慢性牙周炎伴2型糖尿病患者失牙修复前全唾液白细胞介素-6、基质金属蛋白酶-8的水平变化及临床意义

苏哲君 王 鹏 霍 峰 马 莉

(承德医学院附属医院口腔科，河北 承德 067000)

慢性牙周炎(CP)是口腔微生物与宿主之间相互作用失衡引发的慢性炎症，导致牙周软组织和硬组织的破坏〔1〕，是成年人失牙的主要原因。糖尿病(DM)患者患CP的风险较无DM者高3倍〔2〕。Ding等〔3〕研究发现，DM与促使牙周组织损害有关的炎症细胞因子、导致组织破坏有关的分子水平有一定联系。其中白细胞介素(IL)-6和基质金属蛋白酶(MMP)-8受到广泛关注。已有研究证实IL-6和MMP-8参与牙周病变，且还与牙周组织的破坏相关〔4〕，但对于老年CP伴2型糖尿病(T2DM)患者全唾液内IL-6、MMP-8与血糖控制水平是否有关报道很少。本文探讨CP伴T2DM患者全唾液IL-6和MMP-8水平及临床意义。

1 对象和方法

1.1研究对象 选取2014年7月至2015年3月承德医学院附属医院就诊CP伴T2DM患者48例，单纯CP患者20例。2组符合以下入选条件：年龄≥60岁，口内至少余留16颗天然牙，至少缺失一颗天然牙，近6个月未进行过牙周治疗；近3个月未使用过抗生素及免疫抑制剂；不吸烟；无口腔黏膜病变或明确的唾液腺病变者。纳入标准：符合1999年WHO糖尿病诊断标准被诊断为T2DM，且至少6个月以上；无其他全身系统性疾病；口服降糖药物或注射胰岛素治疗，近期病情无变化；按《牙周病学》诊断标准诊断为CP；根据2013IDF发布的《老年2型糖尿病管理全球指南》〔5〕，以糖化血红蛋白(HbA1c)为指标，HbA1c<8%为血糖控制良好，HbA1c≥8%为血糖控制不理想。CP伴T2DM组男20例，女28 例；年龄60～73〔平均(65.8±3.3)〕岁。对照组男7例，女13例；年龄60～73〔平均(64.9±4.2)〕岁。两组性别和年龄比较差异均无统计学意义(均P>0.05)，具有可比性。

1.2研究方法

1.2.1非刺激性全唾液样本收集 采集时间为清晨08：00～10：00，采集前1 h勿大量饮水及进食。收集前清水漱口，在非刺激的情况下收集10 min流出的全唾液，将唾液置入1.5 ml的Ep管，高速冷冻离心机在4℃、13 000 r/min下离心15 min(离心半径为5.5 cm)，提取上清液，-80℃保存，待测。

1.2.2全唾液中MMP-8及IL-6的测定 室温复融全唾液上清液，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测标本中IL-6、MMP-8水平，IL-6试剂盒购自Abclonal公司，MMP-8超敏试剂盒购自MuLTISCIENCES联科生物公司。检测过程严格按照说明书的步骤进行。

1.3统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2及t检验，相关性采用Spearman相关分析。

2 结 果

2.1各组IL-6、MMP-8水平比较 CP伴T2DM组全唾液IL-6、MMP-8水平较单纯CP组显著增高，差异有统计学意义(P<0.05)。CP伴T2DM组HbA1c≥8% 者(28例)全唾液IL-6、MMP-8水平显著高于HbA1c< 8%者(20例)，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2相关性分析 CP伴T2DM组HbA1c与全唾液IL-6、MMP-8水平均正相关(r=0.55，0.732，均P=0.00)。

表1 各组全唾液IL-6、MMP-8水平比较

与单纯CP组比较：1)P<0.05；与HbA1c<8%组比较：2)P<0.05

3 讨 论

DM是一种常见的以高血糖为特征的慢性代谢性疾病。DM本身并不引起CP，但可影响牙周组织对细菌的反应性〔6〕，高血糖状态可造成牙周局部微环境的改变。和非DM患者相比，DM患者的CP患病率及严重程度增加〔7〕。HbA1c一直作为评价DM患者血糖控制的金标准，可以反映近2～3个月血糖平均水平。糖代谢控制越差，HbA1c越高。

唾液是一种维持口腔健康的重要生理性体液，龈沟液溢出牙龈后进入口腔中与唾液混合在一起称全唾液，是宿主口腔免疫防御系统的重要组成部分。近年来，随着非刺激性的唾液收集方法及唾液检测方法的发展，使人们对唾液生物标记物的关注日益增加。唾液中宿主牙周组织炎症反应和软、硬组织破坏相关标记物可以反映牙周病的发生和进展〔1〕。唾液相对龈沟液临床易获取，对患者无伤害，适合大样本量的取样。IL-6是CP时炎症局部产生的重要细胞因子，来源广泛，具有多种生物学活性，参与牙周组织的破坏，其表达量与CP的炎症程度呈正相关〔8〕；MMP-8是一种重要的胶原水解酶，在牙周结缔组织和骨组织的破坏过程中起重要作用〔9，10〕。Ebersole等〔11〕发现CP与牙周健康者唾液中MMP-8、IL-6 和肿瘤坏死因子-α有差异。

本文结果表明MMP-8、IL-6可能参与了牙周病变的有关过程，符合Ebersole等〔11〕的报道结果。究其原因，这可能是因为CP伴T2DM患者多形核白细胞单个核细胞可能存在“炎症反应特征”，对某些微生物或其毒素的刺激可产生异常强烈的炎症反应，释放高质量浓度的促炎细胞因子等炎性介质。龈沟中促炎性细胞因子通过自分泌和旁分泌途径刺激更多的IL-6产生〔12〕。MMP-8是牙周组织破坏的主要蛋白溶解酶，主要降解破坏牙周支持组织细胞外基质(ECM)。炎症条件下，牙周的细菌产物、细胞因子及生长因子作用于牙周和炎症细胞，产生并释放更多MMP-8，导致唾液中MMP-8水平提高。DM患者并发牙周病时，其唾液内的IL-6、 MMP-8量不仅会受到牙周炎症影响，而且会受到高血糖状态的影响。DM患者的免疫应答显示亢进反应，炎症介质显示分泌过剩倾向。高血糖状态可促进胰岛细胞分泌IL-6〔13〕；高血糖状态也可促进炎性细胞分泌MMP-8，最终增加IL-6、MMP-8的表达水平。糖代谢控制越差，炎性细胞越活跃。已有研究表明糖尿病患者的高血糖状态可诱导人单核细胞产生促骨吸收的细胞因子IL-6，牙龈成纤维细胞产生基质金属蛋白酶〔14，15〕。

本研究显示对老年CP伴T2DM患者失牙修复前，既要重视患者的口腔健康，定期实施牙周检查及维护，强化菌斑控制，确保牙周组织健康，又要嘱患者长期监测和控制血糖，消除或减少DM对牙周病的影响。因此，对IL-6、MMP-8水平监测有助于CP伴T2DM患者的治疗，值得重视。

4 参考文献

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