2014-2015年鄱阳湖地区禽流感病毒流行风险分析

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禽流感是一种禽类感染疾病，由A型禽流感病毒引起，可分为无致病性禽流感、低致病性禽流感和高致病性禽流感。该病毒有多种不同的亚型，其中，H9N2等可以引起轻型呼吸道疾病、禽蛋减产[1]，H5N6、H10N8、H7N9，H5N1等血清型则能引起严重性疾病甚至致死[2]，严重威胁禽类和人类的健康。鄱阳湖是我国最大的淡水湖泊，也是全球候鸟迁徙的主要途经地，有研究发现候鸟很可能长时间携带禽流感病毒并沿迁徙路线将其传播至远处[3]。由于环鄱阳湖区生态环境适宜，拥有养殖水禽的优良条件，因而养禽业发达，拥有国内较大的禽蛋产品交易市场。有研究认为我国2014年人感染禽流感H10N8 病毒很有可能就来自江西省当地活禽市场[4]。近年来，江西省报告禽流感病例较频繁，因此，探究该地区容易存在禽流感病毒的环境场所，以及影响其病毒阳性率的因素成为了一个十分有意义的问题，有利于为今后的禽流感病毒防治工作提供合理的建议。

1 材料与方法

1.1标本收集 采取分层随机抽样的方法，以鄱阳湖为核心，选取九江市的永修县、德安县和庐山区、南昌市的南昌县和新建县、上饶市的余干县和万年县作为我们的研究现场，详见图1。在确定的研究现场中，选取家庭散养户较多、以养殖鸡鸭为主、存在禽类栖息的区域进行采样，采样场所总共分为四类，即候鸟保护区、家庭散养户、活禽批发市场、活禽零售市场。于2014年9月、2015年1月及2015年3月底共进行3次采样。采集的标本共5种，分别是禽类粪便、羽毛、饮水、笼具涂抹物、蛋表面擦拭物，采集完成后，将采集的标本置于采样液中，震荡离心后，取上层清液分装，置于-70 ℃低温保存，并运送至国家流感中心。

图1 研究现场分布图Fig.1 Map of the study site

1.2标本检测 吸取200 μL本液，接种于SPF鸡胚尿囊腔，在37 ℃恒温环境中培养48 h后，利用A型流感病毒快速检测试纸进行检测，试纸出现两条横线即为阳性结果，仅一条则为阴性结果。收集出现快检阳性结果的尿囊液，提取核酸进行Realtime RT-PCR，以确定是否为A型流感病毒。

1.3方法 采取Epidata3.0进行双录入，SPSS19.0软件进行相关统计学分析。采用卡方检验进行构成比的比较，检验标准选取α=0.05。鉴于候鸟保护区中并不涉及消毒、清洗、免疫等方面，因此单因素及多因素分析中，并未将此场所纳入。

2 结 果

2.1各类场所禽流感病毒阳性率分布情况 对采样的4类场所分别进行禽流感病毒检测，共采集7 470份标本，各场所病毒阳性率结果各有差异，且差异具有统计学意义(χ2=1377.7，P<0.05)。其中，活禽批发市场和活禽零售市场的阳性率(分别为32.5%、36.86%)远高于候鸟保护区和家庭散养户(分别为0.36%、0.9%)，详见表1。

表1 四类场所禽流感病毒阳性率分布

Tab.1 Distribution of positive rates of avian influenza viruses in four types of sites

地点标本数阳性数阴性数阳性率(%)χ2P候鸟保护区2473924640.361377.70家庭散养户41903841520.9活禽批发市场56720935836.86活禽批发市场56720935836.86合计747033471364.47--

2.2不同场所禽流感病毒阳性率相关影响因素分析

2.2.1各类场所活禽密度与阳性率分布情况 进行采样的4类场所中，活禽零售市场的活禽密度和活禽批发市场(分别为6.4羽/平米、4.7羽/平米)远高于家庭散养户活禽密度和候鸟保护区(分别为3 羽/平米、0.002 羽/平米)，与各类场所禽流感病毒阳性率分布趋势大致相同。详见图1。

图2 各类场所活禽密度与阳性率分布图Fig.2 Distribution of live poultry density and positive rate in different places

2.2.2家庭散养户、活禽批发市场以及活禽零售市场阳性率的单因素分析 对家庭散养户、活禽批发市场以及活禽零售市场这3类场所进行单因素分析发现，调查时间、活禽密度、消毒频率以及采样场所类型均对禽流感病毒阳性率有影响，详见表2。

2.2.3多因素Logistic回归分析 单因素分析中有统计学意义的因素为自变量，禽流感病毒阳性率为因变量，进行多因素Logistic回归分析，赋值情况见表3。多因素Logistic回归分析结果显示，活禽密度、消毒频率以及采样场所均对禽流感病毒阳性率有显著影响。其中，与高密度组相比，中密度组的禽流感病毒阳性率为高密度组的0.590倍(95%CI=0.398～0.876)，低密度组的禽流感病毒阳性率仅为高密度组的0.014倍(95%CI=0.009～0.021)；与消毒间隔超过7 d组相比，消毒间隔小于7 d组的禽流感病毒阳性率为该组的0.275倍，95%CI=0.187～0.404；与活禽零售市场相比，活禽批发市场的禽流感病毒阳性率为其的0.825倍(95%CI=0.599～1.135)，家庭散养户则仅为其的0.016倍，(95%CI=0.011～0.023)。详见表4。

表2 家庭散养户、批发市场和零售市场阳性率的单因素分析结果

Tab.2 Single-factor analysis of positive rate of scattering raising-households, wholesale markets and retail markets

表3 变量赋值表

Tab.3 Variable assignment table

表4 影响禽流感病毒阳性率的多因素Logistic回归分析结果

Tab.4 Multivariate logistic regression analysis of the positive rate of avian influenza virus

模型系数标准误wald值POROR(95%CI)截距0.5070.2703.5180.061采样时间2014年9月0.1580.1650.9260.3361.1720.849～1.618活禽密度低密度组-4.270.198464.6450.0000.0140.009～0.021中密度组-0.5270.2016.8510.0090.5900.398～0.876消毒频率消毒间隔小于7天组-1.2920.19743.0320.0000.2750.187～0.404采样场所活禽批发市场1.2570.111129.0930.0000.8250.599～1.135家庭散养户-2.7060.122496.3120.0000.0160.011～0.023

注：采样时间(参照2015年3月组)；活禽密度(参照高密度组)；消毒频率(参照消毒间隔超过7 d组)；采样场所(参照活禽零售市场)

2.2.4活禽家庭散养户免疫情况与阳性率关系 对有完整免疫程序与无完整免疫程序的家庭散养户分别进行采样，共采集4 190份标本，在有完整免疫程序的家庭散养户采集的2 889份样本中，阳性标本共13份，阳性率为0.45%；在无完整免疫程序的家庭散养户采集的1 301份样本中，阳性标本共25份，阳性率为1.92%。不同免疫情况的活禽家庭散养户禽流感病毒阳性率相比，具有统计学差异(χ2=21.6,P<0.05)。详见表5。

表5 活禽家庭散养户免疫情况

Tab.5 Immunization of domestic poultry households

免疫情况标本数阳性数阴性数阳性率(%)χ2P有完整免疫程序28891328760.4521.60.000无完整免疫程序13012512761.92合计41903841520.90--

3 讨 论

从2014年9月、2015年1月及2015年3月底3次标本采集检测结果来看，进行禽流感病毒检测的4类场所中，禽流感病毒阳性率结果为活禽零售市场(36.86%)>活禽批发市场(32.5%)>家庭散养户(0.9%)>候鸟保护区(0.36%)，差异具有统计学意义(χ2=1377.7,P<0.05)。有研究发现，很多从事禽类养禽人员本身的防护意识不高[5-8]，这是影响养殖场所禽流感病毒阳性率的重要因素。本研究发现，活禽零售市场及活禽批发市场病毒阳性率远高于家庭散养户和候鸟保护区，且从本研究的多因素分析结果来看，家庭散养户的活禽禽流感病毒阳性率仅为活禽零售市场的0.016倍，但活禽批发市场和活禽零售市场的病毒阳性率相差不大，这可能与活禽零售和批发的禽类接触危险因素的机会更多有关。活禽通过各种渠道被运输到各地，会显著增大疫病传播的风险[9]。因此，应对各类相关工作人员做好宣传教育工作，以提高其防范意识，从而降低禽流感病毒传播和感染风险。

各类场所活禽密度由高到低依次为：活禽零售市场、活禽批发市场、家庭散养户、候鸟保护区，与禽流感病毒阳性率结果的大体趋势相同。并且在对该地区家庭散养户、活禽批发市场和活禽零售市场这3类场所进行单因素及多因素分析时，均发现低活禽密度、高消毒频率对降低禽流感病毒阳性率有显著影响：低密度组的禽流感病毒阳性率仅为高密度组的0.014倍，高频率消毒组的禽流感病毒阳性率仅为低频率消毒组的0.275倍；在对活禽家庭散养户免疫情况与阳性率进行分析时发现，有完整免疫程序的家庭散养户的阳性率远低于无完整免疫程序的家庭散养户(χ2=21.6,P<0.05)。以上结果提示我们，对该地区的禽流感病毒防治工作可以重点从合理规划活禽密度、规范并完善消毒免疫程序这两个方面进行。

Garber L等人的研究也表明，每天的清洁消毒工作有利于降低活禽市场的阳性检出率[10]。贾伟新等人认为，活禽交易市场在禽流感病毒的传播过程起着十分重要的作用，病毒阳性率随着家禽进入市场后的停留时间延长而增加[11]，并且，由于鸭的“特洛伊木马”作用，其感染病毒后可呈不患病的状态[12]，因此，鄱阳湖区作为禽类贸易频繁地区，加强各类禽类场所的日常消毒工作就显得尤为重要。为更好地控制疫情传入交易市场，不仅应对各类场所进行消毒，还应对运输的交通工具等做好消毒工作。

本次调查检测到的候鸟保护区禽流感病毒阳性率虽相对较低，但由于禽流感本身就是适合在鸟类(包括鸡鸭)中传播的流感，感染病毒的候鸟在迁徙过程中，羽毛、粪便等可能污染水源从而造成家禽感染，且候鸟与家禽的密切接触，也易发生病毒的交叉感染，因此加强湖区的监测工作，有利于及时发现相关环境疫情，并控制其传播。鄱阳湖由于其优良的条件，拥有丰富的鸟类资源[13]，该地区作为候鸟迁徙的重要途径地点，其禽流感病毒的防控工作对全球禽流感病毒控制具有重要意义。

禽流感疫情暴发后会严重影响禽类市场输出，扰乱全球禽肉市场物价稳定性[14-15]。因此，加强各类工作人员的相关知识教育、合理规划各类场所活禽密度并规范消毒免疫程序、加强各类场所卫生工作的监察力度，全面做好禽流感的防控工作，将极大可能的避免由该病毒给各类人群及社会带来的巨大经济损失。

由于现场调查受时间和经费预算限制，因此2015年1月份没有涉及活禽市场和家庭散养户的采样，无法分析相关环境禽流感病毒阳性率的持续性变化情况。此为本研究的局限性。

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