺胺药呈现过敏的患者对其他磺胺药也可能过敏。肝脏损害。可发生黄疸、肝功能减退，严重者可发生急性肝坏死，故有肝功能损害患者宜避免应用。肾脏损害。可发生结晶尿、血尿和管型尿，故服用小儿泻痢停片期间应多饮水，保持高尿流量，如应用小儿泻痢停片疗程长、剂量大时，除多饮水外，宜同服碳酸氢钠，以防止此不良反应。失水、休克和老年患者应用小儿泻痢停片易致肾损害，应慎用或避免应用小儿泻痢停片。肾功能减退患者不宜应用小儿泻痢停片。对呋塞米、砜类、噻嗪类利尿药、磺脲类、碳酸酐酶抑制药呈现过敏的患者，对磺胺药亦可过敏。胃与十二指肠溃疡及心力衰竭患者慎用。

在文中实验条件下，醋酸泼尼松峰的色谱行为与其他成分的差异较大，在7分钟前，磺胺甲口恶唑峰、甲氧苄氨嘧啶峰与溶剂峰相继出峰完毕7分钟后，醋酸泼尼松峰与内标峰才出现。理论板数以醋酸泼尼松峰计算为1500，醋酸与各组分峰的分离度不少于2.8。

由于该药品主要的受众是小儿，因此要更加重视药品中各物质含量的管理，让药物中各物质的含量都被控制在合理的范围内，在保证药物治疗效果的同时避免药物中某些物质含量过高而造成患者身体出现副作用。

在对小儿服用类泻痢停片当中醋酸泼尼松物质含量进行分析的时候，采用高效液相类型色谱分析方式在分析精准性、操作便捷性以及分析灵敏度方面表现良好，可采用这一技术对药剂质量进行控制。

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