血清骨桥蛋白、癌胚抗原及CK18的表达对胃癌的诊断价值

邢　鑫，张自森，郭彦伟，王利娟，张红巧，郑晓珂，张　剑，王亚楠

郑州大学第五附属医院肿瘤内科 郑州 450052

胃癌患者早期症状和体征不明显，早期检出率比较低，大多数患者发现时已是中晚期。胃癌的早期诊断和治疗对延长胃癌患者的生存时间和提高其治愈率具有重要意义[1]。胃镜和钡餐检查难以在体检人群中广泛推广，因此肿瘤标志物在胃癌早期诊断中具有重要意义[2-3]。目前肿瘤标志物可用于胃癌的诊断和病情监测，但特异性和准确性仍不能令人满意。寻找灵敏度和特异性比较高的胃癌肿瘤标志物成为目前研究的热点。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)是一种广谱肿瘤标志物，在胃肠癌、乳腺癌、肺癌及其他恶性肿瘤患者的血清中均有升高，因此不能作为诊断某种恶性肿瘤的特异性指标，但在肿瘤的良恶性鉴别诊断、病情监测、疗效评价等方面仍有重要临床价值。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是具有多种功能的分泌型蛋白，在恶性肿瘤的侵袭和转移、新生血管生成和凋亡抑制方面发挥一定作用，有可能成为胃癌的诊断、治疗和预后监测的新指标[4-6]。细胞角蛋白18(cytokeratin18,CK18)是细胞角蛋白家族中的一种，是胃上皮性细胞恶变的标志之一[7-8]。本研究通过测定胃癌患者血清中OPN、CEA和CK18的表达情况，探讨3者单独及联合检测对胃癌的诊断和病情监测的应用价值。

1　对象与方法

1.1研究对象选择2015年1月至2016年12月郑州大学第五附属医院肿瘤内科收治的胃癌患者(80例)作为胃癌组，体检中心健康体检的健康者(80例)作为对照组，胃癌组患者年龄46～77(62.4±11.2)岁，男59例，女21例；对照组年龄45～75(61.8±10.4)岁，男52例，女28例，2组年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)，有可比性。排除标准：患有其他系统恶性肿瘤者，患有严重心肝肾等重要脏器疾病者，曾接受过手术或者放化疗治疗者，患有胃部其他疾病者，资料不完整者，拒绝参与试验者。纳入标准：胃癌组经病理证实为胃癌患者，对照组各项体检指标均正常。研究对象均资料完整，签署知情同意书。

1.2主要观察指标和检测方法检测两组血清OPN、CEA和CK18含量，血清OPN、CEA和CK18诊断胃癌的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积，血清OPN、CEA和CK18含量及其与胃癌患者病理特征的关系。健康体检者体检当天清晨空腹抽血，胃癌患者入院后第2天清晨空腹抽血。均抽取外周静脉血4 mL，离心后分离血清保存备用。血清OPN含量采用ELISA法测定，血清CEA含量采用电化学发光法测定，血清CK18含量采用化学发光法测定。OPN、CEA及CK18鉴别胃恶性肿瘤的临床检验诊断界点分别为：40 μg/L、4.3 μg/L和5.0 U/L。

1.3统计学处理采用SPSS 20.0进行分析，绘制ROC曲线，计算各指标诊断胃癌的灵敏度、特异度和ROC曲线下面积，应用t检验比较两组血清OPN、CEA和CK18含量的差异，应用t检验和单因素方差分析比较不同病理特征胃癌患者血清OPN、CEA和CK18水平的差异，检验水准α=0.05。

2　结果

2.1两组血清OPN、CEA和CK18含量比较见表1。

表1　两组血清OPN、CEA和CK18含量比较

2.2血清OPN、CEA和CK18诊断胃癌的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积比较见表2。由表2可知,两两联合指标诊断胃癌的ROC曲线下面积大于单独指标，三者联合诊断胃癌的ROC曲线下面积最大。随着联合指标的增多，诊断胃癌的灵敏度升高。

表2　血清OPN、CEA和CK18诊断胃癌的灵敏度、特异度及ROC曲线下面积比较

2.3血清OPN、CEA和CK18含量与胃癌病理特征的关系见表3。

表3　血清OPN、CEA和CK18含量和胃癌病理特征的关系

由表3可知，血清OPN、CEA和CK18含量与胃癌的临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05)，其中Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量明显高于Ⅰ+Ⅱ期胃癌患者(P<0.05)；有淋巴结转移胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量高于无淋巴结转移胃癌患者(P<0.05)。表明血清OPN、CEA和CK18含量与胃癌的严重程度和转移有关。

3　讨论

胃癌的发展一般经历5个阶段：正常胃黏膜阶段、浅表性胃炎阶段、萎缩性胃炎阶段、不典型增生阶段和胃癌阶段，在发展到胃癌阶段后相当长的一段时间内胃癌的转移速度比较慢，呈局限性发展。因此，胃癌的早期诊断和治疗对延长胃癌患者的生存时间和提高治愈率具有非常重要的意义[9]。血清肿瘤标志物的检查方法简单快捷，容易被患者接受，成为胃癌早期诊断的常用方法[10]。诊断胃癌比较常用的肿瘤标志物有CEA、CA19-9、CA72-4等[11-13]。但是，这些广谱肿瘤标志物不能作为诊断胃癌的特异性指标，探索和寻找诊断胃癌灵敏度高、特异性强的肿瘤标记物是胃癌研究的热点问题。

CEA是1965年由Gold和Freedman首先从结肠癌和胚胎组织中提取的一种肿瘤相关抗原，由存在于内胚层的细胞分化而来的癌症细胞表面抗原，是细胞膜的结构蛋白，其在多种恶性肿瘤的血清中均有升高。OPN是一种蛋白质，从骨基质中分离，广泛分布于多种组织和细胞中，OPN含有的RGD能够抑制细胞凋亡，促进细胞黏附和迁移，OPN还参与免疫调节、新生血管生成和钙代谢等。OPN和恶性肿瘤的关系也比较密切，与恶性肿瘤的转移和预后有关[14-15]：OPN水平下调，肿瘤细胞的凋亡增加、侵袭力下降；OPN水平越高，患者的预后越差。OPN在胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中表达量明显增加，在有转移的患者中表达升高，抑制OPN的表达能够抑制恶性肿瘤的转移[16-17]。CK18 在胃 癌、乳腺癌、结直肠癌等恶性肿瘤中作用的研究越来越多[18]。CK18主要反映上皮细胞的裂解和凋亡情况。化疗药导致的肿瘤细胞死亡主要由凋亡介导，因此检测与凋亡相关的肿瘤标志物CK18可能反映化疗药物的有效率，其有望成为更有临床价值的胃癌相关血清学标志物[19]。

本研究通过对胃癌患者血清中OPN、CEA及CK18的表达情况进行测定，探讨三者联合检测在胃癌诊断中的意义。结果发现：胃癌组患者血清OPN、CEA和CK18含量均高于对照组。Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量高于Ⅰ+Ⅱ期胃癌患者，有淋巴结转移胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量高于无淋巴结转移胃癌患者。ROC曲线下面积可以定量反应诊断方法的准确性，ROC曲线下面积越大诊断准确性越高。本研究发现OPN对胃癌的诊断准确性较CEA和CK18高，可以作为胃癌检测的指标，OPN和其他指标两两联合的诊断准确度高于单独OPN的诊断准确度，OPN和其他指标三联合的诊断准确度高于两两联合，表明OPN和其他指标联合能够提高胃癌的诊断准确度。

OPN与CEA、CK18均可作为胃癌诊断、治疗及预后判定的相关的肿瘤标志物，但机制不同。OPN在恶性肿瘤的侵袭和转移、新生血管生成和凋亡抑制方面发挥一定作用，CK18与上皮细胞恶变增殖、细胞降解死亡紧密相关，而 CEA的升高则与其编码基因在细胞癌变时失去抑制作用有关，三者的联合检测可能起到一定的互补作用，具体的相关机制有待进一步研究。多肿瘤标志物联合检测有利于提高对胃癌诊断和病情监测的敏感性，有重要的临床价值。

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