慢性萎缩性胃炎动物模型研究进展

刘福花 秦晓光 龙俊华 李 梅

（甘肃中医药大学针灸推拿学院，甘肃 兰州 730000）

慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）是指胃黏膜局限性或广泛性的固有腺体萎缩、数量减少、黏膜层变厚为主要病理改变的一种慢性疾病[1]，临床主要表现为胃脘痞满、饱胀、反酸、嗳气等。最常见的病因主要为幽螺门杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染[2]，发病机制目前尚不清楚。在中医学中，历代医家根据其临床表现，将慢性萎缩性胃炎归于“痞证”范畴。慢性萎缩性胃炎是消化系统最常见的疾病之一，世界卫生组织将CAG定为胃癌癌前病变[3]。经研究表明，慢性萎缩性胃炎的发病率呈逐年上升趋势，并且以老年人最为多见[4]。查阅近几年相关文献发现：慢性萎缩性胃炎动物模型复制方法较多，但存在造模周期长、可重复性差、耗时耗力等问题。本文对慢性萎缩性胃炎动物模型复制方法进行相应的综述，从而更好地总结出一种造模周期短、省时省力的造模方法，进而更好地提供实验参考依据。

1 病证结合造模

1.1 脾虚型CAG模型 刘晓颖等[5]采用脱氧胆酸钠和阿司匹林水溶液交替饮用加免疫损伤法，联合耗气破气（川厚朴、枳实、大黄以3∶3∶2比例，100%煎剂隔日灌胃，3 mL/只）加饥饱失常法，同时隔日喂饲料，共4周。

1.2 肝郁型CAG模型 邹世洁等[6]在CAG造模的基础上，从第8周开始，加用钳子夹大鼠尾部，使之保持激怒、争斗状态，每天30 min，同时每3周0.1%肾上腺素腹侧皮下注射2次，0.1 mL/只，造模时间28～44周。 任建[7]通过干顶、刺激Wistar大鼠情志法，饥饱失常法等复制慢性胃炎肝郁型模型。实验发现，慢性胃炎肝郁证组大鼠的黏膜皱璧变化明显，有显著的差异（P＜0.05）。

1.3 肾虚型CAG模型 陈小野等[8]对Wistar大鼠采用脱氧胆酸钠和阿司匹林水溶液交替饮用加免疫损伤，在CAG造模的基础上，从实验第6周开始，加用甲基硫氧嘧啶（MTU），以0.08%浓度加入脱氧胆酸钠溶液或阿斯匹林溶液中自饮，造模时间30～46周。

1.4 湿热型CAG模型 徐珊等[9]采用MNNG配合酒精造模不变的基础上，从实验第7周开始，大鼠饲料换为高脂、高糖饲料喂养，同时每天将大鼠置入造模箱内（恒温干燥箱内置超声雾化器和湿温度表），调节箱内温度（33±2） ℃，相对湿度 （95±3） %，每天1次2 h，共4周。

2 病因造模

慢性萎缩性胃炎的发病可能与幽螺门杆菌（Hp）感染、饮食习惯、免疫因素、胆汁或十二指肠液反流、体质因素、遗传因素等有关。

2.1 幽螺门杆菌（Hp）培养法 在60%～90%的慢性萎缩性胃炎患者的胃黏膜中可培养出幽门螺杆菌。大量研究证实，幽门螺杆菌是慢性胃炎的重要致病因素[10－11]。曾志荣[12]在建立幽门螺杆菌感染大鼠模型时，采用了含有cagA基因和vacA基因的Hp悉尼菌株（Sydney Strain 1，SS1），成功地建立了幽门螺杆菌长期感染大鼠模型。唐旭东[13]采用幽门螺杆菌感染大鼠及水杨酸钠乙醇混合溶液灌胃的综合方法，成功地建立幽门螺杆菌感染CAG大鼠模型。研究表明找到适合感染菌株，并在接种幽门螺杆菌前给予损伤胃黏膜及改变胃内PH值等预处理措施增加模型病理变化程度是解决大鼠感染模型的关键。幽螺门杆菌作为慢性萎缩性胃炎的重要致病因素，虽然可成功造模，但病理性质不稳定且造模周期长[14]。

2.2 热盐水法 生活方式、饮食习惯与慢性萎缩性胃炎的发生具有不可分割的关系。张沥等[15]通过临床研究报道，长期过热过盐饮食可导致胃黏膜萎缩。陶梅等[16]对大鼠采用热水（55℃蒸馏水，2.5 mL/只）灌胃法，32周后光镜下大量上皮细胞脱落，细胞破损，局灶性糜烂，电镜下腺体和腺体细胞萎缩，胞质内细胞器减少。慢性胃炎造模成功。陶梅等[17]对大鼠25℃15%盐水连续灌胃24周，24周后大鼠胃黏膜光镜结果显示：胃黏膜腺体明显缩小，黏膜肌层的平滑肌呈束状增生插入黏膜固有层中。李艳等[18]用55℃15%氯化钠灌胃，每日1次，2.5 mL/次，共12周。第12周末，模型组胃标本病检均符合慢性萎缩性胃炎表现，造模成功。过热过咸饮食造成的慢性萎缩性胃炎符合我国人群本病的发病特点[19]，虽然是一种稳定而便捷的大鼠慢性萎缩性胃炎模型复制方法，但是实验室大多提供的是适宜大鼠日常饮用的自来水，由于实验条件限制无法达到所需热水温度，并且造模周期较长。

3 联合法造模

3.1 脱氧胆酸钠为主 刘磊等[20]采用大鼠自由饮用脱氧胆酸钠和低浓度无水乙醇，并配高浓度无水乙醇灌胃及饥饱失常（2天饱食，1天禁食），13周后造模成功。翦林宏等[21]使用脱氧胆酸钠配合酒精造模，成功率高（100%）。冯秀雪[22]综合酒精、水杨酸钠、脱氧胆酸钠和氨水，22周后成功建立CAG模型。脱氧胆酸钠配合酒精的造模方法，必须注意配置脱氧胆酸钠溶液时每天应现配现用，但酒精对胃黏膜刺激性较大，并且造模周期长，大鼠易出现老化现象并且死亡率较高。

3.2 MNNG诱导剂 陆为民等[23]先用去离子水配成1 g/L的储备液（每周配制1次），4℃冰箱避光保存，用前以自来水稀释为50 μg/mL的溶液，装入避光饮水瓶让大鼠自由饮用，盐酸雷尼替丁胶囊0.03 g/kg灌胃，配合饥饱失常（2天足量喂食，1天禁食）多因素综合法造模，20周后通过相关病理结果观察，确保造模成功。彭继升等[24]以120 μg/mL的N-甲基-N-硝基-N-亚硝基基胍 （MNNG）溶液灌胃为基础，配合自由饮用浓度为0.05%氨水溶液，进食含0.03%盐酸雷尼替丁大鼠饲料，进行造模。32周后病理切片显示慢性萎缩性胃炎黏膜表现，造模成功。朱萱萱等[25]以浓度为167 μg/mL的N-甲-N-硝基-亚硝基胍（MNNG）稀释液给大鼠自由饮用，同时以0.017 mol/L浓度的MNNG l mL/只灌胃，共8周。结果大鼠胃黏膜形成溃疡，在溃疡底部见大量中性粒细胞浸润，伴腺体上皮细胞轻度-中度ATP。

虽然目前多采用以MNNG诱导剂为主的综合造模法，但普遍存在造模周期长、费用昂贵、造模剂量不统一、病理改变时间出现不同等问题[26]。若剂量过低易造成浅表性胃炎模型，过高则造成癌模型。目前对MNNG的剂量使用尚未形成统一的标准。使用MNNG时应注意：因MNNG试剂在光照下成分易发生分解，所以给大鼠饮用时，将配置好的溶液必须装入避光的饮水瓶内，每24 h更换1次，并记录每天饮用量。查阅大量文献，MNNG试剂使用时都是用蒸馏水配置，但实际操作时蒸馏水并不能完全溶解MNNG，而二甲基亚砜（DMSO）能将其完全溶解。

3.3 水杨酸钠为主 张淑琴等[27]以200 mL/L水杨酸钠溶液给大鼠灌胃，1次/日，2 mL/次，灌胃前后1 h禁食水。前3周自由进食水，后3周自由饮水，1日足量喂食，1日禁食；隔日在温水中游泳10 min。6周后，CAG模型复制成功。邵学辉[28]以200 mL/L水杨酸钠溶液和300 mL/L乙醇混合溶液给大鼠灌胃，1次/日，2.5 mL/次，灌胃前1h禁食水。配合前4周过度劳倦法和后4周隔日喂食不禁水法。8周后模型复制成功。以水杨酸钠为主的造模方法，虽然造模周期短，但灌胃前后1 h需禁食水，操作不方便。

4 结论

关于慢性萎缩性胃炎动物模型的复制方法众多，包括：病证结合造模法、幽螺门杆菌感染造模法、热盐水法、脱氧胆酸钠配合酒精造模法、MNNG诱发大鼠CAG模型、水杨酸钠为主造模法，但均存在造模周期长、不便于实际操作等问题。查阅文献，目前多采用以MNNG诱导剂为主的综合造模法，存在造模周期长、费用昂贵、造模剂量不统一等问题，缺乏统一的参考标准，故在以后的实验研究中应继续努力研究出造模周期短、死亡率低、成功率高、省时省力，更成熟稳定的造模方法。