生猪不同阶段猪瘟抗体检测与分析
2018-02-16
(涪陵区畜牧兽医局,重庆 408000)
猪瘟是由黄病毒科、瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,而猪是该病毒的唯一自然宿主[1]。近年来,涪陵区一部分养猪场反映猪瘟免疫效果不理想。决定免疫成败的原因是多方面的,而免疫程序是其中最重要的因素之一[2]。其次是对于仔猪,母源抗体水平又是制定免疫程序首要的考虑因素[3]。而涪陵区猪瘟的首免时间参差不齐,因此对当地某规模化猪场不同免疫阶段的生猪猪瘟抗体检测,然后调整免疫程序后再检测,旨在为当地不同规模猪场制定科学、有效的猪瘟免疫程序提供借鉴。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 仪器
Thermo Multiskan Go 新一代全波长酶标仪(Made in USA),Thermo Multidrop COMBI全自动分液仪(Made in USA),TECAN HYDROSPEED全自动洗板机(Made in Swiss)。
1.1.2 试剂
猪瘟试剂盒:猪瘟间接ELISA检测试剂盒,在有效期内使用,购自中国兽医药品监察所,4℃保存。实验用水均为超纯水。
1.2 方法
1.2.1 试验动物与分组
2016年1月-2016年12月的4个季度,采取本辖区内某规模场在排除传染病、寄生虫病、没有肉眼可见的生殖道疾病以及先天性因素的基础上,按日龄,一、二季度为免疫程序调整前,对经产母猪、仔猪(28±2日龄、保育猪(60±2日龄)、育肥猪(100±2日龄)四个阶段进行采样。三、四季度为调整后,对经产母猪、仔猪(40±2日龄、保育猪(60±2日龄)、育肥猪(100±2日龄)四个阶段进行采样。
1.2.2 样品的采集与处理
血清采集:2016年1月-2016年12月的4个季度,对某规模场的生猪分别对经产母猪、生猪、育肥猪、保育猪4个阶段进行采样,清晨空腹颈静脉采取血液5 mL,采样同时记录耳标号与每份血样品的免疫程序。将编号的猪血分别移至1.5 mL灭菌EP管内,3 000 r/min离心4 min,共计获得了480份合格样品血清,置于-20℃冰箱待检。
2 结果
对合格的猪血清进行猪瘟ELISA抗体检测,根据试剂盒说明书上的标准计算,通过收集数据、整理与分析,得出试验结果:仔猪母源抗体均值在36.65%,经产母猪的免疫抗体均值在96.67%,将猪瘟免疫首免调整到28日龄后,仔猪40日龄猪瘟抗体达到53.33%,经过二免,保育猪能达到65%,到育肥猪达到96.67%。
3 讨论
保育猪经过首免注射后,抗体水平有所提高,但未能达到有效的免疫保护力,在这个阶段的生猪,处在动物体内的巨噬细胞与疫苗刺激产生的免疫球蛋白相互制衡的过程,易成为猪瘟野毒侵袭感染的对象。保育猪发生猪瘟主要是由于猪蓝耳病、圆环病毒病发生后引起的免疫抑制,影响了猪瘟的免疫。这一阶段常和猪蓝耳病、圆病毒病、传染性胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌等混合感染,往往以死亡而告终[4]。
规模化猪场的免疫程序十分重要,免疫程序不当会有可能造成相应阶段猪群的免疫保护力差,因此定期要对规模化猪场的猪瘟抗体开展检测,通过结果分析适当的调整免疫程序。对我区养殖业的健康的发展有重要意义。
[1] 王火平.仔猪猪瘟超前免疫的研究[J].福建畜牧兽医,2005,27(4): 8-9.
[2] 苗得园.Herdchek 猪瘟抗体ELISA 试剂盒在猪瘟控制中的应用[J].中国兽医杂志,2006,42(11) :50-51.
[3] KLnig M,Leng sfeld T,Pau iy T,et a1.Classical swine fever virus :mdependentinduction of protective immunity by twostructural glycoproteins[J].J Virol,1995,69(10) :6479-6486.
[4] 苏德胜 刘芬.各生长阶段猪只猪瘟的发病特点 [J].山东畜牧兽医,2014(5): 94-95.