动物疫病监测中的猪样品采集技术要点

2018-02-15

畜牧兽医科学 2018年3期

(定兴县农业局, 河北定兴 072650)

1 检测对象不同的样品采集技术

1.1 检测细菌

假若猪样品用于检测细菌，则选择样品时应选取病状较典型且死亡时间较短的猪为最佳，假若条件不允许，则应对采集的组织或样品做无菌处理，亦可以在实验室现场做无菌处理。主要方法为使用接种棒将猪试验品中所需的血样及肝脏通过接种的方法放置于血平板处。且需注意的一点是该样品不经允许不得加入任何物质，处理完成后，应立即将样品放置于密闭性较好的、经过灭菌处理的空间内，并为其贴上详细的标签以便下一次的寻找，紧接着为该样品寻找一个空间较大的冷藏室，以备即将实施的送检工作。

1.2 检测病毒

假若该猪样品的主要目的是检测病毒，应选择在猪病发体温升高的过程中进行采集，该样品的采集结构一般为猪的脏器或是粪便，与上述检测细菌的处理方法相似，大致流程为“采集-无菌处理-贴标签-冷藏处理-送检”。假设运送路途过于遥远，则可以采取先将样品冻结的方法以保障采集样品的可使用性，另一种有效手段为将所需样品防治在酸碱度适中的乳液内部，并在该容器内加入适量的青霉素或链霉素，紧接着进行冷藏放置以备送检。假若此次采集过程中所需样品只能是抗凝血，则应在采集样品前，在用于采血的容器内部添加适量的浓度为0.1%的肝素物质，猪样品应从使用注射或真空采血的方法对其前腔静脉做抽血处理。假若样品需求量较少，则可选择其他部分进行抽取，例如耳静脉等。

1.3 检测血清

采集检测血清的猪样品可使用的工具为一次性采血器、一次性注射器。首先利用注射器从猪的静脉位置抽取大约3ml的血液样品，并将其放置于一次性采血仪器内部，紧接着为其贴标签，将其放置在室温环境内，确定血液凝固后为其安排送检。经过相关操作，使得样品结构内的血清在最快程度内分离出来[1]。值得注意的一点是假若在放置过程中，部分血液已呈现凝固状态，则应即刻进行低温储存，如若较长时间内不做检测处理，血清样品应保存在温度为4℃的环境中，切记血清样品不得多次做冻融处理，否则对于样品的检测结果会有所影响。

1.4 检测病理组织

假设样品用于检测病理组织，则采集过程中的首要需求为保证样品采集的新鲜程度，应选择病状具有代表性的结构组织，且采集时应连同健康组织一起，以确保结构的完整性。采集样品的规格为长宽1～2cm，厚度为0.5cm，采集完成后立即进行固定处理，辅助材料为比例高达95%的酒精液体或是比例为4%酸碱度适中的甲醛缓冲液。

2 技术要点

2.1 样品适宜

猪样品所使用的作用不同，检测样品也会发生一定改变。假若需对疫病做具体检测，应选择具有较重疫病的猪样品。如若该疫病没有具体定论，则应采取全面采集的方法，例如猪瘟疫病检测时，应采取猪的淋巴结、全血等等各类结构进行检测以确定该疫病的起因。检测口蹄疫时，则应检测水泡皮、淋巴结等结构。

2.2 样品具代表性

以检测细菌的猪样品为例，样品选择时应选择未经过治疗的、病状极具代表性、病变情况尤为显著的猪样品；检测病毒的猪样品则应采取极具普遍性的猪样品；在检测猪的并发症时，应选择并发症状较为显著的猪样品。这样的选择方法会使得检测结果较为合理且能说明问题。

2.3 采集时间适当

采集过程中，对于采集的时间段亦有相关要求，应根据采集样品的特点合理化选择猪样品。例如在选择检测免疫抗体的猪样品时，应从注射疫苗的作用时间、疫苗类型等方面来全面考虑，用于分离病原体的猪样品，则应在病发时或症状较具代表性时方可达到最佳效果，病死的样品更具实效性，应在动物死的那刻立刻做采集处理。

2.4 无菌操作

假若样品用于病原组织及血清的检验时，无菌操作是采样过程中必须完成的一项重要操作，且参与采样处理的各项设备都应事先进行灭菌操作，用于尸体解剖检验的猪样品，则应在采样处理完成后对其进行病理的深入研究，以保障采集样品的可使用性，有效杜绝细菌、病毒等相关物质的干预，提升检测结果的准确程度。

2.5 样品需足量

由于检测方法及物质的不同，所需的猪样品的质量也存在较大差异，工作人员应依据相关检测内容科学化确定其用量[2]。用量是否足量具有两个检测标准，一方面相关人员所收集的猪样品数量需满足实验室检测对于量的需求，另一方面猪样品的采集数量尽可能留有剩余部分，因为采集数量的不足会导致采集难度的显著性提高，且整个采集过程在人力、时间上的消耗远高于材料满足时的情况[3]。