儿童感染性肺炎患者血液中炎症因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受体检测与临床意义分析*

孙　林，胡三强，宋传涛　

(连云港市妇幼保健院检验科，江苏连云港　222000)

感染性肺炎是临床儿科常见的呼吸系统感染性疾病，当儿童免疫力降低时，可由细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体、真菌和寄生虫等入侵肺部引起炎症反应，以支原体、病毒、细菌的感染为主。调查研究显示[1]，支原体感染在感染性肺炎所占比重可达到56.1%，病毒性感染可占14.9%，细菌性感染则占12.0%。该病的早期临床特征以发烧、咳嗽、多痰、胸痛等为主，若诊断或治疗不及时，便会出现气喘、呼吸急促等，严重时可危及生命[2]，所以该病的早期准确诊断及预防显得尤为重要。目前，感染性肺炎的诊断方法以胸部X线结合纤维支气管镜检查为主，但是有效检出率受到限制。若能从疾病的病因及发病机制检测角度着手，将在一定程度上提高疾病的检出率[3]。由于感染性肺炎是以炎症为病理特征的疾病，故患者在发病时，其机体内炎症介质的水平会发生变化，如肿瘤坏死因子(TNF- α)及白细胞介素(IL)等[4，5]。另外，关于肺炎病原体诊断的方法报道有限[6，7]，因此，本研究选择感染性肺炎患儿为研究对象，按照其感染的病原菌类型差异，分为病毒感染组、支原体感染组及细菌感染组，同时选择30例健康儿童作为对照组，测定各组受试者血液中嗜酸性粒细胞(EOS)数量、TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)、免疫球蛋白E(IgE)、血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF- R1和VEGF- R2的水平，以期为感染性肺炎的诊断提供一定的参考。

1　材料与方法

1.1研究对象选择2016年3月～2017年3月来连云港市妇幼保健院就诊的80例感染性肺炎患儿，符合《儿科学》中感染性肺炎的诊断标准，且经过影像学检查未发现心、肝、脾、肾等其他器质性病变。将这些患儿纳入观察组，其中男性42例，女性38例，年龄1～14岁，平均年龄6.31±2.74岁，病程2～22天，平均病程8.45±3.75天。观察组患儿经病原微生物检查后，根据病原菌的差异[8]，将肺炎患儿的感染类型分为病毒感染、支原体感染及细菌感染。支原体感染组患儿31例，男性16例，女性15例，年龄1～12岁，平均年龄6.15±2.18岁，病程3～21天，平均病程8.23±3.92天；病毒感染组患儿27例，男性14例，女性13例，年龄1～13岁，平均年龄5.95±2.88岁，病程2～19天，平均病程7.89±3.46天；细菌感染组患儿22例，男性11例，女性11例，年龄2～14岁，平均年龄6.84±2.21岁，病程4～22天，平均病程9.23±3.57天。选择30例健康的儿童作为对照组，男性16例，女性14例，年龄1～14岁，平均年龄6.39±2.93岁。各组受试儿童一般资料之间的差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2试剂和仪器全自动血细胞分析仪为迈瑞BC5380，试剂由迈瑞公司提供；TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2试剂盒均购自南京建成生物科技有限公司。

1.3方法对照组和观察组的所有受试儿童在夜间空腹8 h后，由医护人员统一由同侧手臂抽取静脉血2 ml于含抗凝剂EDTA- K2的洁净试管中，采用全自动血细胞分析仪测定其中EOS数量。另外抽取6 ml静脉血于10 ml无抗凝剂的洁净试管中，常温静置1.5 h后，分批置于离心机中，3 000 r/min 4℃下离心10 min，将上层血清取出于洁净试管中保存。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2的水平，采用免疫散射比浊法测定血清中IgE的水平。各相关实验操作严格按照各自试剂盒中提供的说明书进行。

2　结果

2.1观察组和对照组血液中炎症因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受体检测见表1。观察组患者血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，EOS，ECP，IgE，VEGF，VEGF- R1和VEGF- R2的水平均显著高于对照组，两组差异有统计学意义(t=2.325～3.593，均P<0.05)。

表1 观察组和对照组血液中炎症因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受体检测结果

2.2支原体感染组、病毒感染组和细菌感染组血液中炎症因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受体检测见表2。

表2 支原体感染组、病毒感染组和细菌感染组血液中炎症因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受体检测结果

支原体感染组及病毒感染组患者血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，VEGF的水平显著高于细菌感染组，差异具有统计学意义(P<0.05)，支原体感染组患者血清中VEGF- R1，VEGF- R2的水平显著高于细菌感染组，差异具有统计学意义(P<0.05)。病毒感染组患者血清中TNF- α的水平显著高于支原体感染组(P<0.05)，IL- 5，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2的水平显著低于支原体感染组，差异具有统计学意义(P<0.05)。

3　讨论

感染性肺炎为儿童呼吸道常见的感染性疾病，按照感染的病原体类型，将该疾病分为支原体感染性肺炎、病毒感染性肺炎及细菌感染性肺炎。支原体、病毒和细菌等微生物都可以通过呼吸进入机体肺部，刺激机体内的单核细胞、淋巴细胞、巨噬细胞，使机体内细胞免疫功能异常，从而释放多种细胞因子，使血液中各因子的水平发生变化，导致机体正常生理功能失衡，最终引发肺部的一系列炎症反应。近年来越来越多的研究发现[9]，细胞免疫及体液免疫与感染性肺炎的发生和发展密切相关，特别是白细胞介素、TNF- α，VEGF等细胞因子。

白细胞介素是由多种细胞释放，并且可同时作用于多种细胞的一类细胞因子，其在炎症反应的发生和进程中起着至关重要的作用。IL- 5主要由Th2辅助细胞分泌，可参与过敏反应，并促进EOS的生长与分化。IL- 5与感染性肺炎相关的少量研究指出[10]，IL- 5在支原体感染性肺炎患者血清中的浓度较健康者高。另外，还有一项研究发现[11]，IL- 5在细菌感染性肺炎患者血清中的水平比支原体感染患者高，说明IL- 5可能是判别细菌感染性肺炎与支原体感染性肺炎重要的炎症因子，本研究中的结果与该报道一致。IL- 6是免疫调节早期起作用的细胞因子，在单核巨噬细胞及T细胞受到刺激活化后，其分泌增加，进而促进B细胞分泌抗体。李新玲等[12]的研究显示，慢性阻塞性肺疾病患者血清中IL- 6的浓度升高，且在伴随肺炎衣原体感染的患者血清中的水平更高，由此说明，IL- 6可能作为感染性肺炎的标志性炎症因子。IL- 8属于超趋化因子家族的成员之一，可在一定程度上调控中性粒细胞的功能。陈棉等[4]研究显示，支原体感染性患者血清中IL- 8浓度的高低反映了该疾病的严重程度。TNF- α可以促进B细胞的增殖与分化及免疫球蛋白的分泌，增加血管的通透性，使炎症反应加剧，从而加重肺部损伤。有文献表明[13]，血清中TNF- α的水平高低与肺炎患儿病情的严重程度密切相关。VEGF为血管通透因子，与TNF- α的部分生理作用相似，其在机体内水平升高后可以使得血管通透性增强，从而加剧肺部炎症反应，其在肺炎的诊断中具有重要的意义[14]。血清IgE为分泌型免疫球蛋白，可以由鼻咽与支气管黏膜中的浆细胞分泌，继而引发变态反应。朱湘芸等[15]研究显示，支气管哮喘患儿血清中IgE的水平会显著升高，但是在伴随着支原体感染性肺炎患者血清中更高，说明血清中IgE水平的高低与感染性肺炎有着一定的联系，可能作为感染性肺炎的鉴别指标。

本研究结果显示，感染性肺炎患儿血液中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2，EOS及IgE的水平显著高于健康儿童(P<0.05)，且在三种病原体感染中，细菌感染组患儿血清中的TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8水平显著高于病毒感染组及支原体感染组(P<0.05)，支原体感染组患儿血清中的VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2水平则显著高于细菌感染组与病毒感染组(P<0.05)。由此说明TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，EOS，VEGF及IgE参与了感染性肺炎发病的作用机制，且血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8及VEGF的水平高低有助于感染性肺炎患儿病原体的判断。

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