新型中兽药复方桑杜口服液的有效成分研究进展

2018-02-12贾纪萍金礼琴陈晓兰章婷婷

畜牧与饲料科学 2018年9期

贾纪萍，金礼琴，陈晓兰，周瑶，张迪，章婷婷

（江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300）

中药口服液是在传统汤剂基础上发展起来的新剂型，其质量稳定、药量小、疗效确切、吸收快、易于保存、服用适口性好［1］，因此，口服中兽药越来越受到广大养殖户的青睐。复方桑杜口服液是一种新型中兽药免疫增强剂，由桑叶和杜仲两味药材煎煮而成。桑叶为桑科桑属植物桑的干燥叶，具有抑菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等作用［2］；杜仲属于杜仲科植物杜仲的干燥茎皮［3］，有增强机体免疫功能、抗菌、消炎、抗癌等作用［4］。笔者对复方桑杜口服液中桑叶和杜仲两味药材近10年的研究资料进行综述，重点介绍桑叶和杜仲有效成分分析方法的最新研究进展，以期为复方桑杜口服液的质量标准制定提供参考。

1 桑叶的有效成分分析

1.1 桑叶中的有效成分及药理作用

桑叶在中药中又名“铁扇子”，是囯家卫生部门认定的药食同源植物叶［5］，可用于制作桑叶食品、桑叶茶、桑叶饲料等［6］。桑叶中活性物质的提取主要采用浸提法、超声辅助提取法和微波辅助提取法。其药理活性成分有黄酮、生物碱、多糖、氨基酸、植物甾醇和微量元素等［7］。

桑叶中的黄酮类化合物主要包括槲皮素、紫云英苷、芦丁、桑黄酮H等［8］，这些成分是天然的强抗氧化剂，具有降血糖、降血压、抗衰老、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抑制脂质氧化和胆固醇吸收的作用。此外，还有雌激素样作用，以及解痉、镇痛等生理作用［9］。

桑叶多糖具有增强机体免疫功能［10］、抗氧化、降血糖、降血脂［11］和抗肿瘤、抗病毒等作用［12］。桑叶中的生物碱包括 1-脱氧野尻霉素（1-DNJ）、1α-脱氧野尻霉素、2α-脱氧野尻霉素、3α-脱氧野尻霉素、4β-脱氧野尻霉素等［13］。 1-DNJ 是一种糖苷酶抑制剂，具有降血糖、抗病毒和抗肿瘤转移等作用［14］。桑叶中植物甾醇含量比一般植物高3～4倍，主要包括β-甾醇、豆甾醇、菜油甾醇等，这些成分能够抑制肠道对胆固醇的吸收［15］。

1.2 桑叶中有效成分分析方法

孙莲等［16］以乙酸乙酯—水—甲酸—甲苯（17∶2∶2∶0.8）为展开剂，于高效硅胶 G板上展开，以AlCl3为显色剂，在365 nm波长处检视鉴别芦丁、异槲皮苷及紫云英苷。田从丽［17］和花蕾等［18］利用分光光度法，以芦丁为对照品，采用亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠显色法，在510 nm波长处测定桑叶中的总黄酮含量。郑娟等［19］以0.1%磷酸—乙腈为流动相，在348 nm波长处梯度洗脱测定桑叶中的绿原酸、芦丁、木犀草苷含量。邸学等［20］以 0.1%磷酸乙腈溶液（A）和磷酸（0.16%）—三乙胺（0.18%）水溶液为流动相，在360 nm波长处梯度洗脱测定桑叶中的绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量。欧阳臻等［21］和陆广富等［22］对桑叶中的多糖进行提取纯化，并采用苯酚—硫酸法测定桑叶中的多糖含量。赵丽玲等［23］以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌，对桑叶提取物的提取工艺和提取物抑菌活性进行了研究。李凡等［24］采用雷氏盐比色法检测桑叶中的总生物碱。李玲等［25］以正丁醇—冰醋酸—水（5∶2∶1）为展开剂，在硅胶G板上展开，以茚三酮为显色剂鉴别1-DNJ。

2 杜仲的有效成分分析

2.1 杜仲中的有效成分及药理作用

杜仲中活性成分的提取方法主要有水提法、乙醇提取法、超声提取法、微波提取法、酶提取法、超临界 CO2流体萃取法［26］，主要含有木脂素类、环烯醚萜类、苯丙素类、黄酮类、多糖类化合物，以及微量元素等［27］。

木脂素类活性成分主要包括松脂醇二葡萄糖苷、杜仲脂素、橄榄素等［28］，其中，松脂醇二葡萄糖苷广泛存在于杜仲皮中，具有降血压的功效［29］。

环烯醚萜类活性成分主要包括京尼平苷酸、京尼平苷、桃叶珊瑚苷、杜仲醇等［4］。京尼平苷酸和京尼平苷可作为抗衰老的重要药物，在降低血压的同时，可提高机体抗肿瘤活性；桃叶珊瑚苷也能应用于伤口的消炎处理，还可以显著提高伤口的自愈能力。

黄酮类成分有槲皮素、山萘酚、黄芩素、紫云英苷等，具有广泛的抗菌、消炎、抗氧化、提高机体免疫力、抗高血压的作用［30］。

多糖类能够应用于网状内皮系统的活化反应，达到提高机体免疫作用的重要目的［31］。Xia 等［32］研究发现，杜仲叶多糖具有一定的抗运动疲劳功效；Chun等［33］研究表明，杜仲中的多糖成分能够诱导肿瘤细胞凋亡从而直接杀伤肿瘤细胞。

苯丙素类活性成分主要包括咖啡酸、绿原酸及香草酸等。研究表明，绿原酸具有抗氧化、抑菌、抗病毒、抗炎、抗肿瘤、保肝等作用［34］。

2.2 杜仲中有效成分分析方法

已有文献资料中关于杜仲薄层鉴别方法的报道较少。程德军等［35］通过2次制备薄层色谱纯化杜仲叶粗提物得到绿原酸。邢亚楠等［36］采用高效硅胶 G 板，以乙酸乙酯—甲酸—水（7∶2.5∶2.5）为展开剂，在365 nm波长处检视鉴别绿原酸。刘玲等［37］采用高效硅胶G板，以三氯甲烷—正丁醇—水—乙酸（1∶7∶1∶1）为展开剂，在日光下检视鉴别松脂醇二葡萄糖苷和京尼平苷酸。

王丽楠等［38］采用 HPLC 法，以乙腈—0.4%磷酸（13∶87）为流动相，检测波长为 327 nm，测定杜仲不同部位的绿原酸和松脂醇二葡萄糖苷的含量。吕强等［39］利用 HPLC 法，以甲醇—水（35∶75）为流动相，检测波长为240 nm，测定绿原酸的含量；将甲醇和磷酸按照二元高压梯度洗脱，检测波长为240 nm，测定京尼平苷酸的含量；应用硝酸铝—亚硝酸钠比色法测定总黄酮的含量。冯薇薇等［40］采用HPLC法，以甲醇—0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱，利用PDA-3000光电二极管阵列检测器的多波长检测，分析京尼平苷酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷的含量。姜晓芳等［41］采用 HPLC 法，以甲醇—水—冰醋酸（13∶87∶1.5）为流动相，检测波长237 nm，测定京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷的含量。孙佳等［42］采用UPLC法同时测定杜仲药材中的桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷含量。郑义等［43］采用RP-HPLC法，以乙腈—0.2%磷酸（15∶85）为流动相，检测波长为 277 nm，测定松脂醇二葡萄糖苷的含量。