三七皂苷对硫化氢致豚鼠急性肺损伤的治病机制的研究

陶政华 刘洪铨

[摘要] 目的 观察三七皂苷（SAT）对豚鼠肺损伤的治疗作用并研究其作用机制。 方法 120只豚鼠随机分为T0组、TS组、SAT组、FS组。采用硫化氢制备豚鼠肺损伤模型，构模8 h后停止给药，乙醚麻醉动物，分别于7 h、14 h、21 h及24 h时间点观测其肺损伤程度及病理变化。 结果 在各时间点观察：SAT能有效降低SWW浓度及肺静脉高压，与T0组、TS组比较差异具有统计学意义（P<0.05）；但SAT与激素联合治疗效果差异并不明显，与FS组比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 SAT能有效抑制硫化氢引起的肺损伤进程。

[关键词] 三七总皂苷；硫化氢；急性肺损伤；肺静脉压

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）08-0032-03

Mechanism of panax notoginseng saponins on acute lung injury caused by hydrogen sulfide in guinea pigs

TAO Zhenghua LIU Hongquan

Hun'nan District Central Hospital of Shenyang City， Shenyang 110000， China

[Abstract] Objective To investigate the effective and mechanism of panax notoginseng saponins（SAT） on acute lung injury（ALI） caused by hydrogen sulfide in guinea pigs. Methods 120 guinea pigs were randomized into group T0， group TS， group SAT and group FS. The ALI model of guinea pigs was established by hydrogen sulfide. The drug was removed 8 hours after the model was established. The animals were anaesthetized by aether. The degree of lung injury and pathological changes were observed at 7th， 14th， 21st and 24th hour. Results Compared with group T0 and TS， SAT could decrease the level of SWW and high pulmonary venous pressure significantly at every time point（P<0.05）. However， compared with group FS， the effectiveness of SAT was not significantly different from that of combined treatment of hormone（P>0.05）. Conclusion SAT could inhibit the process of lung injury caused by hydrogen sulfide effectively.

[Key words] Total saponins of panax notoginseng； Hydrogen sulfide； Acute lung injury； Pulmonary venous pressure

三七（Pseudo-ginseng）作为一种重要中药材，得到临床广泛的应用，对其药理研究也被现在的中外学者不断论述，但是多都停留在分子前水平，通常为三七总皂苷（SAT）[1]。本实验即在此基础上探寻SAT对阻止一些急性损伤因素中所起的关鍵作用[2]。肺水肿常是某些损伤性疾病的前期症状，尽管病因多种，但病理基础基本相同[3]，实验中以硫化氢作为致模药物，选择豚鼠构造肺水肿模型[4]，实验前经过反复测试得出标准构模时间、标本重量、药物浓度等重要参数，实验证实三七皂苷应用于急性肺损伤治疗，能够有效降低肺静脉高压及SWW浓度，阻止急性肺水肿发展，为临床应用提供重要依据。

1材料与方法

1.1实验材料

1.1.1动物 健康雄性豚鼠：沈阳医学院动物模型中心Sy1703-S003组120只，体重310～350 g，平均340 g。

1.1.2构模材料 硫化氢（沈阳景泉特种气体厂，H2S，Q1000～07号）。

1.1.3实验药品、仪器、设备 见表1。

1.2 实验方法

①动物模型的构建：硫化氢（50 mL/L）密室200 m3，将豚鼠全部投放密室经8 h取出，进行乙醚罩吸麻醉，1.5%戊巴比妥钠注射液静脉加强麻醉。②分组：将120只构型豚鼠随机分成四组，每组30只，置于实验台连接实验设备、仪器。Ⅰ组对照组（T0组）：100 mL生理盐水肺静脉连续滴注；Ⅱ组（TS组）：5 mg地塞米松加生理盐水100 mL肺静脉连续滴注；Ⅲ组（SAT组）：生理盐水100 mL加三七皂苷0.25 g配制成浓度0.25%肺静脉连续滴注；Ⅳ组（FS组）：在SAT组基础上联合地塞米松5 mg肺静脉连续滴注，测量肺毛细血管静脉压（PCWP）值，记录肺毛细血管静脉压值、血氧饱和度（FIO2）值，各组于造模后7 h、14 h、21 h、24 h观察记录实验数据。

1.3指标检测及方法

观测体重变化，肺静脉压检压计测量PCWP，采用高效液相色谱泵测得硫化颗粒浓度，血生化仪测定FIO2浓度。

1.4统计学处理

应用Statistical Program for Social 17进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1各组豚鼠不同时间观测点肺组织硫化颗粒浓度的情况

观察每个时间观测点，SAT组降低SWW浓度作用明显，与T0组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。SAT加入地塞米松SWW浓度变化并不明显，与FS组比较差异无统计学意义（P>0.05），TS组与T0组比较降低SWW浓度明显，两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.2三七皂苷对急性肺损伤的影响

实验24 h时，对四组动物比较体重变化，SWW、PCWP、FIO2等指标综合比较，SAT组抗损伤作用明显，与T0、TS组比较差异具有统计学意义（P<0.01）。SAT加入地塞米松效果并无明显差异，与FS组比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。

3 讨论

急性肺损伤是包括肺组织损伤、黏膜渗出、炎性颗粒沉积、基底膜充血等一系列病理综合性反应[5]。临床上每年都会有很多误吸，或中毒患者就诊，如何快速缓解呼吸窘迫症状成为治疗的关键。产生肺损伤机制如下：（1）外部因素，由于组织损伤，炎性渗出，发生低氧、缺血情况，进而肺静脉压增高[6]，在此基础上极易发生心功能下降，结果造成损伤区域的供血障碍。（2）内部因素，由于凝血因子受到SWW对造血系统的影响，凝血因子明显减少，诱发出凝血时的延长，极易发生DIC[7]。（3）介子因素，金属蛋白酶-2是分解-SS-键的关键酶，早期损伤，该酶活性降低，随着SWW浓度增加，炎性颗粒易于沉积肺间质结构中，同时SWW也可以直接破坏肺部的组织结构，炎性颗粒与SWW共同加重组织的损伤[8]。所以，肺毛细血管静脉压增高，SWW浓度增加是产生肺损伤的两个关键因素[9]，对于阻断这两个因素在肺损伤中所起的作用在临床被广泛研究，但主要是停留在激素对抗机体应激反应的方面，虽然激素有一定的治疗作用，但总得效果并不满意。基于这种情况，此次研究以豚鼠为实验対像，探寻三七皂苷治疗急性肺损伤上取得的进展。实验中SAT具有降低硫化颗粒浓度、阻止肺损伤加重作用，与T0组比较有统计学意义（P<0.01）。同时对各组动物模型体重变化、SSW浓度、PCWP、FIO2等综合指标进行观察，SAT除具有明显抗损伤、降低SWW浓度作用，同时也具有类激素作用。其抗水肿作用与地塞米松基本相似，能抑制水肿特定因子的产生[10]，同时激活 TGF-β1[11]，并通过TGF-β1表达抑制炎性细胞进入气道上皮[12]。当阻断因素SAT介入[13]，可避免细胞凋亡因子失衡[14]，损伤减轻，达到治疗目的。

结论，SAT中保留三七生药中多种有效成分单体皂苷[15]，在中医领域三七皂苷多应用于损伤性疾病的治疗，其有活血化瘀作用，可以明显消除组织水肿。三七皂苷除抗水肿外，亦可以抑制SWW形成，减轻其对肺上皮细胞基底膜的损伤，SAT有较强的活化血小板作用，如果早期应用可以使血小板活性增加，对损伤区毛细血管早期凝血有很好的作用，使出凝血时维持在一个平衡的水平。同时SAT 存在类内源性抗凝活性，使损伤区域微毛细血管开放形成有效循环，降低肺静脉高压，肺部微循环得到有效改善，加速機体组织对损伤的修复，增强机体抗损伤的作用，综合效果优于激素。所以三七皂苷在急性肺损伤治疗方面起着重要作用。

[参考文献]

[1] 李华，谭炳仁.三七粉防治损伤性疾病中的作用机制探讨[J].职业与健康，2015，（12）： 1611-1613.

[2] Sehgal I，Thompson TC. Novel regulation of type Ⅳ collagenase（matrix metalloproteinase-9 and-2）activities by transforming growth factor-β1 in human prostate cancer cell lines[J]. Molecular Biology of the Cell，2016，10（2）：407-416.

[3] 陈轶群，李军.各种动物模型的构模与实验研究进展[J].中国中医急症，2015，21（4）： 605-607.

[4] 张震宇，陈明.三七总皂苷改善大鼠损伤模型氧化应激的研究[J].中国医药杂志，2014，34（1）：56-61.

[5] 陈英. 三七总甙的药理研究及临床应用进展[J]. 广西医学，2016，20（6）： 1109-1112.

[6] 朱鹏程，黄楚泉.急性肺水肿36例临床分析[J].岭南急诊医学杂志，2007，12（6）：101-103.

[7] 徐卫华，金丹群，沈杨.32例小儿急性肺水肿临床分析[J].安徽医学，2010，6（31）：53-54.

[8] 冯益真，张瑞凤，谢荣银，等. 实用小儿呼吸病学[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，2015：63-64.

[9] 蔡栩栩，刘春峰.神经源性肺水肿[J]. 山东医学，2017， 14（2）：106-108.

[10] 杨藻宸.药理学总论[M].北京：人民卫生出版社，2015：43-47.

[11] 杨宗梅，赵晓霞.妊娠期急性肺水肿的临床探讨[J]. 疑难病杂志，2017，5（8）：12-15.

[12] 周淑佩，郑振辉. 人类疾病动物模型的管理要点[J].中华医学科研管理杂志，2015，25（2）：129-130.

[13] 王耀宏，赵金垣，崔书杰，等.急性硫化氢中毒迟发性脑病的动物模型制备研究[J].中国职业医学，2015，31（1）：5-10.

[14] 郭晓红，张肇玖，张晓冬，等.大鼠急性肺损伤模型建立的实验研究[J].中国药物滥用防治杂志，2016，18（1）：32-35.

[15] 徐萍.现代毒理医学[M].上海：上海医科大学出版社，2017：25-42.

（收稿日期：2017-12-10）