鸡蛋花中萜类化合物的提取与解析

邓海冬，彭依婷，马金魁，覃　亮，曾　鹏

（肇庆学院 食品与制药工程学院，广东 肇庆　526061）

鸡蛋花，别称为大季花、鹿角花，散开呈螺旋状，作为广东著名的凉茶五花茶中的五花之一，是广东地区人们的习惯用药，具有清热解毒、止咳止泻的功效，常用于治疗中暑、痢疾、咳嗽、腹疼等疾病[1-3].从鸡蛋花中提取的主要有效成分有萜类、醛类、脂肪酸类等[4]，其中萜类化合物有良好的抗病杀菌作用，尤其对芽孢杆菌有很强的抑制效果，因此鸡蛋花中萜类物质的高效提取非常重要[5-8].

采用水蒸气蒸馏法提取鸡蛋花中有效成分，再应用GC-MS技术对所提取的物质进行成分分析，为鸡蛋花的研究和利用提供基础依据[9-11].

1　主要实验试剂与仪器

1.1　主要实验试剂

实验室自制蒸馏水，广州化学试剂厂生产的分析纯乙醇、乙酸乙酯.

1.2　主要实验仪器

龙腾ESJ.120-4电子天平、泰斯特FY135粉碎机、博迅YN-ZD10电热蒸馏水器、重庆吉祥1000 mL电热套、岛津QP2010气相色谱-质谱联用仪.

1.3　实验用鸡蛋花

肇庆市北岭山附近收集的鸡蛋花，为夹竹桃科鸡蛋花属.

2　实验操作方法

2.1　鸡蛋花成分的提取

称取100 g鸡蛋花，粉碎，装入圆底烧瓶中，加入适量蒸馏水，连接蒸馏装置，将1 mL乙酸乙酯加入挥发油提取器，用电热套进行加热沸腾5～6 h，停止加热.收集提取鸡蛋花的挥发油，用乙醇稀释定容至100 mL，再取1 mL用乙醇稀释定容至100 mL，备用.

2.2　仪器条件

色谱柱为RTX-5ms；载气为氦气；进样模式为分流，分离比为5：1；流量控制线速度为36.8 cm/s；柱箱以10℃/min从100℃升温到250℃，并保持10 min.

电离方式为EI；离子源温度和接口温度都为250℃；溶剂切除时间为2.5 min；电子的能量为70 eV.

3　实验结果与分析

3.1　水蒸气提取物结果分析

按照2.1方法提取，并通过2.2的仪器条件对提取液进行测定分析，所得色谱图如图1所示.

图1　水蒸汽蒸馏法提取物色谱图

由图1可见，近似于对称型正态分布的色谱峰超过20个，表明鸡蛋花水蒸气蒸馏法提取物中成分较多.其中10.505、13.417与18.472 min处色谱峰较大，可能是鸡蛋花提取物中的主要成分.

使用峰面积归一法对较大峰进行定量，结果见表1所示.

表1　水蒸气蒸馏提取物峰面积分析

由表1可见，鸡蛋花提取物中10.505、13.417与18.472 min处色谱峰占总峰面积的63.03%，其他色谱峰的峰面积皆在10%以下.挑选最大的3个色谱峰进行进一步的质谱分析.

3.2　萜类物质的质谱分析

3.2.1芳樟醇C10H18O

使用GCMSsolution工作站对图1所标注色谱峰的质谱图与NIST05谱库进行检索，芳樟醇的标准质谱图如图2a所示，图1中10.505 min处质谱图如图2b所示与芳樟醇的相似度为89.

从图2a芳樟醇的标准质谱图可知，芳樟醇的特征离子峰m/z 41、43、55、69、71、93与图2b实测样品中10.505 min的质谱一致，基峰均为m/z 71.m/z 41、43、55、69、71、93的相对丰度基本吻合，m/z 39、107、121、136等小峰在芳樟醇标准质谱图与实测质谱图中均有出现，可确定图1中10.505 min处色谱峰为芳樟醇.

图2　芳樟醇标准质谱图与10.505 min处质谱图

3.2.2香叶醇C10H18O

使用GCMSsolution工作站对图1所标注色谱峰的质谱图与NIST05谱库进行检索，香叶醇的标准质谱图如图3a所示，图1中13.417 min处质谱图如图3b所示与香叶醇的相似度为95.

图3　香叶醇标准质谱图与13.417 min处质谱图

从图3a香叶醇的标准质谱图可知，香叶醇的特征离子峰m/z 41、69与图3b实测样品中13.417 min的质谱基本一致，基峰均为m/z 69.m/z 41、69的相对丰度基本吻合，m/z 55、93、123、136等小峰在香叶醇标准质谱图与实测质谱图中均有出现，可确定图1中13.417 min处色谱峰是香叶醇.

3.2.3橙花叔醇C15H26O

使用GCMSsolution工作站对图1所标注色谱峰的质谱图与NIST05谱库进行检索，橙花叔醇的标准质谱图如图4a所示，图1中18.472 min处质谱图如图4b所示与橙花叔醇的相似度为94.

图4　橙花叔醇标准质谱图与18.472 min处质谱图

从图4a橙花叔醇的标准质谱图可知，橙花叔醇的特征离子峰m/z 41、43、69、71、93与图4b实测样品中18.472 min的质谱基本一致，基峰均为m/z 69.m/z 41、43、71、93的相对丰度基本吻合，m/z 107、123、136、189等小峰在橙花叔醇标准质谱图与实测质谱图中均有出现，可确定图1中18.472 min处色谱峰是橙花叔醇.

4　结论

对水蒸气蒸馏法所得鸡蛋花挥发油成分进行了分析，实验数据显示，挥发油中3种化合物色谱峰占总峰面积的63.03%，对这3种成分进行了质谱分析，根据NIST05谱库的标准质谱图确定了其化学成分，分别为芳樟醇、香叶醇与橙花叔醇，皆为萜类化合物.对芳樟醇、香叶醇与橙花叔醇3种萜类化合物的质谱进行了分析，为今后对鸡蛋花中萜类物质的研究和利用打下基础.

参考文献：

[1]高则睿,黄静,刘劲芸，等.鸡蛋花挥发性成分及药理作用研究进展[J].安徽农业科学,2012,40(19)：10067-10070.

[2]李颖,刘吉金,杨敏，等.GC-MS对鸡蛋花挥发油成分研究[J].天津药学,2006,18(4)：2-3.

[3]韩明.鸡蛋花精油提取及其成分分析[J].安徽农业科学,2007,35(20)：6100+6102.

[4]黄美燕,周光雄,金钱星，等.鸡蛋花挥发油化学成分的研究[J].安徽中医院学报,2005,24(4)：50-51.

[5]张丽霞,刘红星,陈今浩.鸡蛋花挥发油成分的提取及分析[J].化工技术与开发,2010,39(6)：39-40.

[6]邓仙梅,刘敬,谢文琼，等.凉茶常用药材鸡蛋花的研究进展[J].时珍国医国药,2014,25(1)：198-200.

[7]黄涛阳,翁燕君,黄和，等.不同来源鸡蛋花挥发性成分比较研究[J].中药材,2015,38(11)：2274-2276.

[8]彭勇,张友志,郭昌洪，等.鸡蛋花挥发油成分的GC-MS分析[J].中国药师,2013,16(7)：980-982.

[9]林丽珍.鸡蛋花的生药学研究[D].广州：广东药学院,2015.

[10]付佳,王洋,闫秀峰.萜类化合物的生理生态功能及经济价值[J].东北林业大学学报,2003,31(6)：59-62.

[11]高茜,向能军,王乃定，等.裂解气相色谱-质谱联用法对香叶醇的裂解产物分析[J].理化检验（化学分册）,2011,47(1)：27-29.