影响动物疫病实验室检测结果准确性的因素

哈力米拉·拜斯汗，李才善，郭庆勇

（1.新疆塔城地区动物疾病控制与诊断中心，塔城 834700；2.新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐 830052）

0 引言

在动物疫病诊断中，如果仅靠临床诊断、病理学诊断，很难对相应的致病原作出明确鉴别。实验室诊断在动物疫病检验过程中发挥重要的作用，特别是对混合感染、合并感染严重的现状，通过利用实验室诊断方法采取各种措施，进一步明确致病原。但在实际动物疫病实验室检测时，常会受到内部和外部各种因素的影响，导致最终结果存在一定差异，甚至存在严重误差，影响检验结果的准确性。因此，需要充分认识影响动物疫病实验室检测结果准确性的各种因素，以采取针对性措施将其解决。

1 人为因素

动物疫病实验室诊断中，需要高素质的检测人员参与其中，人的因素是十分重要的影响因素，同时也是不可缺少的因素之一[1]。在实验室诊断工作开展中，有效降低人为因素造成的影响是提高实验室检验准确性的重要前提。影响最终检测结果准确性的人为因素主要包括相关检测人员的科学文化水平、发现问题解决问题的能力、工作的严谨程度、实验操作是否熟练，是否能解决实验操作中的各种问题等。如在进行常规血清学检查，如血凝试验、酶联免疫吸附试验时，移液器吹打力度的大小会显著影响整个样品的均匀混合程度和酶标反应板清洗的干净程度。每一个实验流程的反应时间会对最终的检测结果数值产生很大影响。此外，在实验室诊断中，如果不能严格按照相关标准进行无菌操作，很容易人为引进其他杂菌或病毒，最终影响检测结果，不利于及时发现带病动物[2]。如在进行牛流行性腹泻毒检测时，要求对工作环境进行超过30 min的紫外线消毒，确保超净台处于正常工作状态，同时在操作前需要对双手进行酒精消毒。在进行细菌培养时还应做好培养基的消毒工作，然后将其放置在超净工作台上等待使用。实验中还应确保整个操作环境的无菌和培养液的无菌。

2 仪器设备因素

仪器设备因素主要是指在动物疫病实验室诊断时，相应设备是否能发挥其应有的检疫检验作用。因为不同设备的生产厂家，不同技术型号和各种参数也存在很大差异，检测性能和技术参数之间更存在较大差异。在进行病料离心处理过程中，按照离心机的用途不同，主要分为高速离心机、常温离心机、冷冻离心机和低速离心机，相同的100 μL的移液器，实际值和标准值之间也存在一定误差，有的还存在很大的偏差。目前我国科技发展水平得到了一定发展，但与西方发达国家相比，还存在一定差异，在仪器设备制造中还存在各种缺陷。有条件的实验室尽量购进进口仪器，没有条件的实验室在仪器建构时，一定要从大生产厂家购置性能好的仪器设备。

3 样品因素

在进行动物疫病实验室诊断中，常用到的动物样品主要包括血液样品、血清样品、排泄物样品、分泌物样品、脏器组织样品等。其中血液样品和血清样品主要是在进行血清学实验室应用，血清样品的溶血情况或溶血程度会直接影响抗体水平的准确度和最终检测精确度。脏器组织样品在采集时是否具有典型性和代表性，对最终细菌、病毒、真菌检测结果也会存在很大影响。因此，在进行样品采集时，一定要确保样品采集的典型性、针对性。如在进行牛病毒性腹泻实验室诊断时，由于该疾病主要对犊牛造成的危害最为严重，而2月龄后的犊牛存活率相对较高，通常表现为体质衰弱、身体脱水，影响正常生长发育，精神状态正常，饮食无异。通过对病死犊牛进行解剖，可以发现，病变部位主要集中在消化道系统，常发生于胃和小肠。大多数病死牛的胃部被凝乳状的颗粒物填满，同时还伴有胃底黏膜充血出血现象。因此，在病料采集过程中，应采集病死牛的病变胃部组织和小肠道内容物，然后带回实验室，进行针对性的实验室诊断。在进行病料采集时，采集方法正确与否也会影响最终的检测结果。在采集血样时，通常根据牛的年龄选择采血部位，体重在50 kg内的犊牛，通常采集前腔静脉血液。而体重在100 kg以上的中大型牛主要采集耳缘静脉血液

4 检测方法因素

在进行动物疫病实验室检测中，检测方式和操作是否规范，也会对最终检测结果的准确性产生影响。进行动物检疫的方式多种多样，研究主要对应用较为常见的几种方式和手段进行分析。如细菌病毒分离鉴定、补体结合试验、病毒中和试验、沉淀试验、血凝试验、血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应试验、荧光抗体试验等。在进行具体实验室诊断时，不同检测项目采用的检测方式、检测方法也存在很大差异，而检测遵循的标准和操作规程也不同。即使是相同的检测项目，使用的检测手段也存在一定差异。通常使用的检测方式不同，最终获得的检测结果也存在一定差异。如在进行牛口蹄疫检测时，经常使用到的检测方式主要包括乳胶凝集试验和酶联免疫吸附试验，而酶联免疫吸附试验包括病毒抗体检测、基因缺失抗体检测2种方法。在多数情况下，由于核酸检测具有自身独特的特征，检测灵敏度更高，但稳定性较差，所以检测过程中一定要进行综合诊断，最终得到合理的诊断结果。

5 环境因素

环境因素主要是指在进行实验室诊断时所处的温度、湿度和实验室环境是否纯洁，是否存在致病菌[3]。在进行动物实验室诊断中，不管是血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验，还是其他实验室诊断过程，都对实验室的清洁度、温度、湿度有基本的要求，如果温度和湿度超过相应规范要求，会对样品的整体情况产生影响，进而导致样品和试剂不能发挥应有的作用，不能实现更好的反应，或者在整体反应中速度较为缓慢，时间较长，影响检测结果的准确性。在整体实验室诊断过程中，如果环境受到了其他致病原的污染，很容易在检测过程中引入其他杂菌，最终检测结果也会受到影响。因此，在进行实验室诊断时，需要相应的工作人员严格控制和检测环境，确保任何实验室诊断行为都能在无菌环境下进行，避免引入其他杂菌，保证检测结果的准确性，为动物疫病检疫诊断，提供准确、详实的数据支撑。

6 结束语

在动物疫病实验室诊断中，影响最终检测结果的因素多种多样，需针对存在的问题进行针对性分析，同时找到解决上述问题的多种对策。在实践中还需要不断探索和总结，不断改进动物疫病实验室检验手段、检验方法，提高实验室检验人员的工作技能，以促进畜牧业健康可持续发展。

本文根据工程教育专业认证标准、某化工专业培养计划、结合相关参考文献，以毕业要求3为例描述了毕业要求达成度的评价过程，重点介绍了定量评价过程，但对教学环节的形成性考核方式，尚需要进一步探讨。定性评价部分体系目前还不是很完善，需要通过文献查阅、调研和专家咨询建立完整、可行、细化的评价标准和评价过程。