青海牦牛牛病毒性腹泻的血清学调查

朱 玲 青海省祁连县野牛沟乡畜牧兽医站 810499

牛病毒性腹泻（Bovine viral diarrhea，BVD）是由牛病毒性腹泻病毒 （Bovine viral diarrhea virus，BVDV）引起牛的一种急性、热性传染病[1]，牛感染BVDV后主要表现为腹泻，进行性消瘦，脱水，严重的可引起死亡[2]。BVDV可以导致免疫耐受和免疫抑制，母畜流产和奶牛产奶量下降，以及生产性能下降，每年都给全球养牛业造成巨大的经济损失[3-4]。近几年来，我国BVDV的感染情况日益严重，为了掌握青海牦牛BVDV的感染情况，为青海牦牛BVDV的综合防控提供参考依据，本研究对采集于青海省6个规模牦牛饲养场和11户散养户的559份血清样品进行了ELISA抗体检测。现将整个试验过程介绍如下。

1 材料和方法

（1）血清样品来源。2017年3～12月，采集于青海省6个规模牦牛饲养场和11户散养户的血清样品共计559份。

（2）试剂与仪器。牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒为美国IDEXX公司产品；ELx800酶标仪为美国BIOtek公司产品。

（3）检测方法。按照牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书操作，首先在96孔酶标板每个孔加入100μL样品稀释液，之后在检测孔加入25μL血清样品，在阳性对照孔和阴性对照孔中各加入25μL阳性和阴性对照血清，加完后在室温下作用90分钟，之后弃去酶标板液体，每孔加入300μL洗液洗5次，最后一次洗完拍干。在每个酶标孔加入100μL酶标抗体，室温下作用30分钟，之后弃去酶标板液体，每孔加入300μL洗液洗5次，最后一次洗完拍干。每孔加入100μL TMB底物，室温下避光10分钟H欧诺个显色，之后每孔加入100μL终止液终止反应，酶标仪在450nm波长读数，记录分析检测结果。

（4）结果判定。按照牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书要求，阴性对照平均值≤0.25，阳性对照平均值-阴性对照平均值≥0.15，试验结果成立，计算检测血清样品的S/P值。公式为S/P=样品OD值-阴性平均OD值/阳性平均OD值-阴性平均OD值。S/P≥0.3，检测样品为阳性；S/P＜0.2， 检测样品为阴性；0.2≤S/P＜0.3，检测样品为可疑；可疑样品需要重新检测。

2 结果和分析

试验结果显示，6个规模养殖场和11户散养户均存在BVDV抗体阳性牛，阳性率达100%。共计检测559份样品，阳性样品为202份，平均阳性率为36.14%。其中，6个规模牦牛场的BVDV血清抗体阳性率最高的为47.27%，最低的为16.67%，平均阳性率为34.19%。11户散养户的BVDV血清抗体阳性率最高的为57.89%，最低的为27.78%，平均阳性率为39.42%。散养户与规模牛场相比，无论是最高阳性率还是最低阳性率都高于规模牛场，其中散养户的平均阳性率较规模养牛场高5.23个百分点。因采集血清样品的牦牛养殖场和散养户均未免疫过BVDV疫苗，该抗体阳性表明均由BVDV野毒感染所致。

3 讨论

BVDV是牛群普遍易感的疾病，也是危害养牛业最主重的疾病之一，BVDV抗体普查具有十分重要的意义，通过BVDV抗体普查可以了解牛群BVDV感染情况，由于本病的临床症状不明显，有时还不表现临床症状，在实际生产中常常不易诊断。从青海牦牛的血清BVDV抗体检测结果可以看出，559份血清样品的平均阳性率为36.14%，规模牦牛场的阳性率为34.19%，散养户的阳性率为39.42%，散养户的平均阳性率较规模牛场高5.23个百分点，说明青海牦牛存在严重的BVDV污染，尤其是散养户牛的感染状况更为严重。BVDV感染后可以引起本病在牛群中潜伏感染，也可以引起免疫抑制，虽然牛暂时不发病，但在受到应激刺激或遇恶劣气候时，就可以引发病毒性腹泻的急性感染。建议根据检测结果对牛群进行净化处理，将BVDV抗体阳性的牛逐渐淘汰，更不能留作种用。

BVDV在牛群中的潜伏感染状况常常导致本病很难净化，本病可以通过母牛垂直传播，感染BVDV的母牛会出现产死胎及弱仔现象，严重影响规模养牛场的发展。随着BVDV在我国感染情况的日益严重，各大养牛场都应该对本病引起重视。对BVDV的防治需做到以下几点。首先要加强对新购牛的检疫，最好坚持自繁自养，对引进的犊牛一定要做好BVDV抗体检测工作，只有血清抗体检测显示阴性的方可引进。防治BVDV最有效的手段就是牛群BVDV净化，逐步淘汰阳性牛。其次，加强饲养管理，经常消毒，保持良好的环境卫生。及时清理粪便，保持牛舍通风良好。本病重在预防，发病后目前主要采取对症治疗、及时补液防止脱水等措施。