中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡生理机能、免疫抗氧化性能的影响

高 凯，李晓东，王 震，韩东魁，姜 洋，张 敏

（延边大学农学院，吉林延吉 133002）

随着生活水平的提高，人们对畜禽产品品质的要求越来越高，新型绿色饲料添加剂的开发应用越来越受到重视。中药添加剂是一种可代替抗生素的绿色无残留的新型饲料添加剂，可提高鸡的采食量和消化率，促进其免疫器官的发育[1-2]。而硫磺负离子制剂不仅能提高蛋鸡血液中免疫球蛋白的含量，改善蛋鸡的抗氧化性能，还可促进蛋鸡对日粮中氮、磷的吸收，降低排泄物对环境的污染[3-4]。复合制剂中的有机硒由乳酸菌发酵富集Na2SeO3制得，有机锗是由酵母菌发酵富集GeO2制得。有机硒比无机硒更易吸收、毒性更低、效果更好[5]，有试验证实，在蛋鸡日粮中添加富硒乳酸菌可提高鸡蛋品质和血清IgG含量，改善抗氧化酶活性[6]。Čobanová等[7]在绵羊日粮中添加Na2SeO3和酵母硒，发现2种补硒饲料都可提高血液和组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性，提高吞噬细胞活性，但酵母硒补硒饲料能显著提高肝脏和回肠黏膜的硫氧还原蛋白还原酶活性，降低肝脏和十二指肠黏膜中的丙二醛（MDA）含量。有机锗具有提高机体抵抗力、刺激组织细胞再生功能、消除氧化自由基等生理特性[8]，且在家禽生产中的应用较为普遍。前人研究表明，在降低蛋鸡血脂和提高生产性能方面，有机锗的作用效果明显优于无机锗[9-11]。酵母和乳酸菌培养物还具有酵母菌和乳酸菌自身物质及其代谢产物与未知生长因子，因此在提高蛋鸡的生产性能和鸡蛋品质、改善蛋鸡肠道菌群平衡方面起到了积极的作用[12-15]。本试验在前人研究的基础上使用0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂研究其对蛋鸡生理机能及免疫抗氧化性能的影响，为该添加剂的推广提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 中药负离子硒锗复合生物制剂由延边大学饲料研究所提供，由中药制剂、硫磺负离子制剂、乳酸硒和酵母锗按照科学配比混合制成。中药制剂是将红枣、山药、神曲粉碎后，按科学比例混合制成；硫磺负离子制剂是通过对硫磺矿物粉、电气石粉等进行特殊加工制成；乳酸硒[16]是由乳酸菌富集发酵Na2SeO3，经低温（65℃）烘干后，粉碎（150目）制成，经检测有机硒含量为7.46 mg/L。酵母锗[17]是由啤酒酵母富集发酵GeO2，经低温（65℃）烘干后，粉碎（150目）制成，经检测有机锗含量为11.83 mg/kg。

表1 基础日粮组成及营养成分

1.2 试验设计与饲养管理 选取200只28周龄的健康海兰褐蛋鸡，随机分成2组，每组100只鸡，4个重复，每个重复25只，对照组饲喂基础日粮，试验组饲喂基础日粮+0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂。预试期7 d，正试期42 d，共49 d。

试验蛋鸡进行阶梯式笼养，试验开始前对鸡舍进行彻底的清扫和严格的消毒。鸡舍采取自然通风和机械通风相结合，保证空气清新流动，降低有害气体、粉尘浓度。保证舍温25℃左右、湿度75%左右、光照16 h。每天06:00和18:00进行饲喂，保证蛋鸡自由饮水与采食。同时按照计划进行常规免疫，也要避免各种因素刺激产生应激反应，影响试验结果。

1.3 试验样品的采集与测定 饲养试验结束后，每组每个重复随机选取5只鸡，空腹12 h后，用一次性注射器进行翼下静脉采血，采血量为10 mL/只，注入普通采血管，静置4 h，用XYJ80-2型电动离心机（3 500 r/min、10 min）离心，分离出血清样，放在低温冰箱（-20℃）中保存。

生理机能指标中，血清总蛋白（TP）采用考马斯亮蓝法测定；白蛋白（ALB）采用溴甲酚绿法测定；球蛋白（GLO）=TP—ALB；血清尿素氮（BUN）采用二乙酰肟比色法测定；总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）采用单试剂GPO-PAP法测定；高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）采用双试剂直接法测定；谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶（GPT）采用紫外比色法测定。

免疫和抗氧化指标中，免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）采用免疫比浊法测定；超氧化物歧化酶（SOD）采用羟胺法测定；MDA采用TBA法测定；GSH-Px采用比色法测定。

以上指标测定所需试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，由北京华英生物技术研究所完成检测。

1.4 统计分析 数据采用SPSS20.0软件处理，差异显著性检验采用单因素方差分析，并进行独立性T检验分析，统计结果以平均值±标准差表示，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。

2 结 果

2.1 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液含氮物的影响 由表2可知，试验组的血清TP含量略高于对照组（P＞0.05）；ALB含量与ALB/GLO分别比对照组显著升高了8.33%、11.11%（P＜0.05）；血清中的BUN与对照组差异不显著(P＞0.05)。

表2 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液含氮物的影响

2.2 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液脂类影响 由表3可知，与对照组相比，试验组TC含量显著下降了8.68%（P＜0.05），HDL含量显著升高了8.24%（P＜0.05）。试验组TG和LDL含量低于对照组（P＞0.05）。

表3 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液脂类影响mmol/L

2.3 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液转氨酶的影响 由表4可知，试验组GOT、GPT与对照组无显著差异（P＞0.05）。

表4 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液转氨酶的影响 IU/L

2.4 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液中免疫球蛋白的影响 由表5可知，试验组血清IgG含量比对照组显著升高了4.89%（P＜0.05）；而IgM、IgA在2组间差异不显著（P＞0.05）。

表5 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液中免疫球蛋白的影响 g/L

2.5 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液中抗氧化酶的影响 由表6可知，与对照组相比，试验组血清SOD和GSH-Px活性分别极显著升高了23.49%、17.82%（P＜0.01）；血清MDA含量极显著下降了32.08%（P＜0.01）。

表6 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血液中抗氧化酶的影响

3 讨 论

3.1 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡生理机能的影响 血清TP包括血清GLO和血清ALB。血清GLO由免疫系统刺激淋巴产生，可以清除体内病菌。血清ALB由动物肝脏合成，具有运输养分、修补组织、维持血液胶体渗透压等作用。血清BUN主要由肝脏合成，经肾脏排泄。血清BUN含量表示蛋鸡对含氮物的代谢水平以及沉积蛋白质的能力，间接影响鸡蛋的品质，反映蛋鸡肝脏和肾功能的健全与否。乳酸菌和酵母菌菌体及其代谢产物可改善蛋鸡肠道微生物环境，而有机硒、有机锗和中药负离子成分可增强肝功能，且中药中的红枣具有明显的安神抗应激功能，山药和神曲提高脾胃的消化功能，因此复合制剂可通过有效地调节蛋鸡消化系统，促进蛋鸡对饲料蛋白的吸收利用，提高蛋鸡对蛋白质的代谢水平[18-20]。本试验中，添加0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂可提高血清TP、血清ALB与ALB/GLO，血清BUN的含量有降低趋势，不会对蛋鸡肝脏及肾脏产生不良影响。

血浆中TG是主要的能源物质，可为蛋鸡机体提供必需脂肪酸，具有运输养分的功能，能促进蛋鸡体内脂溶性维生素的吸收利用，同时也是构成血浆脂蛋白的成分。胆固醇在蛋鸡机体中广泛存在，是细胞膜的重要构成因素，可以增强细胞膜韧性，维护细胞正常生理功能；同时胆固醇是合成胆汁酸的重要原料，可维护蛋鸡肝功能。内源性胆固醇酯和内源性胆固醇磷脂都由肝细胞和组织细胞水解，但LDL转运内源胆固醇酯通过细胞膜上的受体介导进入组织细胞，速度较慢容易沉积，HDL转运内源性胆固醇磷脂直接进入肝细胞内，转运速度较快，具有清理血液中胆固醇的功能[21]。本试验中，添加0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂显著降低了蛋鸡的血清TC，TG也有下降趋势，说明该制剂具有促进蛋鸡机体脂质代谢，降低蛋鸡血液胆固醇的功能。但添加0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂显著提高了蛋鸡血清HDL含量，有降低蛋鸡血清LDL含量的趋势，与王佳艺等[3]、王慧明等[22]报道的硫磺负离子可以降低动物机体血清HDL和血清LDL含量有所不同，这可能是由于复合物制剂中的有机硒、有机锗促进了蛋鸡机体脂代谢，刺激机体分泌HDL，使其在血液中的含量增加，由于蛋鸡体脂代谢较为复杂，具体机理还需进一步研究。

GOT与GPT主要存在于肝脏的组织细胞中，在肝细胞受损时释放入血中，肝脏病变会引起GOT与GPT活力明显升高，因此蛋鸡血清中GOT和GPT活力高低可以反映肝脏是否受损[23]。本试验中，蛋鸡日粮中添加0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡血清GOT和GPT含量没有显著影响，表明该复合制剂不会对蛋鸡肝脏造成不良影响。

3.2 中药负离子硒锗复合生物制剂对蛋鸡免疫和抗氧化性能的影响 血清IgG是血液主要抗体，可以通过抑制和中和作用以及补体结合杀灭多种病毒和微生物，因此血清IgG含量可以代表蛋鸡的免疫水平。血清IgM是免疫反应的早期抗体，在抵抗微生物方面具有高效能，对革兰阴性菌杀菌能力极强。血清IgA含量仅次于血清IgG，血清型IgA可结合抗原，清除体内毒素，分泌型IgA主要存在于体液（如初乳）和黏膜（如胃肠道黏膜）中。本试验中，蛋鸡日粮中添加0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂可以显著提高蛋鸡血清IgG含量，主要是复合制剂中的有机硒和有机锗刺激蛋鸡相关免疫器官的浆细胞产生，提高了血清中免疫球蛋白含量[24-25]，此外酵母和乳酸菌自身所含有的代谢产物与未知因子也起到了调节免疫的作用；但血清IgM与IgA含量基本无差异，可能与复合制剂添加量及IgA和IgM自身特性和体内分布有关，具体机制需进一步研究。

SOD具有强氧化性，可以清除蛋鸡体内细胞代谢产生的超氧阴离子自由基，降低自由基对蛋鸡机体的损伤。MDA是自由基膜脂过氧化的最终产物，作为一种氧自由基水平的指标。GSH-Px是动物机体内重要的抗氧化酶之一，其活力大小也反映机体含硒的水平。本试验中，蛋鸡日粮中添加0.5%中药负离子硒锗复合生物制剂，极显著提高血清SOD和血清GSH-Px活性，降低了血清MDA的含量，主要是由于复合生物制剂中的负离子成分结合了蛋鸡体内的超氧自由基，降低了机体内有害自由基的浓度，进而提高了蛋鸡自身的抗氧化性能。此外，复合制剂中所含的硒元素也具有很好的抗氧化能力[25]。

4 结 论

在蛋鸡基础日粮中添加0.5%的中药负离子硒锗复合生物制剂，可改善蛋鸡的生理机能，增强蛋鸡免疫力和抗氧化性能，且对蛋鸡肝脏无不良影响。

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