急性期带状疱疹患者血S100β蛋白、NSE及病毒载量水平变化与病情严重程度的相关性研究

郑曙光,梁爱芳,张艳丽,杨小静,宋飞娟

(濮阳市人民医院 皮肤科,河南 濮阳457000)

水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus)初次感染人体引起水痘,再次感染后将体内的病毒再次激活引起带状疱疹(HZ),临床主要表现为皮肤的疱疹病变,同时伴有明显的神经痛。目前对带状病毒的治疗主要采取足量、足疗程的抗病毒及营养神经药物,但部分患者即使皮损消退也会遗留不同程度的神经痛(PHN),影响患者的生活质量。目前,临床研究认为带状疱疹神经痛主要是由于病毒侵犯神经引起,导致中枢和周围神经系统发生一系列生理病理改变所致[1-3]。S100β蛋白主要分布在神经系统的雪旺氏细胞、星形胶质细胞中,在神经受损时可出现血中S100β蛋白升高[4-7]。神经元特异性烯醇化酶(NSE)是细胞内蛋白质,在神经内分泌细胞和神经元细胞内均有存在,在神经元细胞发生损伤时细胞质内NSE被释放入脑脊液中可通过血脑屏障进入血液循环,引起血中NSE升高[8-10]。临床研究显示：带状病毒患者的唾液和血液中可检测到带状病毒[11,12],但是病毒载量与病情严重程度是否存在相关性的临床研究较少。本研究主要对急性期带状疱疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平变化与病情严重程度的相关性进行研究,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年6月-2016年12月期间在我院诊治的急性期带状疱疹患者80例为带状疱疹组,其中男38例,女42例,年龄21-73岁,平均(46.93±11.20)岁；病变部位：头颈部者32例,其他部分者48例。纳入标准：(1)符合带状疱疹诊断标准；(2)病程≤3 d；(3)在纳入研究前未服用过抗病毒及糖皮质激素药物。排除标准：(1)合并有非带状疱疹所致神经损伤性疾病；(2)合并其他器官严重功能障碍性疾病、恶性肿瘤和免疫系统疾病；(3)有精神疾病史；(4)长期服用糖皮质激素、免疫抑制剂、免疫增强剂等药物者；(5)妊娠期及哺乳期妇女。选取同期门诊体检正常者80例为对照组,其中男35例,女45例,年龄27-65岁,平均(48.11±10.74)岁。两组对象性别、年龄等方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会审核通过,研究对象知情同意。

1.2 方法

1.2.1血S100β蛋白及NSE、带状疱疹病毒DNA检测方法 患者在治疗前和治疗2周后、对照组在体检时采集外周静脉血8 ml,将血液标本分为2份分别置于含有EDTA的无菌试管内(A管和B管),以3 000 r/min转速离心处理5 min,分离血清及血浆。A管采用酶联免疫吸附法检测血S100β蛋白和NSE浓度。将实验用人类外周血淋巴细胞分离液加入无菌试管内,在B管内加入PBS溶液,以1∶1比例进行稀释,将稀释液加入有淋巴细胞分离液的试管内,以2 000 r/min转速离心20 min,吸取白膜层(外周血单个核细胞)置于另一个试管内,加PBS液,以1 200 r/min转速离心10 min,重复2次后保留沉淀物。采用荧光定量PCR法检测血淋巴细胞中带状疱疹病毒DNA载量。试剂盒购自北京诚林生物科技有限公司,带状病毒检测试剂盒购自上海之江生物科技有限公司,人外周血淋巴细胞分离液购自天津市灏洋生物制品科技公司,PBS液购自上海科兴商贸有限公司。

1.2.2病情严重程度的评估方法 在治疗前和治疗2周后,根据水疱数目、水疱簇数、水疱变化、红斑面积、瘙痒疼痛及烧灼感等症状和体征进行病情严重程度评分[13，14],评分分为0-4分5个级别,总分<6分为轻度,6-12分为中度,>12分为重度。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行统计分析,计量资料比较采用t检验和秩和检验,相关性采用Pearson相关分析,P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量和病情严重程度评分比较

带状疱疹组患者治疗前、治疗2周后血S100β蛋白、NSE水平均明显高于对照组(治疗前t=37.74、51.05,治疗后t=14.22、7.28,P<0.05),治疗前血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量和病情严重程度评分均高于治疗2周后(t=14.23、41.13,t=46.56、9.89,P<0.05),见表1。

表1 两组血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量、病情严重程度评分比较

注：*与对照组比较,P<0.05；△表示与治疗后比较,P<0.05。

2.2 不同病情严重程度评分带状疱疹患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量比较

治疗前,病情严重程度评分分级轻度20例,中度36例,重度24例；治疗2周后,轻度46例,中度22例,重度12例。治疗前、治疗2周后不同病情严重程度评分患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量比较差异有统计学意义(治疗前Z=11.72、22.73、738.62,治疗后Z=6.54、8.09、34.76,P<0.05),见表2和表3。

表2 治疗前不同病情严重程度评分患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量比较

表3 治疗后不同病情严重程度评分患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA载量比较

2.3 带状疱疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平变化与病情严重程度的相关性分析

相关性分析结果显示：带状疱疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平变化与病情严重程度评分之间均呈正相关性(P<0.05),见表4。

表4带状疱疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平变化与病情严重程度的相关性(r值表)

指标S100β蛋白NSE病毒DNA载量病情严重程度评分S100β蛋白-0.860.920.78NSE--0.630.59病毒DNA载量---0.70

3 讨论

带状疱疹是潜伏在三叉神经、脊神经后根等位置的水痘-带状疱疹病毒被再次激活后引起的感染性皮肤病,免疫抑制剂、化疗、激素等药物的应用是引起该病的诱发因素,由于病毒可侵犯到神经,病毒有噬神经性,导致神经系统微环境发生炎症浸润等变化,因此,患者常常出现不同程度的神经损伤,而且神经损伤贯穿于疾病发展和康复的全过程,并可延续到后遗症期,患者表现为皮损消退后(大约4周)神经痛可持续存在,引起患者的生活质量下降。目前,对神经损伤的检查主要依靠临床症状、肌电图、脑电图、神经活检等[15,16],但各有优缺点,而且对神经损伤程度缺乏客观的量化指标,目前临床对神经损伤的评估更多的是采用S100β蛋白和NSE[16]。S100β蛋白是一种酸性钙结合蛋白,属于神经蛋白中的一种,在神经细胞中分布广泛,神经受损后神经细胞内的S100β蛋白会被释放出细胞外,刺激局部产生大量的炎症因子而引起神经毒性反应。有报道显示,血S100β蛋白水平越高往往提示患者神经损伤越严重[17],患者预后越差。NSE为细胞内蛋白质,可参与糖酵解过程,在神经细胞内特异性存在,在神经元细胞出现破坏时细胞质内的NSE会被释放出细胞外,在脑脊液中NSE含量会升高,通过血脑屏障血中NSE也可出现相应的升高。有报道显示,带状疱疹患者血中S100β蛋白和NSE表现为升高[18,19]。本研究中,带状疱疹患者治疗前和治疗2周时血S100β蛋白和NSE也表现为升高,而且治疗前较治疗后明显升高,进一步证实了急性期带状疱疹患者存在不同程度的神经损伤,而且这种损伤在治疗过程中恢复较缓慢。

水痘-带状疱疹病毒属于人疱疹病毒3型,人类是水痘-带状疱疹病毒的唯一宿主,带状疱疹患者的疱疹液中含有大量的水痘-带状疱疹病毒,找到水痘-带状疱疹病毒是找到带状疱疹的金标准。采用传统病毒分离方法在血液中较难找到水痘-带状疱疹病毒,实时荧光PCR技术对病毒感染检测阳性率高,是目前临床常用的血中病毒检测方法,可同时进行定性和定量检测。

本研究对带状疱疹患者血中病毒DNA载量进行检测,以分析治疗前后病毒载量的变化,结果显示,病毒DNA载量在治疗前明显高于治疗后,随着治疗后病情好转病毒载量明显下降,而且有研究显示病毒DNA载量较高的患者后期发生神经后遗症的几率也明显较高[20],提示病毒DNA载量较高的情况下可能对患者神经损伤更严重,因此,患者在急性期和后遗症期均存在明显的神经痛症状。目前对带状疱疹的临床病情严重程度评估缺乏统一的方法,主要依据临床症状、视觉模拟评分法等对疼痛程度进行评估,但是仅可反映神经疼痛程度,无法对患者的整体病情进行系统评估。有文献采用病情严重程度评分对带状疱疹患者病情进行评分[20],该评分方法将水疱数目、水疱簇数、水疱变化、红斑面积、瘙痒疼痛及烧灼感等症状和体征进行量化评分,以评估患者病情的严重程度,评分越高提示病情越严重。本研究中,带状疱疹患者治疗前评分明显高于治疗后,而且治疗前主要为中重度患者,治疗后则表现为轻中度,可以看出病情明显恢复。

带状疱疹患者虽然证实存在神经损伤,表现为血S100β蛋白升高,而且病毒DNA载量也有明显升高,但是以上指标是否与病情严重程度相关,临床尚缺乏相关的研究证据。本研究对以上指标间的相关性进行研究,从研究结果可以看出,患者无论治疗前还是治疗后均表现为病情严重程度与血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平变化的一致性,病情较轻的患者血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平相对较低,病情较重的患者血S100β蛋白、NSE、病毒载量水平也相应较高,而且相关性研究也显示以上指标间呈正相关性,说明以上指标之间关系密切,可综合应用于带状疱疹患者的病情评估,而且对于预测治疗效果也有一定的价值。

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