血腺苷脱氨酶在1型糖尿病及其急慢性并发症患者中的检测意义

周佳雁 华飞 蒋晓红 唐暎 王龙

常州市第一人民医院内分泌科（江苏常州213000）

糖尿病是胰岛素分泌相对或绝对不足引起的糖代谢紊乱性疾病。目前有研究报道［1⁃3］血清腺苷脱氨酶（adenosine deaminase，ADA）在2型糖尿病患者中水平明显增高，其可能机制为ADA可促进胰岛素抵抗，从而进一步影响糖脂代谢。有研究表明［4］，在 1 型 糖尿病（type 1 diabetes group，T1DM）患儿中检测到ADA1基因的表达，推测ADA可能与T1DM发生发展有关。但目前关于腺苷脱氨酶与T1DM及其并发症的研究较少。T1DM患者的免疫功能紊乱与细胞免疫、T淋巴细胞功能障碍有关。ADA是嘌呤核苷代谢的关键酶之一，其分别催化腺苷和脱氧腺苷脱氨酸到肌苷和脱氧肌苷。ADA是淋巴细胞和单核细胞，巨噬细胞系统分化和增殖所必需的酶，用于监测几种免疫系统疾病。该酶被认为是细胞免疫的合适标记物。T细胞参与由B细胞介导的腺苷信号传导。腺苷可降低T细胞的活化。存在于B淋巴细胞表面的ADA可能使腺苷信号失活。ADA包括具有独特生化特性的2种同工型。ADA1在淋巴细胞和单核细胞中活性最高的细胞中发现，而ADA2是正常受试者血清中主要的同种型，在类风湿关节炎、结核病、艾滋病和糖尿病等炎症性疾病中大量增加［1］。本研究检测184例T1DM患者的ADA与糖脂代谢水平及糖尿病并发症相关性，以探讨ADA在T1DM患者中的检测意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象 以2009-2015年于常州第一人民医院内分泌科住院诊疗的184例T1DM患者（年龄14～87岁，男107例，女77例）为T1DM组，根据罹患糖尿病并发症情况分为单纯T1DM无并发症组（sT1DM组）55例，糖尿病急性并发症组（acute dia⁃betes complications group，aT1DM组）即糖尿病酮症酸中毒47例；糖尿病慢性并发症组（chroni diabe⁃tes complications，cT1DM组）82例：糖尿病神经病变71例，糖尿病肾病17例，糖尿病视网膜病变19例，糖尿病大血管病变13例。所有糖尿病患者均符合1999年WHO关于糖尿病诊断标准，糖尿病分型主要依据临床特征，同时符合中华医学会糖尿病分会关于中国T1DM的诊治指南，包括:（1）起病年龄：6月龄至成年人；（2）起病方式：大多较急，多数患者有口干、多饮、多尿伴体重下降，部分患者直接表现为脱水、循环衰竭或昏迷等糖尿病酮症酸中毒症状；（3）治疗方式：依赖胰岛素治疗时间超过6个月；（4）一般特征：无肥胖及黑棘皮病。其中成人起病的T1DM诊断标准采用《中华医学会糖尿病分会关于成人隐匿性自身免疫糖尿病诊疗的共识》中的诊断标准［5］。同时排除其他自身免疫性疾病、肝炎、肝硬化、显著肝功能不全、肿瘤性疾病、血液系统疾病及其他原因导致的神经系统疾病、眼病及肾脏疾病。纳入同期体检的患者108例为正常对照组（concrol group，CN组），其中男39例，女69例，年龄16～71岁。

1.2 研究方法 对纳入对象测量身高、体质量，计算体质指数（BMI），使用全自动生化分析仪测定血空腹血糖（fasting blood glucose，FPG）、血清ADA、血清总胆固醇（total cholesterol，TC）、血清三酰甘油（triacylglycerol，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesferol，HDL⁃C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholestorol，LDL⁃C）。采用西门子DCA Vantage糖化血红蛋白分析仪测定糖化血红蛋白（glycated hemoglobin，HbA1c）。

1.3 统计学方法 采用SPSS 22进行统计学处理，所有正态分布计量资料采用±s表示，组间均数比较采用单因素方差分析。计数资料的比较采用卡方检验，两个连续变量间相关性比较采用Pear⁃son相关性分析，多变量分析采用线性回归分析。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 T1DM患者与正常人群血清腺苷脱氨酶水平比较 T1DM患者的血清ADA水平显著高于正常对照人群，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

图1 T1DM患者与正常人群血清ADA水平的比较Fig.1 Comparison of blood adenosine deaminase levels between patients with or without type 1 diabetes mellitus

2.2 各组患者基本资料及临床指标比较 与sT1DM组相比，cT1DM组患者年龄、病程、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、ADA显著升高，aT1DM组HbA1c、TG显著升高，而ADA、HDL⁃C水平显著降低；与cT1DM组相比，aT1DM组患者年龄、病程、BMI、SBP、DBP、ADA、HDL⁃C 水平显著降低，HbA1c、TG水平显著偏高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1、图2。

图2 T1DM患者各组血清ADA水平比较Fig.2 Comparison of serum ADA levels in patients with T1DM patients

2.3 T1DM患者中空腹血糖与血ADA相关分析 结果提示ADA与空腹血糖呈显著相关正相关（P＜0.05），相关系数为0.156。见图3。

表1 1型糖尿病患者各组间基本资料及临床指标比较Tab.1 Comparison of basic data and clinical indexes among patients among different groups with type 1 diabetes mellitus x±s，中位数（四分位数）

图3 T1DM患者空腹血糖与血清ADA水平相关性分析Fig.3 Correlation analysis of fasting blood glucose and serum ADA level in T1DM patients

2.4 T1DM慢性急性并发症危险因素Logistics回归分析 分别以是否罹患T1DM慢性或急性并发症应变量，其他临床及生化指标为自变量，行多元线性回归分析，结果见表2、3，最终腺苷脱氨酶进入方程，为发生慢性并发症的独立危险因素（OR：1.159，95%CI：1.044～1.286），为罹患急性并发症的危险因素（OR：0.857，95%CI：0.748～0.981）。

3 讨论

T1DM是以病毒感染为常见诱因，免疫紊乱为特征的代谢紊乱性疾病，这些免疫紊乱与细胞介导的免疫反应有关，T细胞功能异常与胰岛功能缺陷相关。腺苷是一种遍布人体细胞的内源型核苷，主要由受损的细胞或炎细胞释放，是用于合成ATP的重要中间体。腺苷通过作用于腺苷受体起到生物学作用。ADA是一种与机体细胞免疫活性有关的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。ADA有两种主要的同工酶，分别为ADA1和ADA2。ADA广泛分布于人体组织中，在T淋巴细胞中活性最高，被认为是细胞介导的免疫反应的一个很好的标记。高水平的ADA在很多具有细胞介导的免疫性疾病中均有报道，而血清ADA水平的改变被认为与预测1型糖尿病免疫功能障碍相关。

本研究比较了T1DM患者与正常人群间血ADA的水平，结果显示T1DM患者血ADA水平高于正常人群组，两两相关分析，ADA与FBG正相关（P＜0.05）。这与其他研究报道结果一致［6］。但目前关于ADA在T1DM中的作用机制尚未明确。升高的血清ADA1同工酶由于定位在细胞内，因此其水平的升高可归结于广泛的细胞坏死或淋巴样细胞的增加。ADA2仅在单核细胞和巨噬细胞中发现。ADA2可刺激CD4细胞的增殖，诱导单核细胞分化为巨噬细胞，并在感染和慢性炎症期间释放。SAPKOTA等［1］研究发现，ADA仅仅与患者血糖显著相关，与血脂、BMI无关，因此认为ADA是除HbA1c外［7-8］能早期监测诊断疾病的新指标。ADA被认为是早期检测诊断T1DM的新手段这可能是因为其水平的增高与患者免疫功能改变有关。

本文进一步结果显示T1DM患者血ADA水平与糖尿病并发症密切相关：结果显示，aT1DM组的ADA水平低于cT1DM组（P＜0.05）。进一步行Lo⁃gistic回归分析，结果提示ADA水平的升高是罹患T1DM慢性并发症的独立危险因素，ADA水平的下降是罹患T1DM急性并发症的保护性因素，这与COLGAN等［9］研究结果一致。COLGAN等［9］认为机体受到损伤时，受损细胞释放ATP，后者经CD39、CD73酶化作用形成腺苷，通过与细胞表面的腺苷受体结合产生一系列连锁反应。在急性损伤状态下，例如糖尿病性酮症酸中毒，体内腺苷水平升高，而ADA水平未及时相应增高，腺苷受体激活可起到促伤口愈合、抗炎症反应的作用，是机体的一种保护性反应。

表2 T1DM慢性并发症危险因素Logistic回归分析Tab.2 Logistic regression analysis of risk factors for chronic complications of type 1 diabetes mellitus

表3 T1DM急性并发症危险因素Logistic回归分析Tab.3 Logistic regression analysis of risk factors for acute complications of type 1 diabetes mellitus

在慢性疾病中，包括糖尿病，腺苷可促使胰岛素抵抗，导致心肺肾肝等重要器官纤维化从而导致靶器官功能不全。有研究［10⁃11］报道糖尿病肾病患者血清ADA升高显著，且与尿微量蛋白呈显著正相关，认为血清ADA活性增高使腺苷受体途径表达异常，促糖尿病肾病的发生及肾脏纤维化。有研究［12⁃13］发现，在糖尿病视网膜病变患者中，ADA的同工酶ADA2通过上调巨噬细胞产生的细胞因子参与视网膜屏障的破坏。KATZ等［14］研究报道体内ADA水平的异常通过影响腺苷受体通路表达改变可影响糖尿病神经病变的发生发展。这与本研究结果相同，笔者认为血清ADA水平的增高是预测T1DM慢性并发症发生的独立危险因素。

综上所述，ADA在T1DM糖代谢及并发症的发生、发展过程中起到重要作用。目前检测血ADA水平越来越受重视，被认为是疾病早期诊断的重要指标。但目前关于T1DM与ADA及其亚型的研究较少，进一步明确ADA在T1DM中的作用机制、信号传导通路可为早期检测、诊断、治疗及预防T1DM提供新思路。

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