髓过氧化酶试剂（免疫比浊法）在日立7180型全自动生化分析仪上检测性能验证分析

蔡爱华 李启平 李伟华 陈丽娟 吉林省医疗器械检验所 （吉林 长春 130062）

内容提要： 目的：开展髓过氧化酶试剂（MPO）检测前对MPO试剂盒在全自动生化分析仪上检测性能进行评价。方法：终点法（向上），主波长600nm，反应温度37˚C，比色杯光经1cm，R1180μL，R260μL，样本量8μL，反应时间10min，进行精密度、正确度、线性范围和抗干扰能力的验证。结果：MPO的高值浓度样本和低值浓度样本的批内精密度分别为CV高=0.8%，CV低=3.0%，高值浓度样本的批间精密度为R=0.9%；MPO正确度偏倚为3.05%；在MPO范围为25～1300ng/mL，线性相关系数r=0.9999；抗干扰能力试验偏差小于10%。结论：MPO检测试剂盒在日立7180型全自动生化分析仪上检测性能符合要求。

全自动生化分析仪具有检验迅速、灵敏度高、试剂用量少等优点，使得临床检验效率得到较大提升，现已成为医院和检验机构不可或缺的生化检验设备，因此全自动生化分析仪检验结果的准确性和可靠性尤为重要。为保证其检验质量，根据《医学实验室质量和能力认可准则》的要求，本文对免疫比浊法MPO试剂在全自动生化分析仪上检测性能进行验证[1-3]。采用髓过氧化酶试剂盒和日立7180全自动生化分析仪组成检测系统用于临床检验，对其准确度、精密度、线性范围、抗干扰能力等进行研究验证。

1.仪器与试剂

1.1 仪器

日立7180全自动生化分析仪，Milli-Q超纯水机。

1.2 试剂

实验所需试剂材料由厂家A提供。

髓过氧化酶测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）（Lot：20171020），高、低值质控品（Lot：20171020）；准确度比对试剂盒由厂家B提供：髓过氧化物（MPO）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）（Lot：71103B12）。

2.方法与结果

2.1 检验方法

实验条件：终点法（向上），主波长600nm，反应温度37˚C，比色杯光经1cm，R1180μL，R260μL，样本量8μL，反应时间10min。

校准程序采用厂家A试剂盒配套校准品多点校准，采用非线性法校准处理。

统计学分析：所有数据应用Excel 2007进行处理。

2.2 精密度试验

在所内质控的前提，保证重复性条件下，以厂家提供的高值和低值质控品为样本，重复测试试剂盒20次，由此计算出试剂盒的批内精密度，以高值质控品为样本，分别测定3个不同批号试剂盒，每个批号测试3次，分别计算3批试剂之间的批间相对极差，即为批间精密度。批内精密度的标准要求为CV≤10.0%。批间精密度标准要求：相对极差R≤10.0%。结果为CV高=0.8%，CV低=3.0%，R=0.9%，小于厂商规定的要求，符合标准。

2.3 正确度试验

以试剂盒配套的质控品为试验样本，连续测量20次，计算测量值的平均值，由此计算得均值与质控靶值的偏倚。正确度要求：偏倚≤20%。实验结果均值为432.8ng/mL，质控靶值为420ng/mL，偏倚为3.05%，小于允许偏倚范围20%，符合标准要求。

2.4 线性范围试验

用纯化水将厂家提供的线性样本按照不同比例稀释成合适的浓度，范围为25～1300ng/mL，将结果平均值采用线性回归与相关分析，得出相关线性方程，计算相关系数r。厂家线性范围标准要求为线性相关系数r≥0.990。在MPO范围为25～1300ng/mL，线性相关系数r=0.9999，符合标准。

2.5 抗干扰能力试验

参考NCCLS EP-72A文件要求进行抗干扰验证试验，将血清要求与干扰物充分混匀，分别测量3次，计算平均值，并与预期值进行比对。比对结果显示加入干扰物（抗坏血酸：10mmol/L，TBil：40mg/dL，血红素：200mg/dL，TG：200mg/dL，类风湿因子:75IU/mL）的样本与没有加入干扰物的样本结果偏差＜10%，符合标准要求，满足临床需求。

3.讨论

医学技术的不断发展和进步，临床检验工作已进入自动化新时代。全自动化生化分析仪具有高准确性、高精密度、高效率和灵活性强等特点，在现代检验工作中承担大部分的生化分析工作，在各医院和各检验机构的应用已广泛普及，大大提高了生化检验的速度，成为实验室必备的检验仪器[4,5]。再者，检测试剂盒技术不断提高，新品种层出不穷，显著提高了检验效率与检验质量。按照医疗机构临床实验室管理办法和国家医学实验室认可委员会的具体要求，新的仪器或方法在应用前都需要进行系统适用性验证，检验试剂、方法和设备是否符合相关检验要求[5,6]。因此本所对髓过氧化酶的检验试剂盒采用本所日立7180全自动生化分析仪进行方法学验证。

综上所述，本所采用日立7180全自动生化分析仪对厂家A所生产的髓过氧化酶测定试剂盒进行检测，对精密度、准确度、线性范围和抗干扰试验进行验证分析，所得结果均符合各项要求标准。该试剂盒检测方法为免疫比浊法，与日立7180型全自动生化分析仪组成的检测系统，上述验证指标均符合使用的要求。