动物沙门氏菌病的防制

2018-02-13严惠馨徐鹤峰佟彦林王宏军董国英

现代畜牧兽医 2018年2期

严惠馨，徐鹤峰，佟彦林，王宏军，董国英⋆

（1.北京师范大学全球变化与地球系统科学研究院，北京 100875；2.中国医科大学贝尔法斯特女王大学联合学院，辽宁沈阳 110122；3.锦州医科大学畜牧兽医学院，辽宁锦州 121001）

沙门氏菌病（salmonellosis）是由沙门氏菌引发的一类疾病的统称。动物患沙门氏菌病的情况广泛存在，有数据显示沙门氏菌病在家畜中的感染率一直居高不下，造成了严重的经济损失；在野生动物患病方面，美洲和欧洲禽类、刺猬均有报道感染该病[1]。因此，本文对动物感染沙门氏菌病从病原特征到防制进行如下总结。

1 病原特征

沙门氏菌病又称为副伤寒，其病原体为沙门氏菌（salmonella），是肠道菌科沙门氏菌属的一种革兰氏阴性短杆菌[2]，可分为肠炎沙门氏菌（Salmonella enterica）和邦戈尔沙门氏菌（Salmonella bongori）两个种[3]。目前已知沙门氏菌的血清型有2 500多种，各种血清型决定了疾病不同的流行程度，根据表面抗原的不同，可分为34个血清群，大多包括鞭毛抗原（H）、菌体抗原（O）和表面抗原（Vi），不同的抗原结构决定了不同的功能[4]。

大多数沙门氏菌无荚膜，有鞭毛和菌毛，能运动，是需氧或兼性厌氧菌；少数菌体吸附于细胞表面，无鞭毛和芽孢，不能运动。沙门氏菌对热、过酸或过碱性等极端外界环境的耐受力弱，最适生长温度为37℃，最适pH为7.4～7.6[5]，因此在自然环境下生存力强，还能利用污水中的营养物质进行繁殖。

2 流行病学

动物感染沙门氏菌病的情况比较常见，家禽最易发生感染。沙门氏菌病的主要传染源为患该病的动物和带有沙门氏菌的动物，一般病原体会寄生在这类动物的呼吸道、消化道和淋巴组织中，当自身免疫力降低时，沙门氏菌活化发生内源性感染。感染的主要途径为：患病或带菌家禽的乳汁、尿液、粪便、流产的胎儿和羊水中含有沙门氏菌，污染食物和水源，进而导致同环境下的健康动物患病；通过正常交配或人工授精手段进而使健康动物发生感染；通过鸟类和鼠类等的跨距离传播等。

沙门氏菌病常年发生，多雨和潮湿的环境条件下发病率高，动物发病后呈散发性或地方性流行。家禽患病主要是因为饲养环境污秽、潮湿，温度过低或过高，饲料和饮水供应不良，长途运输等因素。

3 临床症状

不同动物感染沙门氏菌病的临床表现略有不同，下面以5种易感动物为例进行简单介绍。

3.1 猪猪感染沙门氏菌病主要为亚急性和慢性，潜伏期从2 d到数周不等。主要症状为体温升高（40.5～41.5℃），呼吸困难，食欲废绝，精神委顿，眼有黏性或脓性分泌物，不喜运动，消瘦，粪便呈黄白色稀状，有恶臭味，最后身体机能衰竭死亡[6]。

3.2 牛牛感染此病呈昏迷状，主要表现为体温升高（40～41℃），食欲不佳，眼窝下陷，呼吸困难，体重下降，后期见下痢，排出黄色带有血丝的黏液状粪便，犊牛多数在发病后7 d内死亡，怀孕母牛多发流产现象，部分成年牛显现隐形经过，无明显症状，在粪便中可以检测到该菌株。

3.3 禽由于禽沙门氏菌病原体的抗原不同，因此禽类患病的情况复杂，主要包括鸡白痢、禽伤寒和禽副伤寒3种[7]。感染鸡白痢的病鸡中，雏鸡特征明显，主要表现为呼吸困难，伸颈张口，下痢，粪便呈白色稀状，排便时会污染周围绒毛结块，进而影响正常的排便。鸡伤寒在雏鸡中少见，成鸡精神沉郁，冠和肉髯皱缩泛白，羽毛蓬乱，粪便呈黄绿色。而雏鸡孵化24 d内感染禽副伤寒并发病的可能性大，发病时表现为迅速死亡，成年禽初期感染无明显症状，死亡率相对较低，症状为腹泻[8]。

3.4 狐狐类感染该病具有明显的季节性和地方流行性，潜伏期为3～20 d，有的患病狐类表现为体温升高（41～42℃），拒食，精神沉郁，不爱动，急性病例表现为呕吐，下痢，后呈昏迷状态，多在3 d内死亡。亚急性经过时，主要是体温上升（40～41℃），精神委顿，呼吸急促，食欲废绝，消化不良，被毛松乱，失去光泽，眼球凹陷而暗淡，四肢无力，明显消瘦，粪便为混有血丝的液体。慢性病例表现为肠胃机能紊乱，食欲不振，发生下痢，贫血，最终体重下降逐渐消瘦[9]。

3.5 貉貉感染该病主要症状为体温升高（40～41℃），精神沉郁，食欲废绝，呕吐腹泻，粪便多为白黄色液体状，味臭，少部分为黑色同时混有黏膜。发病后期出现严重脱水现象，体温下降，全身虚脱，部分出现休克或抽搐症状，最后逐渐消瘦而死亡[10]。

4 病理变化

4.1 猪急性病例剖检时主要表现为败血症，皮肤（尤其是腹部）上有血点，色暗带蓝，全身淋巴结出血肿大，肺脏变硬充血和出血。慢性病例剖检时主要表现为弥漫性肠炎和盲肠炎，死亡猪的淋巴结切面有坏死灶，可见有灰黄色干酪样结节，脾稍微肿大，肝脏有黄灰色坏死小点。

4.2 牛犊牛急性死亡大多出现败血症病变，典型特点为淋巴结出血肿大，脾脏萎缩并伴随脱水症状，心壁、腹膜、腺胃、小肠和膀胱黏膜有小点而出血，同时胆汁混浊[11]。成年牛大多出现急性出血性肠炎，剖检时表现为肠黏膜炎性潮红，有局限性坏死区。肠系膜淋巴结出血水肿，胆囊壁增厚，胆汁浑浊[12]。

4.3 禽雏鸡死亡剖检时可见肝脏充血肿大，有颗粒状灰白色结节，表面附着的纤维素性渗出物与腹膜黏连，肝坏死[7]。部分组织脏器散在点状出血，输尿管中含有大量的尿酸盐并发生扩张现象，肠腔堵塞，出现腹膜炎，卵黄吸收不良，内含变性卵黄。心肌、肺部、盲肠、大肠及肌胃肌肉中有坏死灶[13]。

4.4 狐死亡狐类剖检时可见可视黏膜呈白色或青紫色，胃内黏膜肿胀，充血或出血，肠系淋巴结肿大，切面呈灰色或偏红色[14]。脾脏、胆囊增大，其中脾脏呈现暗红色，胆囊充满浓稠的液汁，心肌变性。大脑实质水肿，侧脑室液体较多[15]。

4.5 貉死亡貉的尸体严重脱水，剖检时可观察到可视黏膜苍白，胃肠黏膜水肿、充血或出血。十二指肠上段发生溃疡，肝脏肿大，有散在坏死灶，脾、肾肿大，表面有出血点，肺部出现水肿，有出血性炎症，小肠后段和盲肠、结肠有轻微炎症，粪便呈明显的黏液性，肠内容物有脱落的肠黏膜，呈稀薄状[10]。

5 诊断

确诊动物是否感染沙门氏菌需要采集发病动物标本做分离和鉴定。不同动物所采取的诊断方法有所差异，目前主要有以下3种检测方法。

5.1 传统检测方法传统的国标法主要包括5个步骤，采样增菌、分离出疑似菌落、属种的鉴定、血清学分型、菌型的判断。由于沙门氏菌的血清型多，运用该法的检测时间过长，为此技术人员在传统检测方法的基础上不断改良。根据沙门氏菌能特异的分解丙烯乙二醇产生酸性物质，在分离培养基中加入丙烯乙二醇，通过指示剂的颜色变化进行该菌种的分离鉴定，缩短了检测时间[16]。还可向分离培养基中加入无色的沙门氏菌特异性酶的底物，根据酶的特异性反应产生的颜色变化对该菌种进行鉴定。

5.2 免疫学检测方法在沙门氏菌检测中免疫学检测方法发挥了重要的作用，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光免疫分析法（FIA）、免疫磁性分离法（IMS）等。

5.2.1 ELISA 是一项建立在抗原抗体反应和酶的高效催化作用基础上的技术，具有灵敏性高、特异性强、准确性好等的特点[17]。

5.2.2 FIA法其基本原理是将荧光素标记在靶细菌特异性抗体上，使其与样品中的靶细菌特异性结合，在荧光显微镜下观察荧光现象的技术，但是成本较高。

5.2.3 IMS技术在外加磁场的作用下，使已经偶联了特异性抗体的磁性颗粒与样品中靶细菌特异性结合，进而达到把靶细菌分离、浓缩的目的。IMS技术可直接检测细菌，其优点是特异性好，但是灵敏度还需要不断的完善提高[18]。

5.3 分子生物学方法分子生物学方法是用于沙门氏菌检测的最常用的方法之一，以目前广泛应用的聚合酶链反应（PCR）技术、基因芯片技术（DNA chip）、环介导等温扩增技术（LAMP）为代表进行简要的介绍[19]。

5.3.1 PCR技术是一项体外扩增特定DNA片段的技术，该项技术的特点为特异性强、敏感性高、准确度高[20]。在沙门氏菌的检测中应当注意引物的合理设计，同时根据特定种类的菌株设计合适的反应条件[16]。

5.3.2 DNA chip技术是在杂交测序的基础上衍生出来的一种DNA测序方法，使待测样品与基因芯片上的探针进行杂交，通过分析同位素法、化学荧光法等的结果，得到样品分子的相关信息，从而判断沙门氏菌是否存在。该技术的优点是在试验过程中可同时检测多种沙门氏菌，同时还会有耐药性等结果[21]。

5.3.3 LAMP技术该项技术是在等温条件下进行的一种扩增反应，特异之处在于需要针对靶基因的6个区域设计4种特异性引物。该技术操作简单，在PCR手段的基础上，提高了其敏感性、特异性和时效性，结果可用肉眼可以直接观察到。

6 防制

沙门氏菌病的防控可以概括为3个方面：首先要控制传染源，一旦发现疫情，应及时建立隔离区，对阳性动物进行处理，对受到污染的场地及时消毒。其次要切断传播途径，对可能发病的地区进行定期消毒和检疫，在养殖过程中要加强饲养管理，供给动物新鲜、高品质的饲料，同时保持饲养环境清洁等。第三要进行免疫预防，主要是疫苗的使用，其中针对特定菌株制成的单价灭活疫苗疗效良好，而通用疫苗效果一般。必要时可采取药物防治手段，一般多采用西药治疗方法中的抗生素治疗，该方法要根据具体动物的患病情况来选择使用。由于抗生素的大范围长时间使用，导致动物出现了不同程度的耐药现象，因此在条件允许的情况下，可以从患病动物体内分离出沙门氏菌进行药敏试验，选择治疗效果最好的抗生素类型。目前对于猪沙门氏菌病常用的抗生素为氟哌酸、阿莫西林、恩诺沙星等[22]；牛沙门氏菌病一般使用金霉素、链霉素、庆大霉素等[11]，以及磺胺类药物进行治疗；对于鸡沙门氏菌病常用的有头孢噻呋、土霉素和磺胺类药物[23]；对于狐沙门氏菌病常用链霉素、红霉素和青霉素；貉感染沙门氏菌病一般使用链霉素和新霉素等。在使用抗生素的同时，还可辅之以注射补液和樟脑油等。

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