双黄连片的多组分质量分析

李纯

摘 要：目的：通过高效液相色谱法对片状双黄连药品的多组分质量加以分析，并研究其多组分的含量。方法：应用新型梯度洗脱技术对片剂状的双黄连内部含有的多种化学成分进行测定，在检测时选用的波长为280nm。结果：在固定的色谱测定条件下，对双黄连药品中含有的咖啡酸、绿原酸、连翘苷、泸定、黄岑素以及黄岑苷进行了测定。结论：本次应用的双黄连片质量测定方法较简单，但其测定结果精准，方法可行，可以被推广到双黄连药品检测工作中。

关键词：双黄连片；多组分质量；检测技术

双黄连药品在我国的药品市场中比较常见，属于常用药品，其不仅仅可以被制成口服液以及片剂，使患者直接口服，还能是患者通过注射这种方式接受这种药品，其经常会被应用到治疗感冒过程中，能够帮助患者消除咽喉肿痛、咳嗽以及发热带来的痛苦，其主治的感冒类型为外感风热型的感冒，同时也能够起到较好的解毒清热效果。该药品中含有连翘、黄岑以及金银花，这几种成分都能够使药品起到清热解毒以及疏风解表的治疗效果，在经过体外实验之后可以了解到该药品还具有抗病毒以及抑菌的效果。其内含成分比较复杂，不同的成分具有的应用效果也不同，因此可知该药品的成分质量的重要性，如果质量检测方法不合理，成分测定就会存在偏差，本文选用梯度洗脱技术，对片剂状态的药品进开展质量检测，对其关键成分进行测定，现有检测过程如下：

1 材料和方法

1.1 一般材料

仪器：32色谱工作站，超声清洗机，漩涡混合器，离心沉淀机。

试剂：乙腈、甲醇（HPLC级），乙酸、乙醇为分析纯。

样品：双黄连片剂，缺金银花、黄芩、连翘的双黄连片剂。对照品：咖啡酸、黄芩素；绿原酸、芦丁、黄芩苷、连翘苷购自中国药品生物制品检定所。

1.2 方法

标准溶液配制：分别精密称取对照品置量瓶中，以甲醇为溶剂，配制成单组分标准品溶液，而后配制混合标准品溶液，其中含绿原酸0.2mg·mL-1、咖啡酸0.1mg·mL-1、芦丁0.05mg·mL-1、连翘苷0.02mg·mL-1、黄芩苷1.3mg·mL-1、黄芩素0.1mg·mL-1。

供试液的制备：取片剂10片，除去薄膜包衣，研细。精密称取100mg，置离心管中，加溶剂甲醇-水（1：1）4mL超声15min，离心后取上清液，残渣再重复操作一次，合并两次上清液于10mL量瓶中，定容至10mL。

2 结果

用甲醇-乙酸溶液及乙腈-乙酸溶液两种溶剂系统，通过不同的流动相配比，对混合标准品溶液进行HPLC等度分析，根据混合标准品溶液中6个组分的保留时间和系统的死时间分别计算出容量因子k'，并作出相应的图像及关系图，见图1。由图1可知，在任一个等度分析中，或是两个组分的k'相同，或是k'值相差很大。结果表明很难用等度一次完成6个组分的快速分离分析，其中甲醇-乙酸溶液系统情况更差。

取混合标准品溶液分别进样，按确定的色谱条件进样，记录峰面积与进样量，計算回归方程，结果见表1。

取同一批号双黄连片剂10片，除去薄膜包衣，研细，精密称取5份，每份100mg，按供试液的制备方法处理，进行HPLC分析，结果表明6种所测成分的RSD均小于2%。

3 讨论

在对实验条件进行限定时，为了给药品测定工作创造最优的测定条件，对多种溶剂测定药品进行了筛选，对甲醇与水之间的比例进行了调整，最后发现水与甲醇的配置比例为1：1时，提取工作相对比较安全。在用提取方法时，实验人员选用的方法为热回流提取法，这种方法比较适合提取双黄连药品的关键成分，将在不同时间中开设的超声提取法与这种方法进行对比之后确定热回流活动在3h时与两次超声振荡提取活动获取的实验结果比较接近，一次超声振荡工作需要15min，两种提取方法均可以达到完全提取的目的，因此实验选用了合适的溶剂开展了两次提取活动。

本次药品质量研究实验除了测定药品的不同成分具有的质量之外，还对分离药品组分的效果进行了测定，主要对影响分离效果的元素展开了分析，酸度不同时，分离情况也有所不同，对比不含酸的流动相与含有酸的流动相之后，发现两种流动相的分离差异极为明显，但是乙酸含有数值对于流动相不会给成分分离工作带去过多的影响，但是完全不含有乙酸成分的流动相的洗脱需求却无法被有效满足。

在考察流速对分离成分是否有影响时发现，流速并不会直接影响到最终的药品分离效果，但是影响组分的出峰时间。

双黄连作为一种复方型的重要制剂，具有成分复杂的主要特点，其成分之间存在着极性差距，如果仅仅只应用等度洗脱方法是难以使其各种成分均获得有效分析，甚至无法满足分离的基本需求，因此本文对常用的双黄连药品的成分分离工作进行了分析，并在常用分离方法的基础上添加了全新的梯度设计内容，将预试环节消耗的分离时间减少，可以通过一次进样就将双黄连药品中的6种组份有效分析，不需要过多繁琐的操作，对该种质量检测方式进行进一步改进之后，还能将其推广到其他复方型中药质量检测工作之中。

参考文献

[1]李卯.双黄连泡腾片干法制粒工艺研究[J].中国科技投资，2017（16）.

[2]樊克锋，汤法银，赵建平，王长林.从《双黄连口服液》谈中兽药提取制剂的应用前景[J].中国兽药杂志，2017，51（7），64-69.

[3]眭晓哲.双黄连可溶片的制备及质量标准研究.（Doctoral dissertation，河北医科大学），2016.