高压氧联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗皮肤难愈伤口疗效及机制研究

常和平，李 旭，王 伟，王 威，叶 凡

（河北医科大学第三医院，河北 石家庄 050051）

目前，临床四肢开放型创伤病例逐年增加，对此类患者而言，伤口不愈合或感染均会产生较大心理压力和经济负担，不利于康复及预后[1]。目前，针对皮肤难愈伤口的治疗虽有较多方案，但效果并不十分理想。有报道指出，高压氧属于安全性较好的非侵袭性疗法，不仅对缺血缺氧型脑损伤疗效较好，同时对创面愈合也有明显促进作用[2]。重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor，rh －bFGF）对创面的修复效果较好[3]。但尚无联用上述2种方案治疗难愈创面的报道。为此，笔者通过分析高压氧联合rh－bFGF治疗皮肤难愈伤口的临床疗效及可能机制，为临床治疗提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入标准：年龄大于20岁；存在皮肤难愈伤口；对此次研究知情同意，并签署知情同意书；研究已获得医院医学伦理委员会评审通过。

排除标准：免疫风湿类疾病；心脑血管类疾病；其他部位存在慢性炎症；血液疾病或恶性肿瘤。

病例选择与分组：选择我院2015年1月至2017年1月收治的创伤后皮肤损伤患者120例，根据随机数字表法分为常规治疗组、高压氧组、rh－bFGF组及联合组，各30例。4组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。详见表 1。

表1 两组一般资料比较（n＝30）

1.2 研究方法

常规治疗组给予反复清创、消肿换药或二次植皮与皮瓣移植等方式治疗7 d，高压氧组在此基础上给予高压氧治疗，选择GY2875／03－12空气加压舱，设置治疗压力为 0.2 MPa（2 ATA），时间为 2 h，其中升压及减压时间均为 25 min，吸氧 1 h，中间休息 5 min，1次 ／日，治疗7 d。rh－bFGF组在常规治疗基础上给予rh－bFGF（北京双鹭药业股份有限公司，国药准字S20020024，规格为每瓶35 000 U）外用治疗将其溶入等渗盐水内，混匀，以180 U／cm2的用量喷洒在创面上，数分钟后以纱布进行覆盖包扎，1次／日，治疗7 d。联合组在常规治疗基础上给予高压氧联合rh－bFGF治疗，其中高压氧及rh－bFGF的治疗方法同上，1次／日，治疗7 d。

1.3 观察指标及疗效评价标准[4]

对比各组疗效，不同时期血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子 β1（TGF － β1）及结缔组织生长因子（CCN2／CTGF）水平，以及 C 反应蛋白（CRP）及肿瘤坏死因子 －α（TNF－α）水平。于治疗前、治疗 3 d后及治疗7 d后分别抽取各组患者的晨间空腹静脉血各4 mL，以 3 000 r／min的速率离心 15 min后提取血清，应用双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定VEGF，CRP，TNF－α水平，试剂盒均购自深圳晶美生物工程公司。另于治疗前、治疗3 d后及治疗7 d后分别取各组患者伤口处修剪下的多余肉芽组织，制成匀浆后通过免疫组织化学法检测TGF－β1及CCN2／CTGF水平，试剂盒均购自武汉博士德生物制剂公司，严格按说明书的步骤逐条操作。

显效：伤口区组织肿胀已消退，血运良好，边缘愈合；有效：伤口区组织肿胀已消退1／2，血运尚可，边缘部分愈合，无坏死；无效：伤口区组织肿胀消退少于1／2或肿胀加剧，血运不佳，边缘皮瓣坏死。总有效＝显效＋有效。

1.4 统计学处理

应用SPSS 21.0统计软件进行处理和分析，计数资料用率表示，采用 χ2检验；计量资料用±s表示，采用 t检验，多组间计量资料的比较采用方差分析，计算F值，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表2至表4。

3 讨论

临床开放性创伤伤后皮肤创面易发生迁延不愈亦或是反复感染，这不仅增加了临床治疗的难度，而且也对预后和康复造成了较大影响。伴随当前四肢开放性创伤病例的日益增多，以往使用的清创换药和二次手术等促进创面愈合的方式虽然也有一定效果，但对皮肤难愈伤口的疗效仍有较大的提升空间[5－7]。有报道表明，对存在创伤后皮肤损伤的患者辅助给予高压氧治疗，有利于加速皮肤创面的愈合及控制创面感染[8－10]，但少有研究提及高压氧联合rh－bFGF用于治疗皮肤难愈伤口的作用效果。rh－bFGF属肽类物质，有着广泛的生物学活性，对于肉芽组织的生长具有较好的促进作用。

本研究结果显示，联合组的显效率及总有效率均明显高于其他3组（P＜0.05），且常规治疗组、高压氧组以rh－bFGF组的疗效比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示高压氧联合rh－bFGF治疗皮肤难愈伤口的疗效更好。究其原因，可能在于高压氧与rh－bFGF的协同作用发挥了更好的效果，高压氧能明显提升患者伤口组织区域的氧分压，同时在高压作用下，机体血液内氧分子的物理溶解度明显升高，明显改善伤口周围的氧供，从而促进伤口愈合。rh－bFGF这一肽类物质能促进组织细胞的有丝分裂，对于源自中胚层和神经外胚层等区域的细胞存在营养供应及促增殖效果，进而加速肉芽组织的生长[11－13]。本研究结果还显示，组间比较，治疗3 d及7 d后，联合组的 VEGF，TGF －β1，CCN2／CTGF 水平均明显高于其他3组（P＜0.05），但其他3组之间的上述指标相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）；组内比较，各组治疗后 3 d及 7 d的 VEGF，TGF－β1，CCN2／CTGF 水平均明显高于治疗前，且治疗后7 d的水平又明显高于治疗后3 d的水平（P＜0.05），提示各组治疗后的伤口创面均有一定程度的愈合，但联合组患者的创面愈合效果最佳，分析原因可能是高压氧与rh－bFGF联用起了综合作用。VEGF，TGF －β1，CCN2 ／CTGF 均为创面修复的促进因子，高压氧能有效改善患者伤口创面中的缺血和缺氧状态，利于血管有关成纤维细胞自身的活动及分裂，还有利于胶原纤维合成，从而加速创面愈合。rh－bFGF有着上皮细胞及成纤维细胞等细胞的趋化剂作用，并使此类细胞发生有丝分裂，促使纤维连接蛋白产生，最终使得成纤维细胞架构获得重建而促进伤口愈合[14－15]。本研究结果亦显示，治疗3 d及7 d后，联合组患者的CRP及TNF－α水平均分别明显低于其他3组（P＜0.05），但其他3组之间的上述指标相比，差异均无统计学意义（P＞0.05）；组内比较，各组治疗 3 d及 7 d后的 CRP及TNF－α水平均明显低于治疗前，且治疗7 d后的水平又明显低于治疗3 d后的水平（P＜0.05），提示联合组患者治疗后的炎症水平明显更低，患者恢复更好。原因主要可能与高压氧及rh－bFGF具有较好的杀菌及强化免疫等作用有关。CRP及TNF－α均为临床常用的炎性反应标志物。高压氧能提升白细胞的杀菌效果，强化吞噬细胞的吞噬病原及清除坏死组织作用，最终强化伤口组织的抗感染能力，对CRP及TNF－α等炎症因子的水平具有较好的改善作用，而rh－bFGF能刺激创面有关修复细胞的不断增殖，并可使炎症细胞及创缘细胞逐渐迁移至创面，最终降低了机体的炎症因子水平[16－17]，因此高压氧联合rh－bFGF治疗皮肤难愈伤口的可能机制在于二者皆可促进血管的生成，并抑制炎性反应[18－19]。

表2 各组患者临床疗效比较[例（%），n＝30]

表3 各组患者CRP及TNF－ 水平比较（±s，n＝30）

表3 各组患者CRP及TNF－ 水平比较（±s，n＝30）

注：与本组治疗前比较， P ＜0.05；与本组治疗 3 d后比较， P ＜0.05；与联合组同时点比较，＃P ＜0.05。表 4同。

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表 4 各组患者 VEGF，TGF－ 1，CCN2／CTGF水平比较（±s，n＝30）

表 4 各组患者 VEGF，TGF－ 1，CCN2／CTGF水平比较（±s，n＝30）

V E G F（p g ／m L） T G F － 1（ g ／L）组别常规治疗组高压氧组r h－b F G F组联合组F值P值治疗前4 3.1 8 ± 1 5.2 4 4 2.9 4 ± 1 4.3 3 4 3.0 6 ± 1 3.2 8 4 2.8 9 ± 1 5.0 7 1.0 6 8 0.2 3 1治疗3 d后1 1 3.4 8 ± 2 5.6 4 ＃1 1 0.9 4 ± 2 4.8 2 ＃1 1 5.3 3 ± 2 9.8 5 ＃1 3 9.4 8 ± 3 2.1 1 4.9 7 7 0.0 0 1治疗7 d后1 5 9.7 4 ± 3 3.4 8 ＃1 6 3.2 7 ± 2 6.9 9 ＃1 6 1.4 6 ± 2 5.3 2 ＃1 8 2.2 2 ± 3 4.9 7 1 2.3 7 4 0.0 0 0治疗前2 2.2 4 ± 7.1 8 2 2.1 8 ± 6.9 4 2 3.0 6 ± 7.1 2 2 2.5 0 ± 6.5 3 1.3 5 7 0.1 6 0治疗3 d后4 0.1 8 ± 1 0.3 3 ＃4 1.2 7 ± 1 1.0 6 ＃4 0.5 4 ± 9.8 2 ＃5 1.8 8 ± 9.7 1 5.0 2 3 0.0 0 0治疗7 d后5 1.2 2 ± 9.5 7 ＃5 2.0 2 ± 1 0.3 4 ＃5 1.9 4 ± 9.6 6 ＃7 1.2 5 ± 2 3.6 8 9.8 5 7 0.0 0 0 C C N 2 ／C T G F（n g ／m L）组别常规治疗组高压氧组r h－b F G F组联合组F值P值治疗前3.1 2 ± 1.0 4 3.1 0 ± 1.2 1 3.1 2 ± 1.1 7 3.1 3 ± 1.2 5 1.2 2 4 0.2 0 4治疗3 d后5.2 1 ± 2.1 0 ＃5.1 8 ± 2.0 7 ＃5.2 0 ± 1.9 7 ＃7.2 1 ± 1.8 8 4.8 7 4 0.0 0 3治疗7 d后7.0 8 ± 3.2 6 ＃7.1 1 ± 3.5 1 ＃7.1 0 ± 3.6 8 ＃9.1 4 ± 4.5 3 1 0.0 2 1 0.0 0 0

综上所述，高压氧联合rh－bFGF对皮肤难愈伤口的疗效较好，其可能机制在于二者均可促血管生成和抑制炎性反应，临床可考虑以高压氧联合rh－bFGF方式治疗皮肤难愈伤口。

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