岳阳地区Rh(D)阴性献血者D变异型调查

苏湘晖,孙 昂,粟玉萍,陈 敏,谭 涛

(湖南省岳阳市中心血站输血研究室 414000)

到目前已发现人类有36个血型系统，对临床输血最为重要的是ABO和Rh血型系统。Rh血型是血型系统中最复杂、最具多态性的血型系统，其临床意义仅次于ABO血型系统，可引起严重的输血反应和新生儿输血反应。为了给临床医院提供及时、有效、安全的血液，笔者对2013-2017年410例初筛为Rh(D)阴性的血液进行确认试验，并对其表型、D变异型、不规则抗体筛查及抗体鉴定进行调查。

1 资料与方法

1.1一般资料 收集2013-2017年岳阳地区第1次无偿献血者[第1次做过Rh(D)阴性确认试验的献血者，第2次献血不被纳入此试验]在用单克隆IgM类抗-D常规检测初筛为Rh(D)阴性的血液进行确认试验。

1.2试剂和仪器 单克隆IgM类抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e,IgG类抗-D,抗人球蛋白试剂(IgG，C3d)，筛选细胞均由上海血液生物公司提供。 IgM+IgG类抗-D由Bioscot公司提供，谱细胞由Reagens公司提供。细胞洗涤离心机(KA-2200型，日本久保田公司),显微镜(CX41型，Olympus公司)。

1.3方法

1.3.1Rh(D)阴性筛查及确认 用单克隆IgM类抗-D试剂对所有标本进行初筛，常规鉴定为Rh(D)阴性的标本再分别用另一厂家的单克隆IgM类抗-D，IgM+IgG类抗-D，IgG类抗-D 3种试剂进行确认，如果3种试剂均为阴性，则判断为Rh(D)阴性。如果IgM+IgG类抗-D，IgG类抗-D与抗人球蛋白试剂进行间接抗人球蛋白试验有1管阳性，则判断为D变异型(弱D表型或部分D表型)，如果3管全都为阴性，则确认为阴性血。

1.3.2Rh(D)阴性血清学表型鉴定 将初筛为Rh(D)阴性分别用抗-C、抗-c、抗-E、抗-e试剂对Rh(D)阴性标本进行试管法血清学表型分型。

1.3.3不规则抗体筛选及鉴定 将初筛为Rh(D)阴性的献血者血清与筛选细胞和自身细胞用盐水法、凝聚胺法和抗人球法进行不规则抗体筛查。筛查结果为阳性的标本再与谱细胞和自身细胞进行抗体鉴定，确定其特异性。

2 结 果

2.1Rh(D)阴性献血者的血清学表型分布情况 410例无偿献血者初筛为Rh(D)阴性，确认为Rh(D)阴性的391例(95.37%),ccdee 219例(56.01%),Ccdee 125例(31.97%),CCdee 27例(6.91%),ccdEe 16例(4.09%),CcdEe 3例(0.77%),CCdEe 1例(0.25%)。

2.2RhD变异型的血清学表型分布情况 410例无偿献血者初筛为Rh(D)阴性经过确认，D变异型共19例(4.80%)，其中表型为ccDuEe 4例(21.05%),CCDuee 3例(15.80%),CcDuee 7例(36.84%),CcDuEe 5例(26.31%)。

2.3血清学不规则抗体筛查及鉴定 391例Rh(D)阴性无偿献血者血清中查出不规则抗体阳性共4例，均为IgG类抗-D抗体(1.02%)。19例D变异型献血者血清中检出1例gG类抗-D抗体(5.26%)。

3 讨 论

Rh血型系统是所有血型系统最复杂的血型系统，从临床上讲，除ABO血型系统外D抗原具有最重要的血型多态性。D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原[1]。根据红细胞上D抗原的有无，分为Rh阳性和Rh阴性。本调查的410例初筛为RhD阴性献血者经间接抗人球蛋白试验确认391例为RhD阴性(95.37%)，19例为D变异型(4.80%)。Rh血型系统其他重要的抗原有C、c、E、e，岳阳地区的RhD阴性人群以ccdee和Ccdee为主。与岳阳地区Rh血型表型调查相符[2]。

由于D抗原是由1号染色体短臂上的Rh基因表达，D基因重组、缺失、点突变、无意义突变以及mRNA的表达水平下降均会导致红细胞出现弱D表型或部分D表型的变异型抗原[3]。弱D红细胞带有完整的D抗原，只是表达减弱，并且具有所有的D表位，所以不产生抗-D，而部分D即有本部分D表位的缺失，剩下的D表位表达又减弱，可产生同种抗-D[3]。本调查的391例确认为RhD阴性献血者经不规则抗体筛查和抗体鉴定共检出IgG类抗-D抗体4例(1.02%)。19例D变异型中，1例(5.26%)产生抗-D,此例应归类于部分[4]。

为保证临床输血的有效性和安全性，初筛试验为RhD阴性经确认后为D变异型者，作为献血者时，应该视为RhD阳性供血，因为D变异型只是D抗原表达减弱或者缺失部分D正常表达，如果视为RhD阴性血输给阴性患者，就会刺激产生抗-D,会导致下次输血或妊娠发生输血反应或新生儿溶血症。D变异型作为受血者时应视为RhD阴性接受D阴性血，因为有的部分D已产生抗-D,如输入阳性血就会发生输血反应[5]。

综上所述，为了降低血液的报废率，在固定RhD阴性献血者充足的情况下，笔者对已产生抗-D抗体的阴性和变异型(部分D)献血者进行屏蔽。