山羊肝内管道联合分色铸型标本的制作

廖启超,肖长进,李雅琦,易华山,马鲜平

(西南大学动物科学学院 重庆市兽医科学工程研究中心,重庆 荣昌 402460)

在畜禽解剖学的教学过程中,动物标本是最好的、最直观的教具和观察材料。因此,动物解剖标本的制作显得尤为重要。在教学过程中,一件高水准的标本,可以把书本上的理论知识直观地展现在学生面前,理论与实际相结合,加深学生对理论知识的理解。肝内管道的结构错综复杂[1],传统的学习方式仅仅是通过看书看图片掌握肝内管道的结构,很显然不能够满足学习者对肝内管道的认识。本文通过对山羊肝内管道联合分色铸型标本的制作,对管道铸型标本的制作可积累一定的经验、思路及操作要领,同时为畜禽解剖学提供丰富的教学资源。在形态学课程的教学方面会有很强的借鉴和推广价值,以及良好的示范作用。

1　试验材料

1.1试验动物 购买本地山羊3只,体重15～20 kg。

1.2试验药品 速眠新、ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物)[2]、丙酮、盐酸、氢氧化钾、油画颜料。

1.3试验器械 电子秤、镊子、手术刀、组织剪、止血钳、解剖盘、烧杯、量筒、注射器、胶管、竹筒、缝合线、腐蚀缸等。

1.4插管的制作 插管尾部的制作:将针头的针管部分全部折断,磨平断端,用针头的膨大部作为插管的尾部。

插管头部的制作:截取直径约0.5 cm、长度约5 cm长的竹筒,把两端磨钝,其中一端离管口约1 cm处用刀片环形划出浅槽,方便绑线用,制成竹筒式插管的头部;将16号针头的尖端磨钝作为针头式插管的头部。取6 cm左右的乳胶管,两端分别与竹筒和针头尾部连接,用缝合线结扎牢固,制成竹筒式插管。将乳胶管的两端分别与磨钝的16号针头和针头尾部连接结扎,制成针头式插管。

2　试验方法

2.1配置填充剂 将50 g ABS加入到500 mL丙酮中,放置5～7 d溶解后可用,然后分成4份,分别加入黄、绿、红、蓝4种不同颜色的油画颜料,颜料的量待填充剂显色均匀即可。

2.3分离待灌注的管道 用剪刀或镊子将肝动脉、胆总管、门静脉和后腔静脉(与肝背缘连接处,用于灌注肝静脉)分离出来,并穿线待用。

2.4插管、结扎 分别对肝动脉、胆总管、门静脉及后腔静脉内插入与其管径大小匹配的自制插管,将其结扎,并用止血钳固定,以防插管在灌注过程中脱离待灌注的管道。

2.5灌注 灌注前对管道内进行抽气处理,用50 mL的注射器接在插管的尾端抽取待灌注管道内的残留液体和空气,待乳胶管变扁平时为宜,然后用止血钳在乳胶管的近尾端夹住。

联合灌注标本的灌注顺序一般是先灌小管道后灌大管道,以防止先灌注较大管道对小管道形成挤压之势。本试验先后按4个步骤完成灌注。第一步:灌注肝动脉,用20 mL的塑料注射器吸取20 mL的红色填充剂,放置1～2 min待气泡完全消失后将其注入肝动脉内,开始灌注时,管道中的压力小,填充剂可以较快的注入,当灌注量逐渐增多,管道内的压力增大时,应缓慢注入,直到手推注射器压力较大,看到乳胶管稍膨胀之后停止操作,用止血钳夹住乳胶管,防止填充剂倒流,随后缓慢退下注射器。第二步:用黄色填充剂灌注胆管,方法同第一步。为防止填充剂进入胆囊造成灌注压力减小,胆管铸型不充盈,可将胆囊先行结扎。第三步:用50 mL的塑料注射器吸取绿色填充剂灌注门静脉,方法同第一步。第四步:用蓝色填充剂灌注肝静脉,方法同第三步。本试验中的灌注剂量分别为肝动脉7～15 mL,胆管8～10 mL,门静脉30～40 mL,肝静脉20～30 mL。灌注剂量与标本大小、填充剂的浓度、灌注顺序及标本显示出的疏密程度有关。在实际操作过程中,应根据标本的具体用途适当增减灌注量。

2.6硬化 将灌注完毕的肝脏放置水中24 h(常温)。

2.7腐蚀 将硬化好的肝脏放入腐蚀缸内,然后加入30%HCl,腐蚀液以刚好淹没器官为宜,腐蚀5～7 d。

2.8冲洗 首先用自来水冲洗,清洗干净之后,使用弱碱浸泡3～5 h,防止酸性残留,造成标本色变。

3　结果与讨论

采用本试验制作的山羊肝内管道铸型标本轮廓清晰明确、立体感强、构型美观、色彩鲜艳(见中插彩版图1),通过观察标本可将肝内分布错综复杂的不同管道,以及各管道的起始、行程、分支、分布、引流范围等清晰地呈现出来,在教学科研及科普教育中,将会发挥其积极的作用。

制作肝内管道铸型标本常用的填充剂有,ABS[3]、过氯乙烯[4]、自凝牙托材料[5],不同的填充剂其性能不同,配置方法不同,应根据所做标本的观察目的来选择理想的填充剂[6-7]。本试验直接采用ABS溶于丙酮作为填充剂,配置容易,操作简便。

灌注是铸型标本制作中最关键的一步,而灌注工具的优劣直接影响到灌注效果。通过查阅相关文献资料,有关对灌注用插管的详细描述很少,有学者[3]用头皮针灌肝总管和肝动脉,用输液管灌肝静脉和门静脉,因这两种插管在灌注前无法创造负压条件,在灌注后无法保证管内高压环境,制作的管道铸型标本容易出现末端细支不到位,插管处的较大管道不饱满。因ABS丙酮填充剂硬化较快,通过采用补灌的方法增加大管道的饱满度并不理想。本试验采用改进后的自制插管具有3个优势:第一、插管管径与待灌注管道的内径大小匹配,便于结扎,防止漏液;第二、插管采用乳胶管能在灌注前通过抽气以保持待灌注的管道内形成负压状态,有利于灌注剂快速到达管道远端;第三、灌注结束时填充剂充满乳胶管形成高压环境,有利于大管道成型饱满,不需补灌。

参考文献: