IGF-1在乳腺癌中的表达与临床意义

薛 晶，赵 杨，程 玉，徐树蕾，严 鹏，申兴斌△

（1.承德医学院，河北承德 067000；2.承德医学院附属医院）

研究表明，全球乳腺癌的发病率正以3%的速度递增，且患者年龄正趋于年轻化[1-2]。而在中国女性恶性肿瘤中，乳腺癌发病率最高[3]。有研究表明，胰岛素样生长因子（IGF）信号系统在细胞的生长、分化、增殖、迁移及凋亡等方面发挥着极为重要的作用[4-5]。作为IGFs家族成员，IGF-1的作用主要是促进有丝分裂，调节体内激素的合成和分泌，并且还能对细胞趋化、免疫及迁移产生影响[6]。国内外的研究均表明，IGF-1在多种恶性肿瘤中高表达。为探讨IGF-1在乳腺癌发生发展中的作用，本研究观察了不同乳腺组织IGF-1的表达情况，以期丰富乳腺癌的临床研究。

1 材料与方法

1.1 材料 承德医学院附属医院2013年6月至2013年11月手术治疗后经病理证实为乳腺癌的组织标本80例，乳腺纤维腺瘤60例，癌旁正常乳腺组织50例，全部患者术前均未接受放化疗及药物治疗。乳腺癌患者年龄26岁-73岁，中位年龄49.5岁，均为乳腺浸润性导管癌，病理组织学分型10例Ⅰ级、56例Ⅱ级、14例Ⅲ级，33例有淋巴结转移、47例无淋巴结转移，原发灶≤2.5cm的16例、原发灶＞2.5cm的64例。60例乳腺纤维腺瘤患者，年龄19岁～54岁，中位年龄48岁；50例癌旁正常乳腺组织，年龄30岁～56岁，中位年龄48岁。癌旁正常乳腺组织标本为乳腺癌术后距癌组织边缘＞10cm以上且外观正常的腺体组织；所有标本的收集避开炎症部位、坏死组织，且经病理医师确诊。

1.2 方法

1.2.1 免疫组织化学染色及结果评判：采用免疫组化（MaxVision）法检测IGF-1蛋白表达。兔抗人IGF-1多克隆抗体（1：100）购自武汉博士德生物工程有限公司，即用型快捷免疫组化MaxVision试剂盒（羊抗鼠/兔）购自福州迈新生物技术开发有限公司。阴性对照由PBS代替，细胞质及细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性。结果判定采用Volm双评分法[7]。

1.2.2 RT-PCR法检测IGF-1mRNA的表达：采用Trizol一步法提取RNA，用反转录酶（AMV）将RNA反转录成cDNA。IGF-1基因上游引物（5’to3’）：TGG AGT TGG TAG ATT GCT GTT G，下游引物（5’to3’）：TAT GAA GGG AGG TGG TGG GTA T，产物大小233bp；β-actin作为内参，上游引物（5’to3’）：AGC GGG AAA TCG TGC GTG AC，下游引物：（5’to3’）ACA TCT GCT GGA AGG TGG AC，产物大小453bp。取扩增产物行2%琼脂糖凝胶电泳，EB染色后，紫外荧光数字成像仪下摄像，并进行吸光度定量分析，以IGF-1与相应β-actin扩增产物条带累积吸光度（IOD）的比值作为IGF-1 mRNA的相对表达量。

1.3 统计分析 采用SPSS 21.0统计软件进行统计学分析，等级数据资料采用秩和检验，计量数据资料采用两独立样本的t检验和单因素方差分析，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 IGF-1蛋白及mRNA的表达情况 乳腺癌组织IGF-1蛋白及mRNA的表达均明显高于乳腺纤维腺瘤和癌旁正常乳腺组织（P＜0.01）。见表1：

表1 不同乳腺组织IGF-1的表达情况

2.2 IGF-1表达与乳腺癌临床病理特征的关系 乳腺癌组织IGF-1蛋白和mRNA的表达与年龄无关（P＞0.05）；与肿瘤大小、淋巴结转移和组织学分级有关（P＜0.05）：＞2.5cm明显高于≤2.5cm，有淋巴结转移明显高于无淋巴结转移，随着乳腺癌组织学分级的升高IGF-1蛋白和mRNA的表达逐渐升高。见表2：

表2 IGF-1表达与乳腺癌临床病理特征的关系

3 讨论

乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着女性的身心健康。据统计，每年全国乳腺癌患者增加120万，而每年因乳腺癌死亡的女性患者约50万[8]。在全球每年新确诊的病例中，中国患者占12.2%[9]。

IGF-1是由肝脏合成，由12号染色体编码、70多个氨基酸组成，具有内分泌、自分泌及旁分泌功能的多肽单链[10-11]。已有研究表明，在炎症和肿瘤的发生发展过程中IGF-1异常分泌，且在前列腺癌、卵巢上皮性癌及胃癌等多种肿瘤中，IGF-1在促进肿瘤细胞转移及侵袭方面发挥重要作用[12-13]。另外，有研究发现，血浆中IGF-1的水平越高，发生乳腺癌的危险性越大[14]；Rollison等[15]在对美国184例女性乳腺癌的研究中也证实，患者血清IGF-1的含量与发生乳腺癌的风险性呈正相关。上述研究提示，IGF-1在多种恶性肿瘤的发生发展过程中具有重要作用。

本研究采用免疫组织化染色法和RT-PCR法检测了不同乳腺组织IGF-1蛋白和mRNA的表达情况，并分析了IGF-1表达与乳腺癌临床病理特征的关系。结果发现，乳腺癌组织IGF-1的表达强度明显高于乳腺纤维腺瘤和癌旁正常乳腺组织，且蛋白水平和基因水平结果一致，推测IGF-1可能通过某种途径参与了乳腺癌的发生、发展，其差异性表达在转录水平就已发生；同时本研究发现，乳腺癌组织IGF-1蛋白和mRNA的表达与肿瘤大小、淋巴结转移和组织学分级有关，与何杨等[16]的研究结果类似，推测IGF-1可能与乳腺癌的生长、恶性程度和转移有关。

综上所述，IGF-1可能在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用，提示IGF-1可能作为判断乳腺发生发展、恶性程度和远处转移的标志物用于临床，但尚需进一步地深入研究。

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