IFN-γ、TNF-α、降钙素原和C-反应蛋白水平在细菌性脑膜炎早期诊断中的意义

易继涛，王从平，贾敏

细菌性脑膜炎（bacterial meningitis，BM）是一类常见的感染性中枢神经系统疾病，其发病及进展十分迅速，可引起较多的并发症和较高的病死率，是严重威胁患者健康的危险疾病之一[1,2]。早期快速诊断和及时治疗是降低BM患者致死率和致残率的重要手段。由于BM患者的临床体征并不明显，因此，临床上主要依据脑脊液检查结果诊断和判定BM的进展情况[2,3]。然而血常规、白细胞计数和细菌培养等常规的生化血液学检测在BM和病毒性脑膜炎（viral meningitis，VM）之间的诊断具有一定的重叠性，临床鉴别及实验室参考诊断指标具有一定的相似性，因此，多项指标的联合检测对于诊断BM具有重要的作用[4,5]。干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、降钙素原（procalcitonin，PCT）和 C-反应蛋白（C-reactive protein，CRP）均为常用的临床检测患者体内感染效应和炎症反应的细胞炎性指标[4-6]，本文主要通过检测BM患者血液和脑脊液中 IFN-γ、TNF-α、PCT 和 CRP 的含量表达变化，以探讨其联合检测在BM的临床诊断、与VM的区别和BM疾病进展的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年9月至2016年12月本院收治的BM患者30例为BM组，VM患者30例为VM组，同时选取健康体检者30例为健康对照组。①健康对照组，男 16例，女 14例；年龄（35.66±2.01）岁；体质量（63.11±2.32）kg；②BM组，男 18例，女 12例；年龄（35.71±1.86）岁；体质量（61.67±2.19）kg；发热14例，头痛、呕吐8例，烦躁、嗜睡6例，意识障碍2例；③VM组，男19例，女11例；年龄（35.89±1.72）岁；体质量（62.35±2.04）kg；发热5例，头痛、呕吐2例，烦躁、嗜睡3例，意识障碍0例。3组一般资料比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。患者诊断标准符合2016年《ESCMID指南：急性细菌性脑膜炎的诊断和治疗》BM、VM的诊断标准[7]。本研究经本院伦理委员会批准，患者经家属同意签署知情同意书。

1.2 方法

VM、BM组分别于入院当天，通过腰椎穿刺和脑室引流方法采集脑脊液标本5 mL，低温离心4 000 rpm 5 min，留取上清液待测；同时采取3组清晨空腹静脉血5 mL，低温离心2 000 rpm 15 min，常规分离血清血浆，备用进行细胞因子的检测。采用双抗夹心免疫荧光发光法检测患者脑脊液和血清PCT水平，仪器为法国生物梅里埃公司全自动化荧光酶标系统。采用免疫荧光分析仪检测患者脑脊液和血清内CRP含量，仪器和试剂盒为韩国i-CHROMA公司；采用酶联免疫吸附法（Elisa）测定患者脑脊液和血清内IFN-γ和TNF-α含量，试剂盒为美国R&D公司。所有检测均严格按试剂盒的说明进行操作。

2）采用K-100型工程地质钻机按标出的孔位进行钻孔，精确度要求＜1%，在实施过程中也将根据现场情况进行孔位的适当调整。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 VM组、BM组脑脊液IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP含量表达比较

与VM组相比，BM组患者脑脊液IFN-γ含量增高，TNF-α、PCT和CRP含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 3组血液IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP含量表达比较

与健康对照组比较，BM组和VM组患者血液IFN-γ含量降低，TNF-α、PCT和CRP含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与VM组比较，BM组患者血液IFN-γ含量降低，TNF-α、PCT和CRP含量升高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

2.3 BM组患者脑脊液IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP单独检测与联合检测

BM组患者脑脊液内IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP四指标联合检测时，其灵敏度和特异性均显著高于IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP的单独检测，说明联合检测IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP有助于BM患者的临床诊断，见表3。

3 讨论

BM是一种严重的感染性脑部疾病，多发生于儿童，具有很高的后遗症率和致死率[1,2]。IFN-γ是由T细胞和NK细胞产生，具有重要的免疫调节作用，在病原体感染中发挥重要的抗性作用[8]。IFN-γ可以增强细胞的抗病毒和抗感染能力，并促进细胞免疫B细胞活化和产生MHC I类和II类分子抗体[9]。本研究发现，BM患者脑脊液和血液中的IFN-γ含量均下降，说明BM患者体内的炎症反应较VM患者严重，IFN-γ发挥主要的抗病毒作用。TNF-α是已知的介导机体感染、创伤和炎症反应的重要细胞因子，TNF-α不仅参与机体免疫系统的调节，且作为内源性致热原直接引起发热和细胞死亡[10]。BM患者脑脊液中TNF-α含量显著升高，而VM患者脑脊液内TNF-α含量无明显变化，说明脑脊液内TNF-α含量变化可能可作为鉴别诊断BM和VM的早期诊断指标。

表1 VM组和BM组脑脊液细胞因子含量比较（±s）

注：与VM组比较，①P＜0.05

组别VM组BM组例数30 30 IFN-γ/(pg/mL)17.61±1.38 3.12±1.03①TNF-α/(pg/mL)3.44±1.20 13.29±1.33①PCT/(ng/mL)8.04±1.47 11.72±1.53①CRP/(mg/L)4.27±0.85 6.82±0.96①

表2 3组血液细胞因子含量比较（±s）

表2 3组血液细胞因子含量比较（±s）

注：与健康对照组比较，①P＜0.05；与VM组比较，②P＜0.05

组别健康对照组VM组BM组例数30 30 30 IFN-γ/(pg/mL)19.44±1.68 14.61±1.45①4.87±1.17①②TNF-α/(pg/mL)3.59±1.04 14.52±2.07①25.48±2.43①②PCT/(ng/mL)0.37±0.04 5.78±1.12①9.16±1.23①②CRP/(mg/L)0.22±0.01 3.13±0.74①4.75±1.15①②

表3 患者脑脊液细胞因子单独检测与联合检测（%）

PCT和CRP均为较常用的机体炎性反应指标，具有出现早、敏感性高、特异性高等特点[11,12]。PCT和CRP在正常人体内血清及脑脊液的含量极低，稳定性良好，而当机体出现感染并发局部或全身炎症反应时，机体自身免疫功能明显下降，PCT和CRP含量被迅速释放入血，其含量在体内迅速升高，患者体内PCT和CRP会因病情加重而逐渐升高[11,12]。因此，PCT和CRP常用作检测患者机体感染和延展性疾病的诊断和监测，不仅对细菌性感染疾病的诊断和鉴别有很好的敏感性和特异性，而且对疾病的病情和严重程度具有有效的评估作用[13-15]。本研究通过检测颅内感染患者血浆和脑脊液中PCT和CRP含量变化发现，BM患者脑脊液和血液中PCT和CRP含量显著升高，其上升含量明显高于VM患者，说明PCT和CRP的异常表达可能也可作为鉴别诊断BM和VM的指标。

综上所述，及时检测BM血浆和脑脊液中IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP含量的表达变化可提示患者机体内的感染和炎症反应；IFN-γ、TNF-α、PCT和CRP的异常表达对于临床诊断与鉴别BM和VM具有重要的意义。

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