食源性疾病监测中副溶血性弧菌现场快速检测方法的建立与应用

◎ 张作杰

（高密市疾病预防控制中心，山东 高密 261500）

副溶血性弧菌属于食源性疾病中最主要的致病菌，对副溶血性弧菌进行有效检测，将为临床治疗食源性疾病提供更具有参考价值的资料和信息[1]。本次研究主要建立了多种食源性疾病监测中副溶血性弧菌现场快速检测方法，并观察不同检测方法的实际应用效果，具体研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取高密市疾病预防控制中心2016年8月—2017年8月收集的211份肠道门诊腹泻患者样本，及以海水产品为主的150份食品样本作为研究材料。同时，由高密市疾病预防控制中心提供副溶血性弧菌作为阳性对照菌株，并提供嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、单核细胞增生李斯特菌、类志贺邻单胞菌、鼠伤寒沙门菌和福氏志贺菌等作为对照菌株。

1.2 方法

快速检测仪器主要选用发过生物梅里埃公司生产的全自动细胞鉴定仪、美国佰乐公司生产的ABI7500荧光PCR仪。研究中采用的具体快速检测方法有典型生化联合筛检法、实时荧光定量PCR法和恒温扩增-核酸试纸条法。

1.3 统计学处理

本次研究当中的所有数据均采用SPSS19.0统计软件进行处理，计数资料采用数（n）率（%）表示，组间比较采用卡方（x2）检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 不同方法检测副溶血性弧菌的特异性

本次研究中选取了20株副溶血性弧菌和11株其他细菌作为检验对象，分别采用典型生化联合筛检法、实时荧光定量PCR法和恒温扩增-核酸试纸条法进行检测。结果显示，20株副溶血性弧菌中有1株为PCR阴性，19株为PCR阳性；11株其他细菌的3种检测结果均为阴性，见表1。

表1 不同方法检测副溶血性弧菌的特异性表

2.2 不同样本采用不同检测方法的副溶血性弧菌检测结果

采用不同检测方法对不同样本的副溶血性弧菌进行检测发现，典型生化联合筛检法、实时荧光定量PCR法和恒温扩增—核酸试纸条法对211份腹泻样本的阳性检出率均为12.3%；上述3种检测方法对150份食品样本的检测结果中，阳性检出率分别为19.4%、19.4%、18.7%，其中，海水产品的检出率最高，均为18.7%。各种检测方法的副溶血性弧菌阳性检出率无明显差异，无统计学意义（P＞0.05）。详见表2。

表2 不同样本采用不同检测方法的副溶血性弧菌检测结果表

3 讨论

副溶血性弧菌具有繁殖速度快等特点，因而临床难以有效控制该细菌引起的食源性疾病的暴发与传播[2-3]。本次研究主要制定了多种不同的食源性疾病中副溶血性弧菌的检测方法，发现典型生化联合筛检法、实时荧光定量PCR法、恒温扩增-核酸试纸条法均具有快速检测优势，在应用当中均能够产生相对良好的检测效果。综上所述，典型生化联合筛检法、实时荧光定量PCR法、恒温扩增-核酸试纸条法在快速检测副溶血性弧菌方面具有重大应用价值。

[1]陈玉凤，侯 君，李 瑞，等.2013-2014年大连市食源性疾病主动监测中分离的副溶血性弧菌病原特征[J].中国卫生工程学，2016，4（4）：338-341.

[2]姚利利，何 平，沈先标，等.上海市宝山区540份水产品中副溶血性弧菌监测结果分析[J].中国初级卫生保健，2016，30（11）：47-49.

[3]王 鸽，申屠平平，朱珈慧.2014年金华市食源性疾病监测结果分析[J].中国食品卫生杂志，2017，29（1）：97-100.