关于多菌灵残留量检测的实验研究

王侠文 杨泽川

摘 要：多菌灵应用范围广，在农作物中残留量的检测十分重要。基于此，试验建立了苹果、梨、桃、橙四种多菌灵的

的液相色谱串联质谱分析方法。结果表明，多菌灵在四种水果中的平均回收率为93.2%～109.3%，RSD 为5.0%～9.6%，

其准确度及其灵敏度均满足农药残留分析的要求。

关键词：多菌灵残留量；液相色谱；基质效应

水果含有丰富的矿物质、维生素等营养物质，广受欢迎。但是，在成长过程中常使用农药多菌灵来抗菌防霉。多菌灵又称苯骈咪唑44号，化学名称为2-（甲氧基氨基甲酰）苯骈咪唑，是一种广谱、高效、内吸性杀真菌农药，目前，已广泛用于水果种植生产。由于其化学性质稳定，不易降解，而且有一定的毒性，能够持久地残留在果品蔬菜中，导致多菌灵残留累积，可通过食物链，对人引起兴奋、抽搐、精神恍惚、恶心呕吐、头昏头疼、胸闷、上腹压痛等中毒症状，影响人体健康。因而，对其残留量进行检测具有必要性。

1.实验部分

1.1仪器与设备

Acquity uplc H-Class和Xevo TQD液相/串联质谱仪

（ 美国Waters 公司）， Sigma3k15 型离心机（ 德国）；Acquity BHE C18色谱柱（ 100 mm×2.1 mm，内径1.7μm）；电子天平（精确到0.01g）；涡旋振荡器；0.22μm有机系针孔滤膜过滤器；以及实验室常规实验设备。

1.2试剂与材料

多菌灵标准储备液1000μg/mL（农业部环境质量监督检验测试中心）；超纯水；乙腈和甲醇均为色谱纯（ Fisher 公司）；样品前处理试剂盒和净化包（C18、PSA（乙二胺-N-丙基硅烷）GCB）（美国Agilent公司）。

1.3实验步骤

1.3.1标准溶液配制

将多菌灵标准储备液（1000μg/mL）用甲醇以及4种水果的空白溶剂分别稀释至0.2、0.1、0.05、0.02、0.01μg/mL工作溶液，现配现用。

1.3.2试样制备

样品用组织捣碎机捣成匀浆，与4℃冷藏保存。

1.3.3样品提取与净化

准确称取样品15g（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入15mL0.1%的乙酸乙腈，涡旋振荡30s，取出上清液加入萃取试剂盒（6gMgSO4，1.5g乙酸钠）经振荡离心后取2mL上清液加入带有50mgPSA，150mgMgSO4的离心管中。涡旋离心后过0.22μm有机系针孔滤膜后，上机。

1.4仪器条件

1.4.1液相色谱条件

流動相：乙腈（A相），0.1%甲酸水溶液（B相）；淋洗梯度见表1所示，运行时间：11min，进样量10μL，柱温：40℃。

1.4.2质谱条件

离子检测方式为多反应离子检测（MRM）和子离子扫描，极性为正离子（positive），离子化方式为电喷雾离子化（ESI），毛细管电压为：4000V，干燥气温度为：330℃，干燥气流速为：8.0L/min，雾化气压力为：40psi，采用的离子对为m/z：192.2～160.2和192.2～132.2，碰撞能量分别为：15和20，用于定量的离子对为：192.2～132.2。

2.结果与分析

近年来，液相色谱串联质谱分析法在国际上已广泛应用于农药多残留分析，是一种快速、简单、有效的样品前处理方法。步骤简便使得对农药的损失减小，试剂的消耗降低。一般水果采用PSA+MgSO4，含色素的水果采用GCB+PSA+MgSO4，GCB能去除水果中色素从而减少色素对样品结果的影响。

2.1线性范围和检出限、定量限

取多菌灵溶液0.2、0.1、0.05、0.02、0.01mg/L的纯溶剂及不同样品的基质空白溶剂上机检测，以待测物浓度为横坐标，待测物的峰面积为纵坐标，绘制线性方程如表2所见。结果显示相关系数均大于0.9969，检出限为0.10～0.15μg？kg-1，定量限为0.37～0.49μg？kg-1，均低于残留限量。

2.2方法回收率和精密度

在四种水果中按40、100μg/kg两种水平添加标准溶液，每个水平重复5次，加标回收实验见表3，平均加标回收率在（93.2%～109.3%），提取效果好，稳定性高，方法的回收率及精密度均符合检测要求。

2.4基质效应

基质效应就是样品中的干扰物影响目标化合物的离子化，使得目标化合物在仪器上的响应发生增强或抑制的现象，为提高目标化合物测定的准确性，需要对基质效应作出评价，并选择合适方法消除或减少基质效应对测定结果的影响。本实验分别用甲醇溶液、四种不同水果空白基质溶液配成一系列的标准溶液，用高效液相质谱仪检测。结果表明四种不同水果的基质标样峰面积均小于甲醇标样的峰面积，说明这四种水果中基质对多菌灵有抑制作用，本实验为了消除基质效应的抑制作用，采用不同水果对应不同的基质配制的标准曲线计算结果。

3.结论

综上所述，液相色谱串联质谱分析法能有效减少基质效应， 省去了复杂的净化浓缩的过程，并且检测结果准确，适合于多种水果中多菌灵的残留检测，具有较好的应用价值，可在日常的检测工作中推广。

参考文献：

[1]蒋建功，杨松，林琎，等.优化的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法检测黄瓜中29种杀菌剂残留[J]. 农药学学报， 2017（6）.

[2]张国霖. 超高效液相色谱法测定水果加工制品中的多菌灵[J]. 化学工程与装备， 2013（2）：167-168.