山东省部分地区猪场PRV疫苗免疫状况调查

（山东省聊城市畜牧兽医局，山东聊城 252000）

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 被检血清

本次试验抽取的110个样本猪场多为存栏母猪在50头份以下的中小规模猪场，试验用样本猪共429头份，其中已进行PRV疫苗免疫的猪为337头份，未进行PRV疫苗免疫的猪只为92头份；10月份66头份，11月份92头份，12月份81头份，2月份47头份，3月份143头份；青岛（包括平度）78头份，潍坊（包括高密、昌邑、安丘、临朐、青州）217头份，淄博（包括临淄）31头份，泰安（包括肥城）75头份，临沂（包括莒南）28头份；仔猪49头份，保育猪65头份，育肥猪36头份，后备母猪32头份，经产母猪227头份，种公猪20头份。

1.1.2 仪器设备

试验要用到GT10-1高速离心机，电炉，DHP-9162型电热恒温培养箱，单道、多道可调微量移液器，BCD-212HDA普通冰箱，分光光度计，DG5033A酶标仪。

1.1.3 检测试剂

PRV抗原包被的酶标板、辣根过氧化物酶（HRPO）标阳性对照血清、PRV抗体阴性对照血清、去离子水（本试验购自北京爱德士元亨生物科技有限公司的IDEXX试剂及试剂盒）。

1.2 检测方法

所有试剂在使用前先放入18℃～25℃恒温箱中恢复至室温。浓缩液用去离子水进行10倍稀释，被检样品血清用样品稀释液2倍稀释。

取出PRV抗原包被板，向A1、B1孔中加入100μl 2倍稀释阴性对照血清，C1、D1孔中加入100 μl 2倍稀释阳性对照血清，相应孔中加入100μl稀释样品。然后放到18℃～25℃恒温箱中孵育60 min。每孔用 300μl左右稀释洗涤液洗涤3～5次后入100 μl抗PRVgB酶标抗体。在恒温箱（18℃～25℃）中孵育20 min。每孔用300μl左右稀释洗涤液洗涤3～5次后加入100μlTMB底物溶液。在恒温箱（18℃～25℃）中孵育15 min。每孔加入50μl终止液终止反应。在650nm，A（650）下测量并记录样品的吸光值。

1.3 结果计算

本次试验使用的是IDEXX提供的计算方法。

1.3.1 试验有效条件

若阴性对照平均值减去阳性对照后的平均值大于0.300则结果有效，否则无效。

1.3.2 计算方法

阴性对照平均值=（A1 A（650）+B1 A（650））/2。

阳性对照平均值=（C1 A（650）+D1 A（650））/2。

对照比率S/N值=样本A（650）/阴性对照平均值。

2 结果

此110个猪场的8817头份猪中429头份猪的血样ELISA方法检测，阳性猪292头份，阴性猪137头份，阳性率为68.07 %；阳性猪场为95个，阴性猪场15个，阳性率为86.36 %。

2.1 不同免疫情况下抗体水平检测阴阳比例对照

已进行PRV疫苗免疫的猪为337头份，未进行PRV疫苗免疫的猪为92头份，免疫率达到78.55 %，如表1所示。

表1 不同免疫状况下抗体水平检测阴阳比例对照表

由表1分析可得示，在未进行免疫防护的猪中阳性率偏高，猪场的隐性感染率很高。在已进行免疫防护的猪中仍有1/4的没有得到有效的抗体保护，免疫效果不理想。

2.2 不同时间抗体水平检测阴阳比例对照

表2 不同时间抗体水平检测阴阳比例对照表

由表2分析可得，不同时间抗体水平有着明显的差异，在2017年的10、11、12，2018年的2、3这五个月份中抗体水平始终围绕68.07 %这条线上下波动，并无明显规律可循。但是11月和3月的波动范围相对较大，抗体水平不稳定，尤其在3月的中旬和下旬阳性率差值竟超过25 %，可能与多变的天气有关，要关注气候变化，及时防护。

2.3 不同地区猪场抗体水平检测阴阳比例对照

各地区的免疫状况各不相同，抗体水平存在差异，在潍坊以东和以北的地区免疫效果相对偏好一些，如青岛的平度、潍坊的昌邑、安丘、淄博的临淄等地抗体水平相对较高，临淄抗体阳性率达到了86.67 %，而临朐、青州、泰安的肥城、临沂的莒南等地抗体水平相对较低，应加强这几个地区的免疫程序。导致免疫效果差异的因素有：选择的疫苗不同或者是防疫与管理太过粗放等引起。

2.4 不同阶段猪场抗体水平检测阴阳比例对照

已产母猪的73.06%的阳性率效果还是比较理想的，后备母猪68.75%的阳性率较低于已产母猪，可加强此阶段的免疫防护。哺乳阶段仔猪通过从母体乳汁中获得抗体可减少发病概率，阳性率为71.43%，表明获得了有效的免疫保护。但是保育猪和育肥猪的阳性率分别为40.00%和30.56%，表明断奶后的商品猪免疫工作有明显的不足，这也加重了猪场伪狂犬病感染的概率。