2型糖尿病合并Hp感染的胃溃疡患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

王昊

[摘要]目的探讨2型糖尿病合并Hp感染胃溃疡患者外周血中T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法选取45例2型糖尿病合并Hp感染的胃溃疡组作为研究对象（DM组），同期住院的50例不伴有2型糖尿病仅存在Hp感染的胃溃疡组作为对照组，采用流式细胞仪免疫荧光法检测两组T淋巴细胞亚群的百分数并对结果进行统计学分析，并观察两组患者白介素-17（IL-17）以及C-反应蛋白水平（CRP）。结果DM组和对照组CD4⁺和CD4⁺/CD8⁺的测定结果相比较，差异均有统计学意义，DM组的CD4⁺呈显著负相关（P<0.01），CD4⁺/CD8⁺呈显著负相关（P<0.05）。DM组患者IL-17、CRP水平明显高于对照组。结论2型糖尿病合并Hp感染的胃溃疡患者存在细胞免疫功能紊乱，提示与Hp感染相关。

[关键词]2型糖尿病；Hp感染；胃溃疡；T淋巴细胞亚群

[中图分类号]R587.1；R573.1 [文献标识码]B [文章编号]2095-0616（2017）17-227-03

胃溃疡（gastric ulcer，GU）是指发生于胃的溃疡，是常见的消化道疾病。幽门螺杆菌（helicobacterpylori，Hp）感染是GU最常见的病因，根除Hp已成为治疗Hp相关性GU的共识。研究发现Hp与胃肠外疾病也存在一定的关系，如慢性阻塞性肺疾病、糖尿病等。近年来，2型糖尿病合并消化性溃疡相关研究受到越来越多重视，T淋巴细胞是机体重要的免疫细胞群，可维持机体正常的免疫功能。本研究通过对伴和不伴2型糖尿病合并Hp感染的胃溃疡患者外周血T淋巴细胞亚群的测定探讨2型糖尿病合并胃溃疡机体细胞免疫的变化。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2014年10月-2015年10月我院消化内科收治的经胃镜、病理、快速尿素酶和呼气试验检查明确诊断Hp阳性的胃溃疡患者，并排除患有感染性及免疫性疾病，心脑血管疾病及恶性肿瘤，近期未用质子泵抑制剂，H₂受体拮抗剂或抗生素者，入选105例患者分为两组，其中DM组为伴有2型糖尿病者的GU组（2型DM诊断符合国际糖尿病联盟的糖尿病诊断标准）45例，男28例，女17例，年龄（60.7±4.9）岁；对照组为不伴糖尿病的GU组50例，男32例，女18例，年龄（63.6±5.3）岁，两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2仪器和方法

1.2.1胃镜检查和C¹³尿素酶呼气实验 患者就诊时行胃镜检查明确诊断胃溃疡，且经活检组织尿素酶试验和C¹³呼气实验两项均阳性定为Up感染。活检组织尿素酶试验：患者行胃镜检查时统一取距幽门2cm内胃窦小弯侧组织1块经快速尿素酶试验盒（由珠海市克迪科技开发有限公司提供）显色。C¹³呼气实验（由河北省协和药业有限公司提供）：患者空腹漱口后在维持正常呼气情况下，用吸管将气缓慢呼入1号样品管维持4-5s，拔出吸管后立即扭紧试管盖。此收集为0min呼气。后用80-100mL凉饮用水送服一袋尿素[¹³C]散剂后静坐。30min后按上述收集呼气方法再次收集呼气进入2号样品管，扭紧试管盖。将收集的2个编号的样品管分别在相应的仪器上进行¹³CO₂检测。结果判定：通常以30min样品所测¹³CO₂的δ‰值的差值表示，即检测值=δ%。（30min）-δ%（0min）。检测值≥4.0±0.4时，判定受试者为Hp阳性。

1.2.2T淋巴细胞亚群检测方法患者晨起空腹坐位取肘正中静脉血4mL，采用流式细胞仪（购自北京博奥森生物技术有限公司）单克隆免疫荧光法，用乙二胺四乙酸抗凝，取CD3+、CD4+和CD8+细胞单克隆抗体试剂各20μL（均购自北京博奥森生物技术有限公司）加入到全血100μL中混匀，置15min，制備标本后放流式入细胞仪分别进行免疫荧光检测，每个标本计数5000个细胞，计算CD3+、CD4+和CD8+细胞百分率。

1.2.3IL-17、CRP水平检测方法采用Elisa法（试剂盒购自上海卖约尔生物科技有限公司）检测IL-17水平；免疫比浊法检测CRP水平（试剂盒由北京九强生物技术股份有限公司提供）。

1.3统计学处理

采用SPSS17.0软件统计，计算各组均值，数据均值用（x±s）表示，组间比较用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1两组患者外周T淋巴细胞亚群水平比较

两组的CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺比较见表1，DM组较对照组的CD4⁺，CD4⁺/CD8⁺具有显著差异，DM组水平显著低于对照组，而CD3⁺，CD8⁺则无明显差异。即2型糖尿病合并Hp感染的胃溃疡患者较不伴2型糖尿病的胃溃疡患者机体存在细胞免疫功能紊乱。见表1。

2.2两组患者血清IL-17、CRP水平比较

DM组患者IL-17水平高于对照组，DM组CRP水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3讨论

胃溃疡（gastric ulcer，GU）是临床常见的消化道疾病，因胃酸，胃蛋白酶，Hp感染或各种理化等致病因素破坏能力超过胃黏膜防御能力时，就可能发生胃溃疡。幽门螺杆菌（helicobacterpylori，Hp）是一种覆盖胃黏膜的黏液层与胃上皮细胞定居繁殖的革兰阴性螺旋状杆菌，目前Hp感染是胃溃疡重要的致病因素，2型糖尿病（diabetesmellitus，DM）是以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，容易引发一系列的代谢紊乱。常由于糖代谢紊乱，免疫功能受损等因素，易引起其胃黏膜，呼吸道等部位合并感染。研究发现Hp感染率较高，易合并糖尿病慢性并发症。糖尿病患者胃黏膜毛细血管基底膜增厚，微血管内皮细胞增生肿胀，致使胃黏膜血流量明显减少，细胞再生修复能力下降，黏膜防御能力减弱，使Hp更易于对胃黏膜造成严重的损害。因此，Hp感染是糖尿病合并消化道溃疡发病主要病因之一。T淋巴细胞是人体重要的免疫细胞群，外周血成熟T细胞主要有CD4⁺（辅助性T细胞）和CD8⁺（细胞毒性T细胞）2个亚群，正常情况下，它们在体内进行免疫应答时相互协同，相互制约，以维持免疫应答的相对平衡，平衡失调会导致免疫功能紊乱，影响机体的免疫保护机制。Hp相关性胃溃疡患者外周血T淋巴细胞亚群水平较低，有效根除Hp治疗后，患者T淋巴细胞亚群水平增高，提示Hp感染机体后，患者机体内存在的胃黏膜细胞损伤及免疫防御系统破坏。T淋巴细胞介导的免疫异常可造成胰岛β细胞的损伤，在2型糖尿病的发生发展中起重要作用。2型糖尿病患者体内的代谢紊乱可使淋巴细胞、树突细胞等免疫细胞有不同程度损伤，导致T2DM患者免疫功能紊乱，这可能也是T2DM患者容易发生感染的原因之一。

本研究显示，2型糖尿病合并Hp阳性的胃溃疡患者与对照组相比较，CD4⁺，CD4⁺/CD8⁺显著降低，而CD3⁺，CD8⁺变化不明显，提示机体存在细胞免疫紊乱和功能缺陷，Hp在其中发挥重要作用。一般认为循环中CD3⁺及CD4⁺减少，CD4⁺/CD8⁺比例降低是免疫缺陷的重要特征。在观察IL-17和CRP水平上发现，DM组IL-17、CRP水平明显高于对照组。IL-17是促炎性细胞因子，IL-17水平升高提示人体发生炎症反应，对人体免疫功能产生影响。CRP是人体血浆急性时相蛋白，参与细胞凋亡、激活补体功能，调理感染，CRP水平升高也显示有明显感染。对于合并糖尿病的患者，Hp感染通过释放内毒素入血不仅促进胃溃疡发生，还使炎性因子和氧自由基生成增加，加重胰岛素抵抗，造成患者血糖难以控制，加速糖尿病并发症的进程，具体机制有待于进一步研究。由此可推断，对于合并糖尿病的胃溃疡患者，提高Hp根除率，同时有效控制血糖，可提高胃溃疡的愈合率。

（收稿日期：2017-06-05）