病毒性脑炎患儿脑脊液和血清胶质纤维酸性蛋白的检测及其临床意义*

曹玉红 张立毅 张光运 曹开方 曹艳华

(1.第四军医大学西京医院儿科，陕西 西安 710032；2.北京大学基础医学院，北京100191； 3.第四军医大学西京医院神经内科，陕西 西安 710032； 4.第四军医大学口腔医院口腔颌面医学影像科，陕西 西安 710032； 5．济南军区总医院儿科，山东 济南250031)

病毒性脑炎是儿童时期常见的中枢神经系统感染性疾病，不同的患者病情轻重不等，轻者可自行缓解，预后良好，重者可遗留神经系统后遗症，甚至死亡[1,2]。寻找能反映该病脑损伤的特异性标志物，用以早期判断患者病情的严重程度、评估预后、指导治疗有重要临床意义，也是广大学者研究的热点[3,4]。国外学者研究发现，病毒性脑炎患者胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平升高，与患者病情轻重及预后密切相关[5-7]，国内罕见此方面的研究报道。我们应用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对38例病毒性脑炎患儿急性期脑脊液和血清GFAP含量进行了检测及分析，探讨其与疾病严重程度以及预后之间的关系，现将结果报告如下。

1 对象与方法

1.1 一般资料 本组病例为2013年1月～2016年12月我院神经内科及儿科住院的病毒性脑炎患儿38例(病例组)，其中男22例，女16例，年龄2.2～13.0岁。均符合第八版《儿科学》病毒性脑炎的诊断标准[8]。病情等级划分采用中枢神经系统感染严重程度评分量表[9]，根据患儿临床症状体征和脑脊液压力、常规、生化以及头部影像学、脑电图等情况，将38例患儿又分为轻度组(0～l3分)15例、中度组(14～26分)13例和重度组(27～39分)10例等三个亚组。对所有患儿电话或门诊随访1～2年，有后遗症8例(后遗症组)，其中智力障碍2例，智力障碍伴癫痫2例，癫痫2例，运动障碍1例、精神异常1例；无后遗症30例(无后遗症组)。另选无神经系统疾病而需外科手术的腰麻患儿30例作为对照组。两组患儿性别、年龄无显著差异(P<0.05)。

1.2 方法 脑脊液及血清GFAP检测 病例组及对照组患者均于入院1周内腰穿留取脑脊液2 mL，同时抽取肘静脉血2 mL，脑脊液和静脉血均低温离心机(4℃)2OOO r/min离心10 min，留取上清，置-80℃冰箱中保存待检。采用酶联免疫吸附双抗体夹心法定量检测GFAP，试剂盒为Abnova公司产品，操作方法严格按说明书进行。

2 结果

2.1 病例组与对照组脑脊液和血清GFAP水平比较 病例组和对照组脑脊液GFAP含量分别为(1.767±1.132)μg/L和(0.234±0.091)μg/L，血清GFAP含量分别为(0.489±0.239)μg/L和(0.197±0.070)μg/L。病例组脑脊液和血清GFAP含量高于对照组(P<0.01)，病例组脑脊液GFAP含量高于血清(P<0.01), 见表1。

表1病例组和对照组脑脊液和血清GFAP含量比较(μg/L)

Table1GFAPofcerebrospinalfluidandseruminthecasegroupandcontrolgroup

分组n脑脊液GFAP血清GFAP病例组381767±11320489±0239对照组300234±00910197±0070t83147146

2.2 38例不同程度病毒性脑炎患儿脑脊液和血清GFAP水平比较 重度组、中度组、轻度组三个亚组脑脊液GFAP含量分别为(3.440±0.597)μg/L、(1.638±0.260)μg/L和(0.764±0.088)μg/L；重度组脑脊液GFAP含量高于中度组 (P<0.01)，中度组高于轻度组(P<0.01)。重度组、中度组、轻度组血清GFAP含量分别为(0.829±0.169)μg/L、(0.414±0.101)μg/L和(0.328±0.092)μg/L，重度组血清GFAP含量高于中度组和轻度组(P<0.01)，中度组和轻度组比较无差异(P>0.05)，见表2。

表2病例组各亚组患儿脑脊液和血清GFAP蛋白含量比较(μg/L)

Table2GFAPofcerebrospinalfluidandseruminpatientswithdifferentseverity

分组n脑脊液GFAP血清GFAP重度组103440±05970829±0169中度组131638±02600414±0101轻度组150764±00880328±0092F18369356953

2.3 38例不同预后患者脑脊液和血清GFAP水平比较 后遗症组和无后遗症组三个亚组脑脊液和血清GFAP含量比较差异均显著(P<0.01) ，见表3。

表3病例组不同预后患儿脑脊液和血清GFAP水平比较(μg/L)

Table3GFAPofcerebrospinalfluidandseruminpatientswithandwithoutsequelae

分组n脑脊液GFAP血清GFAP后遗症组83675±03730875±0155无后遗症组301258±05740386±0123t143369455

3 讨论

近年来，中枢神经系统感染脑损伤的特异性生化标志物的研究得到了临床医生和研究人员越来越多的关注。目前发现的脑损伤相关标记物较多，如S100β、神经元特异性烯醇化酶、白细胞介素6、基质金属蛋白酶9等，但这些标记物不仅仅存在于中枢神经系统，心脏损伤、软组织损伤、乳腺癌、黑色素瘤、神经母细胞瘤、小细胞肺癌、结直肠癌等疾病亦可引起上述指标升高，这些均影响到治疗决策和预后评估[10,11]。

GFAP是中枢神经系统中星形胶质细胞的主要中间丝蛋白，是星形胶质细胞的特异性标记物。高等脊椎动物中枢神经系统损伤后，星形胶质细胞变得活跃，并以典型方式反应，称为星形胶质细胞增多症，特征是GFAP快速合成和含量增加，GFAP体液水平是评估星形胶质细胞增多和激活的重要手段，间接反馈神经损伤的程度[12]。国内外学者报道，中枢神经系统疾病如脑外伤、脑出血、脑梗死、早产儿脑损伤等患者脑脊液和(或)血清GFAP含量增高，有望成为评估脑损伤患者病情和预后的指标[13-20]。

国外研究表明，中枢神经系统感染患者GFAP等水平可升高，GFAP有望成为中枢神经系统感染后脑损伤的标志物。体外细胞培养实验表明，辛德毕斯病毒神经毒细胞株SVNI导致星形细胞数目减少，GFAP明显升高，揭示星形细胞与神经元类似，也是病毒侵犯的靶细胞[7]。Petzold 等对24例急性西尼罗河病毒脑炎患者进行了脑脊液GFAP和神经丝蛋白的检测，58%的病人两种标志物均升高，与尸检报告神经元和胶质破坏一致，揭示西尼罗河病包括西尼罗河热的神经侵犯作用[5]。Studahl 等检测了13例Ⅰ型单纯疱疹病毒脑炎患者脑脊液GFAP水平，发现急性期GFAP明显升高，GFAP水平在45天内下降，揭示在患病一个月内病毒对神经元和神经胶质细胞的损害[6]。

本研究显示，病毒性脑炎患者急性期脑脊液和血清GFAP水平显著升高，脑脊液GFAP水平高于血清。我们推测病毒性脑炎后发生脑实质充血、水肿、炎性细胞浸润、神经细胞变性、坏死等病理改变，引起血脑屏障通透性增加，星形胶质细胞坏死、活化增生，从而导致血浆GFAP水平升高。另外，我们也发现病毒性脑炎重度组脑脊液GFAP高于中度组，中度组高于轻度组，重度组血清GFAP高于中度组和轻度组，而且后遗症组GFAP的含量明显高于无后遗症组，说明病毒性脑炎患儿急性期GFAP含量增加与疾病严重程度和预后相关，与文献报道相符[5,6]。因此检测病毒性脑炎患儿的脑脊液和血清GFAP含量的变化，对于判断急性期脑损伤的严重程度、评估预后、寻找更佳的治疗方法及调整治疗方案等方面有着重要临床意义。

4 结论

病毒性脑炎患儿急性期脑脊液和血清GFAP检测含量增加与疾病严重程度呈正相关，故检测病毒性脑炎患儿GFAP含量的变化，有助于判定脑组织受损的严重程度及评估患儿的临床预后。

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