热毒宁注射液对病毒性肺炎患儿血浆细胞因子及免疫功能的影响

赵志勇，韩 晶，李贤伟，任 华，马慧平

(1. 河北省邯郸市中心医院，河北 邯郸 056001；2. 冀中能源峰峰集团总医院，河北 邯郸 056001；3. 河北省邯郸市妇幼保健院，河北 邯郸 056001)

病毒性肺炎(CVP)是儿科常见的一种呼吸道感染性疾病，主要是由呼吸道合胞病毒、腺病毒、巨细胞病毒、流感及副流感病毒导致的肺间质性炎症，临床症状主要有咳嗽、咳痰、发热、乏力、肌痛，若治疗不当，病情加重可累及患儿的中枢神经系统和循环系统，表现为头晕、头痛、烦躁不安，严重者可出现心功能不全、血压下降、脑炎、呼吸衰竭等症状，对患儿的身体健康造成严重威胁。病毒感染后可直接导致呼吸系统损伤，激活单核细胞、巨噬细胞等多种炎性细胞产生大量的炎症因子，启动级联放大的炎症反应，因此监测炎性细胞因子对病情严重程度的评估、制订治疗方案、疗效的评判和预后极为重要[1]。越来越多的研究证实，免疫功能紊乱在小儿病毒性肺炎的发病机制中起着重要作用，病毒感染与细胞免疫、体液免疫息息相关[2]。目前临床上对儿童病毒性肺炎缺乏特效药物，多采用抗病毒药物及抗生素等对症支持治疗，病程较长。热毒宁注射液具有疏风解表、解毒清热之功效，用于治疗小儿病毒性肺炎疗效确切[3]，但需要更多大样本、高质量、设计严谨的多中心随机对照试验加以验证。本研究观察了热毒宁注射液治疗儿童病毒性肺炎的临床疗效及对血浆中炎性细胞因子和外周血T淋巴细胞亚群的影响，旨在为临床治疗提供理论依据。现报道如下。

1 临床资料

1.1一般资料 纳入2013年1月—2016年12月邯郸市中心医院儿科收治的符合病毒性肺炎诊断标准的140例患儿作为研究对象，患儿均有发热、咳嗽、气促和呼吸困难等症状，肺部可闻及湿啰音，血常规WBC分类以淋巴细胞为主，WBC总数正常或偏低，个别病例轻度升高，肺部影像学检查可见大小不等的斑片状阴影，符合《实用儿科学》[4]儿童病毒性肺炎的诊断标准，肺炎病毒抗体为阳性；患儿既往无基础疾病如心、肝、肾功能障碍，无治疗禁忌证以及对研究药物过敏，3个月内没有急性感染病史，并排除支原体及细菌感染；患儿家长签署同意书，自愿参与本次研究。将纳入研究的患儿随机分为2组：观察组70例，男38例，女32例；年龄1～11(5.78±1.67)岁；病程1～8(4.24±1.13)d；体温(39.7±0.6)℃。对照组70例，男31例，女39例；年龄1～10(5.05±1.34)岁；病程1～10(4.87±1.76)d；体温(40.0±0.4)℃。2组年龄、性别、病程、体温比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，具有可比性。

1.2治疗方法 2组入院后均常规给予退热、氨溴索化痰、氨茶碱止咳平喘、抗病毒、补充能量、补充维生素等对症支持治疗，对照组再给予利巴韦林 (郑州卓峰制药有限公司，国药准字H41023268，规格：0.1 g/支)10～15 mg/(kg·d)溶于5%葡萄糖溶液中静滴，2次/d，疗程5～7 d。观察组在对照组治疗基础上给予热毒宁注射液(江苏康缘药业股份有限公司，国药准字Z20050217,规格：10 mL/支)静滴，3～5岁患儿最高剂量不超过10 mL加入 0.9%氯化钠注射液50～100 mL中静脉滴注，滴速为30～40滴/min;6～11岁，10 mL/次加入0.9%氯化钠注射液100～200 mL中静脉滴注，滴速为30～60滴/min；1次/d，疗程5～7 d。

1.3观察指标 ①治疗结束后评定疗效。治愈：经过3 d治疗后，体温下降，1周内临床症状及肺部啰音消失，血常规恢复至正常水平，肺部X射线检查肺部病灶完全吸收。好转:治疗1周后体温恢复正常，症状减轻，肺部啰音较前减少，血常规较前好转，肺部X射线复查肺部病灶阴影缩小，尚未完全吸收。无效: 治疗1周后症状体征未见明显改善甚至加重，复查胸部X射线片肺部病灶吸收不明显。总有效=治愈+好转。②治疗前及治疗7 d后，对2组咳嗽、气促、体温、双肺听诊情况进行评分。a. 咳嗽:不咳嗽0分，只有白天咳嗽1分，日夜咳嗽但不频繁2分，日夜频繁咳嗽3分;b. 气促:呼吸频率20～30次/min 0分，呼吸频率31～40次/min 1分，呼吸频率41～50次/min 2分，呼吸频率51～60次/min 3分;c.体温:正常0分，37.5～38.0 ℃ 1分，38.1～39.0 ℃ 2分，39.0 ℃以上3分;d. 双肺听诊:双肺呼吸音清0分，少量啰音1分，散在啰音2分，大量啰音3分。③2组均于入院当天及治疗7 d后空腹抽取肘静脉血，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆TNF-α、IL-6、IL-8水平，试剂盒由Sigma-Aldrich公司提供。采用碱性磷酸酶标记卵白素法(SAP)检测T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+百分比，试剂盒由军事医学科学院生物制剂发展中心提供。

1.4统计学方法 数据应用SPSS 17.0统计学软件进行处理。计数资料分析采用2检验；计量资料数据采用表示，组内治疗前后比较采用配对样本t检验，组间均数两两比较采用方差分析。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.12组治疗效果比较 观察组治愈41例，好转25例，无效4例，治疗总有效率为94.28% ；对照组治愈33例，好转20例，无效17效，治疗总有效率为75.71%。观察组总有效率明显高于对照组(2=9.468，P<0.05)。

2.22组治疗前后临床症状体征评分比较 2组治疗7 d后肺炎症状体征评分均明显低于治疗前(P均<0.05)，且观察组明显低于对照组(P均<0.05)。见表1。

表1 2组治疗前后临床症状体征评分比较分)

注：①与治疗前比较，P<0.05;②与对照组比较，P<0.05。

2.32组治疗前后血浆TNF-α、IL-6及IL-8水平比较 2组治疗后血浆TNF-α、IL-6、IL-8水平均明显降低(P均<0.05)，且观察组明显低于对照组(P均<0.05)。见表2。

表2 2组治疗前后血浆TNF-α、IL-6及IL-8水平比较

注：①与治疗前比较，P<0.05；②与对照组比较，P<0.05。

2.42组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群水平比较 2组治疗后外周血中CD3+、CD8+含量较治疗前升高(P均<0.05)，CD4+、CD4+/CD8+含量均明显下降(P均<0.05)，观察组各指标改善情况明显优于对照组(P均<0.05)。见表3。

表3 2组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群水平比较

注：①与治疗前比较，P<0.05；②与对照组比较，P<0.05。

3 讨 论

肺部感染在我国住院死亡患儿中占第一位，而肺部病毒感染至少占50%[5]。小儿病毒性肺炎的发病机制尚不明确，通常病毒经呼吸道侵入后导致气管、支气管黏膜充血、水肿、渗出，炎细胞浸润，管壁增厚，管腔狭窄；肺泡内大量渗出，表面活性物质减少，渗出的血浆蛋白和纤维蛋白形成透明膜覆盖在肺泡表面；间质内大单核细胞浸润、渗出，可出现局部病灶坏死以及纤维化。感染病毒后呼吸道抵抗力下降，再加上自身免疫功能低下，使感染病情加重，因此儿童病毒性肺炎被国家卫计委列为小儿四病防治之一[6]。导致上述病理变化的可能原因有病毒对呼吸系统直接损害，激活非特异性免疫，大量白细胞、巨噬细胞活化产生多种细胞因子和活性物质，介导级联放大的炎症反应。

TNF-α、IL-6、IL-8是机体中主要的炎性细胞因子。TNF-α主要由单核巨噬细胞系统产生，参与各种炎症反应和免疫应答，在正常的肺组中含量很少。大量的研究已证实，TNF-α在炎症反应中是最早出现的细胞因子，在炎症发生网络中处于核心地位，具有启动、促进炎症反应的作用，它与肺组织相关受体结合活化后，溶酶体酶释放，趋化中性粒细胞聚集，刺激单核巨噬细胞释放其他炎性因子如IL-6、IL-8等进一步损伤肺组织[7]。IL-6是处于TNF-α下游的细胞因子，在炎症反应中起着协调作用，它诱导肝细胞合成多种急性时相蛋白，促进和激活T淋巴细胞亚群，增强其他细胞因子的效应，从而加重组织的炎症病变。IL-8属于CXC趋化因子家族，对呼吸爆发的启动以及炎症反应和免疫调节起着十分重要的作用，是趋化活性最强的细胞因子，对T淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞有强烈的趋化作用。许多肺病理学改变如肺部感染、急性肺损伤、急性呼吸窘迫综合征与IL-8水平密切相关[8]。本研究结果显示，病毒性肺炎患儿治疗前TNF-α、IL-6、IL-8均升高，提示这些炎性细胞因子参与了病毒性肺炎的发病。

在儿童病毒性肺炎的发病机制中，免疫功能异常已经被多数研究所证实[9]。T淋巴细胞CD3+是机体细胞免疫的主要组成部分，而CD4+可通过释放IL-2、TNF-β、IFN-γ等多种细胞因子调节细胞免疫功能。CD8+是细胞毒性T细胞，具有抑制CD4+的作用，在免疫应答的效应阶段与靶细胞接触，识别带有特异性抗原的靶细胞，诱导其溶解死亡。正常情况下，T淋巴细胞及其亚群的数目相对稳定，各种免疫细胞互相协作、相互制约，如果T淋巴细胞总数或CD4+/CD8+比值发生变化，就被看作免疫调节功能紊乱。本研究发现，病毒性肺炎患儿CD3+、CD8+在治疗前相对较低，CD4+及CD4+/CD8+比值较高，显示免疫平衡失调。

中医认为儿童病毒性肺炎病机包括内因及外因，内因主要为小儿脏腑娇嫩，形气未充，正气虚弱，免疫功能低下，抗病能力较弱，寒暖不知自调，易致外邪入侵，病原体侵袭而致病[10]。外因则为外邪袭肺，致肺的宣肃失常，郁久化热，肺气郁阻，津液化为痰浊，气道不利，痰湿郁滞，肺热熏蒸，热毒壅盛，出现咳喘多痰。由于抗病毒药物的开发进展缓慢，儿童病毒性肺炎的治疗目前尚无特效药物。作为中药西制的典范药物，热毒宁注射液以栀子、金银花、青蒿为主要成分，其中金银花疏散风热、清热解毒，具有抗炎抗病毒，促进和恢复白细胞的吞噬能力，促进淋巴细胞转化，调节免疫功能作用[11]；栀子可以导热毒下行、消三焦之火，提升金银花解毒的效力，现代药理学研究认为其具有抗炎抗病毒、降温退热的作用，可以抑制炎症因子(TNF-α)及内源性致热源(如IL-1、IL-2、IL-6)的产生；青蒿解表清热，可以使邪毒从肌表而解，青蒿中主要成分青蒿酮具有抗炎、解热镇痛及提高免疫力的作用，青蒿素和蒿甲醚具有促进脾T淋巴细胞增殖功能，对流感病毒有直接灭活和抑制增殖的作用[12]。动物实验已证实，热毒宁注射液可以下调肺炎大鼠模型外周血及支气管肺泡灌洗液内IL-8、IL-10、TNF-α水平，减轻气道炎症反应，缓解气道痉挛，并且可以提高肺泡表面活性物质磷脂酰胆碱的含量，有助于免疫功能的恢复[13]。

本研究结果显示，观察组总有效率明显高于对照组，治疗7 d后肺炎症状体征评分和血浆细胞因子TNF-α、IL-6、IL-8水平和CD4+、CD4+/CD8+含量均明显低于对照组，CD3+、CD8+含量高于对照组。说明热毒宁注射液能够更好地调节病毒性肺炎患儿免疫功能，抑制炎性反应，从而达到改善患儿症状、提高治愈率的目的，临床上值得推广应用。

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