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伊维菌素水包油口服液对骆驼寄生虫的驱虫效果试验

2018-03-29

现代畜牧兽医 2018年3期
关键词:伊维菌素虫卵

杜 军

(宁夏大学生命科学学院,宁夏 银川 750021)

伊维菌素是一种抗生素类高效、广谱、低毒类抗寄生虫药[1],可用于防治畜禽的多种寄生虫病,伊维菌素具有安全性能高、药效期长、渗透性强等优点,对体内外寄生虫都具有高效驱杀和防治作用,特别是对家畜的胃肠道线虫、体外痒螨等有着强大的杀灭作用[2-6]。但由于伊维菌素几乎不溶于水,严重制约着该类药物的发展和使用。由于骆驼饲养方式的特殊(终年草原散牧),在养驼业的病害中仍以寄生虫病为主。如何根据当地寄生虫病情况和感染现状,因地制宜选用高效、广谱、低毒的抗寄生虫药物,就成为了长期防治骆驼寄生虫病的主要任务。驱虫药物疗效最确实的给药方法是注射和口服,但骆驼是散养动物又不用额外补加精饲料,牧民没有建设固定的圈舍,无法集中进行注射给药,所以进行注射和口服给药的方案在牧区对骆驼驱虫不切合实际。然而牧场缺乏天然水源地,每户牧民家中都打有深机井,骆驼在草场采食后一般3~5 d要准时回来补充饮水,所以研究在水中加入药物进行饮水驱虫的方法是目前给骆驼驱虫的最佳方案。目前,伊维菌素对骆驼体内外寄生虫的驱杀效果研究较少,同时由于骆驼的复胃结构与其他反刍动物相差较大,所以口服给药比其他反刍动物生物利用度高。本研究将伊维菌素制成水包油乳剂,解决了伊维菌素极难溶于水和稳定性差的缺点[7-8],同时降低了传统油剂毒副作用,通过双峰骆驼驱虫试验为兽医临床新型骆驼抗寄生虫药物新制剂提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 试验药物 1%伊维菌素溶液,100 mL/瓶,含伊维菌素10 mg/mL,由本实验室自制。

1.2 试验动物 在内蒙古阿拉善左旗选择春季未驱虫,自然放牧的双峰驼4群,共92只。

1.3 试验方法

1.3.1 1%伊维菌素溶液制备 取吐温-80、乙酸乙酯、1,2一丙二醇、乙醇、伊维菌素,置于白色三角瓶中,恒温磁力搅拌器以300~500 r/min搅拌0.3 h,直至伊维菌素完全溶解,体系均一、透明、澄清为止;在搅拌条件下向上述溶液中慢慢滴加纯化水,随纯化水加入量的增加,溶液体系先变的比较黏稠,当纯化水达到40~50 g时,体系忽然变稀,流动性增大,完全透明,当纯化水用量达70 g时,即得伊维菌素含量为2%的O/W型伊维菌素溶液;继续在搅拌条件下向上述溶液中慢慢滴加纯化水,随着纯化水用量的不断增加,可得伊维菌素含量在0.1%~2%范围内任何一个浓度的O/W型伊维菌素溶液;也就是在获得2%的溶液基础上,可以加入任一体积的纯化水,都能得到均匀分散、透明澄清的伊维菌素溶液。将制备2%伊维菌素溶液2倍稀释后经0.22 μm滤膜过滤,分装,轧盖,经105℃灭菌30 min后,即得1%伊维菌素溶液。

1.3.2 试验动物分组 首先对选定的试验骆驼群体,按照驱试药物的剂量高低,本试验共分为4个试验组和4个空白对照组,每个试验组选用不同剂量的伊维菌素水包油口服液进行饮水,空白对照组不用任何驱虫药物,只做空白对照。

1.3.3 粪便虫卵检查 驱虫试验开始前对各组的骆驼体重、感染情况、健康状况进行调查。各组在给药前随机采样,20%的采集家畜粪便3 g,进行虫卵检查并体外寄生虫感染情况检查。给药后注意观察试验动物反应,从1~30 d不同时间的观察数据。采用饱和蔗糖溶液漂浮集卵,玻片虫卵计数。按1:1比例将蔗糖和水加热溶解配制成饱和糖溶液,放凉待用。称取采集的粪便3 g,放入乳钵中,用量筒量取30 mL清水,在乳钵中加适量清水研细粪便样品并混匀,再加少量水混匀,并用粪筛滤去粪渣,粪液收集在250 mL的小烧杯中。用剩余量好的清水反复冲洗乳钵,直至洗净,将全部洗液倒入盛有粪液的小烧杯中。用吸管吸取粪液2.5 mL加入到10 mm×130 mm或15 mm×150 mm的试管中,加漂浮液至距试管口1~2 cm处。在管口垫(20~30)mm×(20~30)mm大小的纸片,用拇指垫住管口,用中指和无名指夹住试管,上下颠倒摇匀粪液。用吸管继续滴加漂浮液,直到液面高出试管口而不溢出为准,从管口一侧轻轻覆以盖玻片,静置漂浮20~60 min。取下盖玻片放在载玻片上置于显微镜下检查,对发现虫卵进行分类计数。重复以上步骤2~3次[9]。用上述方法将每个样品逐个检查,详细记录结果,计算EPG(每克粪便中虫卵数),确定驱虫率[10]。

表 1 驱虫试验骆驼分组及用药情况表Table1 Camel grouping and Medication situation of Deworming test

EPG=盖玻片虫卵数之和/2.5 mL×30 mL/3 g

驱虫率=(给药前虫卵数-给药后虫卵数)/给药前虫卵数×100%[11]

2 结果

2.1 粪便虫卵检查结果 定期进行粪便虫卵检查直到30 d后试验结束,对检出虫卵进行计数。选择同群饲养骆驼3峰剖检,统计消化道线虫虫卵检查结果。

2.2 按全身蠕虫剖检法检查线虫种类及数量 这与粪检检验结果一致(表2),最多为毛圆线虫和副柔线虫,其次为奥斯特线虫和马歇尔线虫及钝刺细颈线虫,最少为毛首线虫[12]。

由表3和表4可见,0.2 mg/kg伊维菌素水包油口服液20 d驱虫率均可达100%,对骆驼消化道线虫虫卵、网尾线虫幼虫转阴率、减少率达94%和97%;随着剂量的加大,伊维菌素水包油口服液对线虫虫卵(幼虫)转阴率为100%,减少率达98%以上。

2.3 体外驱虫结果 驱虫前大多骆驼体外寄生虫感染比较严重,主要表现为剧痒,湿疹性炎症、脱毛。当剂量为0.2 mg/kg时,给药后5 d,疥螨的驱净率为100%[12]。当剂量为0.4 mg/kg时,硬蜱和毛虱的驱净率也明显提高。

2.4 安全性 伊维菌素水包油口服液各剂量组试验骆驼,采食、精神、排粪等未见异常反应。证明试验剂量伊维菌素水包油口服液对骆驼使用安全。

3 讨论

3.1 内蒙古的阿拉善盟素有骆驼之乡的美誉,骆驼数量曾高达24万峰,但下降的非常快,目前养殖数量约在7万峰左右。骆驼极耐干渴,不怕炎热和寒冷,适于在沙漠和沙山上跋涉,有“沙漠之舟”的美称。由于草源不足,生态环境恶化,使骆驼长期处于饥饿状态,营养不良的骆驼,抵抗力降低,蒙受着各种疾病的困扰,使它们更易于死亡。在内蒙古骆驼寄生虫流行病学调查中发现,该地区骆驼常常因感染寄生虫病而死,通过粪便检查确定感染有大量的各类寄生虫,特别是消化道线虫[13]。

表 2 试验骆驼消化道线虫虫卵检查结果Table 2 Test results of nematode eggs in digestive tract

表 3 投药后不同时间寄生虫EPG与虫卵减少率Table 3 EPG and reduction rate of eggs at different times after administration

表 4 寄生虫数量变化统计表Table 4 The number of parasites change

3.2 试验结果表明,由本实验室研制的伊维菌素水包油口服液各种剂量对骆驼体内多种胃肠道寄生线虫均有极佳的驱虫效果,由试验结果可看出驱虫后5 d即可表现出明显的效果;0.2 mg/kg剂量对毛圆线虫、副柔线虫、奥斯特线虫和马歇尔线虫均能达到较好的驱虫率。试验结果显示,该药物对网尾线虫的成虫也有极佳的驱虫效果。

3.3 本试验对其中一组骆驼按高倍剂量(0.8 mg/kg)饮用伊维菌素水包油口服液,给药后没有骆驼表现出毒副作用,采食、精神、排粪等未见异常反应,各组怀孕骆驼也未发现异常。由此说明该药毒性低、安全范围广。

3.4 伊维菌素对家畜的胃肠道线虫、体外寄生虫有着特殊的疗效,目前,伊维菌素对骆驼体内外寄生虫的驱杀效果研究较少,同时由于骆驼的复胃结构与其他反刍动物相差较大,所以口服给药比其他反刍动物生物利用度高。但由于伊维菌素几乎不溶于水,严重制约着该类药物的发展和使用。本试验研制的伊维菌素水包油口服液,可以用任一比例的饮用水对其稀释,骆驼在饮水过程中就能主动地基本准确地摄入相应剂量的药物,驱虫效果良好。同时解决了伊维菌素极难溶于水和稳定性差的缺点,降低了传统油剂毒副作用,伊维菌素水包油口服液以水为基质,因此与传统油剂相比产品的价格更低,溶液的流动性好,临床应用方便,使用时可以加入任一体积的水混合,药物在溶液中均匀分散,扩大了给药途径,方便了使用,试验结果表明伊维菌素水包油口服液对骆驼体内外寄生虫有良好的的治疗和预防作用,且使用方便、安全,为兽医临床新型的骆驼抗寄生虫药物新制剂提供了科学依据。

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