肉牛粪便中寄生虫卵的检测研究
2018-05-10李成贤曹洪志
李成贤 曹洪志
(宜宾职业技术学院,四川宜宾 644003)
粪便检查是寄生虫病生前诊断的最基本、最常用的方法。多种寄生虫如吸虫、绦虫、线虫、棘头虫和球虫等,寄生于畜禽的消化系统或呼吸系统,某一发育阶段的病原体,常随畜禽的粪便排出,因此,检查粪便发现有寄生虫的虫卵、幼虫、虫体或虫体断片,可确诊畜禽消化系统(包括肝脏)、呼吸系统和泌尿生殖系统的寄生虫病[1]。畜禽患寄生虫病后,除少数呈现典型症状外,家禽的多数寄生虫病在临床上仅表现消化机能障碍、消瘦、贫血、营养不良和发育受阻、生产性能降低等慢性、消耗性疾病的症状,虽不具特异性,但可作为早期发现疫病的参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料 粪便采集于宜宾巨力农业开发公司,采集新鲜粪便8份,每份15 g,装入干净的一次性口袋内分别标记清楚,带回实验室置于4 ℃待检。
1.2 试验仪器 试管、试管架、纱布、剪刀、烧杯、显微镜、载玻片、盖玻片和牙签等。
1.3 试验方法和原理 采用漂浮法进行检测。该法的原理是利用比虫卵比重大的溶液作为检查用的漂浮液,使寄生虫的虫卵、球虫卵囊等浮聚于液体表面,取表膜液制片镜检,以提高检出率。该法适用于检查粪便中的线虫卵、绦虫卵和球虫卵囊。
2 试验步骤
(1)配制饱和食盐水:在1 000 mL烧杯中加入适量水,加入过量食盐搅拌,有少量盐析出,即为饱和盐水,取上清液备用。(2)取1 g左右的粪便置于100 mL烧杯中,加入少量饱和盐水用玻璃棒搅拌混匀,继续加入10~20倍的饱和盐水,搅匀[2]。(3)3层纱布过滤,滤液注入直立的直径1.5~2.0 cm的平口试管。(4)用滴管补加过滤粪液,滴至液面凸出管口,管口覆以清洁盖玻片。(5)滤液和盖玻片接触,其间不留气泡,放置30 min。(6)平移此盖玻片于事先放有一滴甘油水的载玻片上镜检。
3 结果与分析
通过镜检图片对照可以判断该虫卵为线虫。线虫卵大多数是卵生的。由于线虫的种类很多,所以其大小和形状差别很大。但绝大多数的虫卵都是呈椭圆形的,外形对称,卵膜平滑,少数有结节或凹凸不平。卵壳一般都由三四层膜组成,卵壳内有卵细胞。绝大多数是无色透明的,少数是黑褐色的、棕褐色的。如图1所示为线虫卵早期分裂期,图2为线虫卵晚期分裂期。
图1 线虫卵早期分裂期
图2 线虫卵晚期分裂期
4 讨论
本试验采用饱和盐水漂浮法进行测定,其原理是应用比重较虫卵大的溶液作为漂浮液,使虫卵或卵囊等漂浮于液体表面,以便于收集。该法的优点是操作简便,特别是对大多数的线虫卵及球虫卵囊等比重较轻的虫卵,本办法具有特别的效果,检出率很高。因此,在兽医预防和诊断的工作中应用十分广泛。缺点是对比重较大的虫卵(如吸虫卵、棘头虫卵)的检出效果很差。
另外,供检粪便必须是新鲜的,否则因虫卵发育或变形而不易鉴别,还必须是该病畜的粪便,有时可由直肠直接采取。粪便应在装粪的容器或纸包上注明号数或畜名,以免混淆。检查前应先注意观察粪便的颜色、稠度、气味、黏液多少、有无血液及饲料消化程度等,以供综合判断病性。检测过程中还应注意观察有无蝇蛆、线虫或绦虫节片等,以免影响试验结果。而且镜检时,所看的视野要有一定顺序的移动,以免漏检视野,造成诊断失误。
总之,寄生虫的种类很多,在检测时根据情况采取不同的方法,严格做好肉牛养殖中寄生虫病的预防工作。
[1]孙涛,包广玲,胡成栋,等.畜禽粪便内虫卵检查法[J].兽医卫生,2016(6):35.
[2]侯宏艳,惠文巧,赵瑞宏,等.山羊粪便寄生虫卵的检测[J].安徽农业科学,2014(27):9368-9369,9486.