地黄饮子汤对急性脑缺血大鼠的影响及机制

孙伟楠

（中国医科大学基础医学院机能实验中心，辽宁 沈阳 110122）

急性脑缺血是我国心脑血管疾病的第一大死亡原因，占全部脑卒中患者人数的75%[1]，严重威胁人类的生命健康。大脑神经受损，脑组织代谢异常，产生过多的氧自由基，加重神经功能损伤，导致患者肢体残疾，甚至患者死亡。地黄饮子汤具有滋补肾阴、补肾阳等作用。有研究[2-3]表明，地黄饮子汤能够治疗急性脑缺血、脑萎缩、血管性痴呆等，对促进脑神经功能恢复有较好的效果。本研究通过观察地黄饮子汤对急性脑缺血大鼠学习记忆能力的改变，探讨地黄饮子的作用机制，为临床应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 动物分组 中国医科大学提供的Wistar大鼠54只，雌雄各半，体质量（250±30）g。随机分为治疗组、模型组、对照组，每组18只。

1.2 急性脑缺血模型及分组 选用10%水合氯醛对大鼠腹腔麻醉，在颈部正中切开，分离出双侧颈总动脉并用动脉夹钳夹30 min，用温盐水纱布保护切口创面，松开动脉夹30 min后，再次用动脉夹钳夹30 min，使大鼠处于急性脑缺血状态，模型成功。治疗组：灌服地黄饮子汤36 g/kg每日1次。模型组：每日胃灌盐水每日1次。对照组：正常喂养，未造模。连续喂药3周。

1.3 药物 地黄饮子汤制备：熟地黄12 g，麦门冬15 g，肉苁蓉15 g，石斛15 g，菖蒲12 g，巴戟天15 g，五味子10 g，白茯苓12 g，山茱萸15 g，炮附子15 g，官桂10 g，远志10 g。煎煮2次，过滤煎液旋转蒸发后浓缩，放入无菌瓶中备用。

1.4 仪器 Morris水迷宫定位航行、跳台实验记录仪（中国医科大学研究所提供），奥林巴斯光学显微镜（郑州朋来仪器公司）。

1.5 检测法 3周后，对所有大鼠进行测试： (1)定位航行实验。Morris水迷宫实验（中国医科大学实验中心提供），场地：水池，水池中混入牛奶变成不透明色，水池分为4个象限，分别将每只大鼠面朝水池壁放入不同象限中，水池上方为移动摄像机，记录大鼠在水池中游行的轨迹、大鼠找到平台的时间（潜伏期）、寻找平台的错误次数，每日1次，连续测试4 d。 (2)跳台实验：将大鼠放在平台上，通电，电脑记录大鼠受刺激后回避反应的时间 (潜伏期)，即大鼠跳上绝缘台的时间，每只大鼠连续训练3 min，每日1次，连续测试4 d。1.6统计学方法 数据使用SPSS 17.0进行统计分析，计量资料采用 （x±s）表示，组间数据比较采用方差分析，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Morris水迷宫定位航行实验 模型组大鼠定位航行中学习记忆能力的错误次数、潜伏期比对照组明显延长，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组大鼠学习记忆能力的错误次数、潜伏期比模型组明显缩短，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 Morris水迷宫定位航行实验 （x±s，分）

2.2 大鼠跳台实验 模型组大鼠跳台实验的潜伏期比对照组明显延长，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组大鼠跳台实验的潜伏期比模型组明显缩短，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 大鼠跳台实验潜伏期 （x±s，s）

3 讨论

急性脑缺血是复杂的病理改变过程，随着人口的老龄化，急性脑缺血的发病率逐年升高。有研究[4-5]认为，急性脑缺血的病理改变与线粒体改变有直接关系，而线粒体改变是由脑组织中自由基增多紧密相关，由于脑组织发生缺血缺氧改变，导致氧自由基增多，损伤脑神经。

脑缺血后，极少部分神经细胞能够恢复功能，仍不能恢复到正常的神经功能，因此对患者的生活质量造成巨大影响，近年来，中药越来越多地应用在临床中，有研究报道[6]，地黄饮子具有促进神经再生、神经功能恢复的作用，地黄饮子具有滋肾阴、补肾阳的功效，其药理作用是镇静、改善脑部血液循环、促进神经再生、促进脑血管再生、预防痴呆、保护神经元等。

本研究造模后分组治疗，结果显示地黄饮子治疗组大鼠Morris水迷宫定位航行实验潜伏期明显缩短，跳台实验潜伏期明显缩短，表明地黄饮子治疗后大鼠的学习记忆能力明显提高，该结果与周妍妍的报道[7]结果一致。当发生急性脑出血时，脑组织发生氧化应激反应，自由基生成过多，过氧化物生成增多，有研究报道[8-9]，地黄饮子可能提高小鼠机体的抗氧化能力、清除过多的自由基、抑制氧化应激反应，保护脑组织，同时地黄饮子还能促进神经元再生、神经元迁移及分化，促进神经细胞功能恢复。

综上所述，地黄饮子能够通过抑制脑组织内的氧化应激反应，减少过多的氧自由基对脑组织的损伤，保护神经细胞功能，修复受损的神经，提高学习记忆能力，本研究为中药治疗及保护脑神经组织的作用机制提供理论依据。

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